硫酸-高氯酸-鉬銻抗比色法測(cè)定土壤全磷的注意事項(xiàng)

趙金蘭 張樹蓮 祁建峰

摘要 針對(duì)應(yīng)用硫酸-高氯酸-鉬銻抗比色法測(cè)定土壤全磷過(guò)程中影響測(cè)定值的因素進(jìn)行了闡述,包括樣重、消煮時(shí)間、定溶濃度、顯色時(shí)間與溫度等,并說(shuō)明了測(cè)定過(guò)程中各環(huán)節(jié)應(yīng)注意的事項(xiàng),以供參考。

關(guān)鍵詞硫酸-高氯酸-鉬銻抗比色法;測(cè)定;土壤全磷;影響因素;注意事項(xiàng)

中圖分類號(hào)X833文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼B文章編號(hào) 1007-5739(2009)21-0234-01

從2007年起至今,門源縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心依托農(nóng)業(yè)部實(shí)施的《測(cè)土配方施肥補(bǔ)貼》項(xiàng)目,采集全縣不同地區(qū)不同土質(zhì),并就氮、磷、鉀、有機(jī)質(zhì)、酸堿度等指標(biāo)進(jìn)行了分析測(cè)定。土壤中含磷化合物絕大部分是難溶性的,能被水或弱酸溶解的數(shù)量很少,很難被作物吸收利用,因此門源地區(qū)農(nóng)作物經(jīng)常出現(xiàn)缺磷癥狀。通過(guò)對(duì)土壤含磷量的測(cè)定,可以了解土壤中磷的豐缺狀況,為合理施用磷肥提供科學(xué)依據(jù)。全磷的測(cè)定方法有硫酸—高氯酸—鉬銻抗比色法、硫酸—高氯酸—鉬抗比色法等多種,其中前者是最常用的一種,該方法具有操作簡(jiǎn)單、對(duì)酸度要求不太嚴(yán)格的特點(diǎn),適應(yīng)于一般化驗(yàn)室分析。

1影響硫酸—高氯酸—鉬銻抗比色法全磷測(cè)定值的因素

一是樣重。樣重過(guò)大,如0.220 1g,用吸光值計(jì)算P2O5在土壤中的含量時(shí)數(shù)值會(huì)偏小,使得平行樣出現(xiàn)不平行情況。樣重過(guò)小,則數(shù)值偏大。二是消煮時(shí)間。消煮時(shí)間一般要求45~60min。若消煮時(shí)間過(guò)短,小于45min,煮出的溶液顏色和溶液粘度均達(dá)不到要求,溶液顏色呈現(xiàn)為灰白色。溶液粘度小,還會(huì)影響調(diào)整酸度時(shí)的顏色變化,引起加入的氫氧化鈉溶液的量過(guò)多或過(guò)少,影響結(jié)果計(jì)算的準(zhǔn)確性。消煮時(shí)間大于60min,會(huì)造成溶液焦糊。三是定容濃度。定容時(shí)超過(guò)容量瓶刻度線,造成溶液濃度過(guò)稀,定容顯色后溶液呈現(xiàn)的微藍(lán)色過(guò)淡,在分光光度計(jì)中讀出的吸光值與同等樣品相比,數(shù)值偏小。四是顯色時(shí)間。顯色時(shí)間達(dá)到30min,顯色完全。顯色時(shí)間達(dá)不到30min,會(huì)使顯色不完全,測(cè)出的吸光值偏小;顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),待測(cè)液顏色過(guò)濃,測(cè)出的吸光值偏大,或使分光光度計(jì)不讀值。五是顯色溫度。顯色溫度低于10℃,待測(cè)液出現(xiàn)藍(lán)色沉淀,影響測(cè)定結(jié)果。

2硫酸—高氯酸—鉬銻抗比色法的注意事項(xiàng)

一是準(zhǔn)確稱樣。稱取0.25mm孔徑的烘干土樣0.2g(精確到0.000 1g)于50mL凱氏瓶中,樣重不能少于0.200 0g,也不能多于0.220 0g。平行樣樣重要基本接近,稱樣器要始終保持干凈,否則測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。二是把握好消煮程序的每個(gè)環(huán)節(jié)。加入3mL硫酸和10滴高氯酸消煮時(shí),開始溫度不能太高,否則溶液濺出會(huì)造成損失,這個(gè)過(guò)程約需15min;當(dāng)消化至高氯酸霧狀白煙消失后,再提高溫度,這個(gè)過(guò)程需要30~45min,整個(gè)消煮過(guò)程需要45~60min,消煮時(shí)間絕不能少于45min。消煮過(guò)程中每間隔15min要輕輕搖動(dòng)凱氏瓶。凱氏瓶上必須放置彎頸小漏斗,以免溶液濺出。三是正確洗液與定容。待測(cè)溶液用蒸餾水洗入100mL容量瓶?jī)?nèi)過(guò)程中,沖洗應(yīng)少量多次,洗液時(shí)凱氏瓶不能離開容量瓶瓶口,以防止原液灑出,影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。若原液灑出應(yīng)用吸管將原液吸入容量瓶中。洗完后輕輕搖動(dòng)容量瓶,將溶液完全冷卻后,用蒸餾水定容到容量瓶刻度線,靜止澄清(最好過(guò)夜)。定容液不能超過(guò)容量瓶刻度線。定容時(shí)蒸餾水不能太熱,蒸餾水溫度過(guò)高會(huì)影響定容體積。待測(cè)液濃度過(guò)稀或過(guò)濃,都會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。四是精確分倍與調(diào)酸。吸取靜止澄清5mL待測(cè)液置于50mL容量瓶?jī)?nèi),加水約20mL及2,4-二硝基酚指示劑1滴,待測(cè)液顯微黃色,再加提前配制好的40mL的氫氧化鈉溶液1~2吸管(5~10mL)調(diào)酸度,待測(cè)溶液變成無(wú)色溶液時(shí)為止,然后用蒸餾水定容到50mL容量瓶中,顯色30min。若分倍時(shí)吸取的原液量小于5mL時(shí),待測(cè)液濃度過(guò)稀,影響測(cè)定結(jié)果。五是顯色液、指示劑隨用隨配。在配制顯色液時(shí),抗壞血酸必需完全溶解于鉬銻抗貯備液中,配制時(shí)用玻璃棒輕輕攪動(dòng)溶液,當(dāng)顯色液顏色由淡黃色變?yōu)樯铧S色時(shí),表示抗壞血酸完全溶解。顯色液見光容易分解,要隨用隨配。配制指示劑時(shí),2,4-二硝基粉(保存在陰暗避光處)必須溶于95%的酒精中,若酒精濃度是99%,一定要稀釋為濃度為95%的酒精。六是控制好顯色時(shí)間和溫度。顯色時(shí)間必須達(dá)到30min后立即比色,而且比色溫度要控制在15℃以上,溫度越高越好。若溫度低于10℃,顯色后有藍(lán)色沉淀發(fā)生,影響比色結(jié)果。七是調(diào)整波長(zhǎng)。開機(jī)調(diào)整波長(zhǎng),比色時(shí)波長(zhǎng)一定要調(diào)到700nm,切記要與土壤速效磷測(cè)定比色波長(zhǎng)660nm相區(qū)別。八是及時(shí)比色。參比液(蒸餾水中加3mL濃硫酸和10滴高氯酸后與樣品一同煮沸)和待測(cè)液倒入比色皿中,液面不能超過(guò)比色皿的刻度線。分光光度計(jì)要提前預(yù)熱30min。然后,在T%狀態(tài)下關(guān)蓋調(diào)滿度100,打開蓋調(diào)零,調(diào)穩(wěn)后在ABS狀態(tài)下測(cè)吸光值(E)。九是結(jié)果計(jì)算采用四舍六入五留雙。如計(jì)算數(shù)值0.677 4應(yīng)計(jì)為0.677,0.677 6應(yīng)計(jì)為0.678,0.677 5應(yīng)計(jì)為0.678,0.678 5應(yīng)計(jì)為0.678。

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