丹參注射液對慢性胰腺炎的治療作用①

張洪宇 趙浩亮 郭強

(山西醫科大學第一附屬醫院普外科 山西太原 030001)

慢性胰腺炎(CP)是胰腺實質的反復性或持續性炎癥致胰腺部分廣泛纖維化或鈣化,或伴有腺泡萎縮,胰腺導管內結石形成,假囊腫形成的一種疾病。

慢性胰腺炎的形態學特征是胰腺組織的進行性纖維化,胰腺纖維化主要是由于胰腺組織中以膠原為主的細胞外基質(extra cellular matrix,ECM)合成與沉積增加,降解減少,兩者失去動態平衡所致[1]。HA是細胞外間質成分的一種大分子葡胺多糖,在細胞粘附,創傷愈合,腫瘤發生和血管形成中起重要作用。LN是一種重要的ECM成分,廣泛存在于動物及人類細胞基底膜基質中。丹參是臨床常用傳統中藥,能改善微循環、有抗凝、促進纖維蛋白溶解,抗氧自由基,抑制血小板聚集,能改善細胞功能的作用[2]。本研究旨在探討觀察丹參注射液對實驗性胰腺纖維化血清中HA和LN表達的影響,初步探討其對胰腺纖維化的治療作用。

1 材料與方法

1.1 材料

雄性Spraque-Daw ley大鼠,體重200～300g,購自山西醫科大學動物實驗中心。三硝基苯磺酸(TNBS)為Sigma公司產品(批號107K5008)。丹參注射液購于福建古天藥業有限公司,HA和LN試劑盒購于武漢博士德生物工程有限公司。

1.2 方法

1.2.1 動物分組和造模 雄性大鼠50只隨機分成5組:正常組、模型組、丹參大、中、小劑量干預組各10只。模型組及干預組采用胰膽管中注入2%三硝基苯磺酸溶液的方法[3],制備慢性胰腺炎模型。造模后,干預組大鼠術后72h肌肉注射不同劑量的丹參注射液,正常組、模型組均肌肉注射等量生理鹽水,各組大鼠均術后第4周處死。

1.2.2 檢測指標和方法 所有觀察對象抽取靜脈血,分離血清,轉離心,取上清液進行檢測。采用光度酶聯免疫分析法(ELLSA)檢測正常組,對照組,干預組中的HA和LN的含量。部分胰腺組織做病理切片,膠原Ι染色,進行纖維化分析。

1.2.3 統計學方法 采用SPSS 11.0統計軟件進行統計分析處理,所有數據用(±s)表示,含量正常組和干預組比較采用Dunnett檢驗,各個干預組之間的比較采用LSD-t檢驗。

2 結果

2.1 胰腺組織學觀察

正常組大鼠胰腺無明顯病理改變,模型組大鼠胰腺明顯萎縮,可見胰腺間質炎性細胞浸潤,間質膠原纖維增生,胰管增生擴張,管周及胰腺小葉內纖維化伴炎癥細胞浸潤,腺泡萎縮。干預組中亦發生了胰腺纖維化,但較模型組纖維化程度減輕,且隨著丹參干預組劑量的增加胰腺纖維化程度呈現逐步減輕的趨勢。

2.2 血清中HA和LN的含量

2.3 丹參干預組中各劑量組的療效

由上述表1,圖1、2可以看出,小劑量,中劑量,大劑量組對慢性胰腺炎均有療效,其中以大劑量組的療效最為明顯。

3 討論

圖1 透明質酸各組均數比較線圖

圖2 透明質酸各組均數比較線圖

胰腺纖維化與慢性胰腺炎的關系十分密切,慢性胰腺炎的主要病理特征是胰腺纖維化,胰腺纖維化可是慢性胰腺炎遷延不愈,二者相互促進、相互影響[4]。目前已經公認氧化應激是導致胰腺纖維化的一個重要因素,其在組織炎癥和修復的過程中氧化應激激活靜息狀態的胰腺星狀細胞(pancreatic stellate cell,PSC),通過降低機體抗氧化能力和增加氧化損傷參與慢性胰腺炎的纖維化過程。LN屬于結構性蛋白,存在于基底膜的透明層中,在胰腺纖維化是沉淀于胰腺血竇,使胰腺血竇毛細血管化,增加胰腺血竇阻力,使胰腺血清中LN含量增高[5]HA作為細胞外基質的成分及合成時的中間產物,其血清濃度可一定程度反應細胞外基質的沉積量及活躍程度。因此通過血清中HA和LN的含量測定可以判斷胰腺纖維化程度。

丹參有效成分為丹參酮(Ⅰ、ⅡA、ⅡB)、異丹參酮(ⅠⅡA),現代藥理研究表明:丹參具有防止鈣超載,消除氧自由基及改善微循環,作為丹參的主要陳分丹參酮ⅡA是一種新的有效的細胞內脂質過氧化產物與DNA相互作用的抑制劑。國內外學者通過應用各種不同的實驗方法對心肌肌質網膜脂質過氧化過程中產生的脂類自由基的消除作用研究發現,它對DNA的保護作用很可能是通過消除脂類自由基而阻斷脂質過氧化的鏈式反應,抑制DNA合成物的生成,從而減少了后者的細胞毒性[6]。這些研究都表明丹參酮有促進機體對氧自由基的代謝、降低自由基水平的作用,其機理可能是是丹參酮ⅡA通過增強細胞中的超氧化物歧化酶(SOD)水平,并通過這一機制降低丙二醛(MDA)水平,從而減少細胞中的氧自由基,保護細胞免受損傷。

本實驗通過研究不同濃度的丹參注射液對大鼠慢性胰腺炎的干預,從而探討丹參注射液對慢性胰腺炎的治療作用。大鼠胰腺組織病理形態學改變和膠原纖維染色分析結果均支持丹參具有改善胰腺纖維化的作用。大鼠慢性胰腺炎模型組中HA和LN含量明顯增高,用大、中、小3種劑量的丹參對大鼠慢性胰腺炎模型進行治療,均能使血清中HA和LN含量降低,其中以大劑量組療效最為明顯,以上均說明丹參注射液可以有效延緩胰腺纖維化的發生,有較好的治療效果。

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表1 不同組各指標的均數和標準差

注:與正常組相比,P<0.05;與模型組相比，P<0.05