自建檢測(cè)系統(tǒng)與KX-21N配套檢測(cè)系統(tǒng)間結(jié)果的可比性研究

王偉鑫，李崢嶸，蘇水林，李忠信

(1、東莞康華醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 東莞 523080；2、中山市寶駿生物工程研究所，廣東 中山 528415)

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，血細(xì)胞分析儀已經(jīng)普遍用于臨床實(shí)驗(yàn)室，由于進(jìn)口原裝配套試劑價(jià)格比較昂貴，使用價(jià)格比較低廉的國(guó)產(chǎn)試劑必將成為國(guó)內(nèi)一種趨勢(shì)，但不同的血細(xì)胞分析儀因分析系統(tǒng)的差異，對(duì)同一份標(biāo)本的測(cè)定，結(jié)果間可以存在著誤差[1]。本文按照CLSIEP9-A2文件[2]的相關(guān)要求對(duì)使用國(guó)產(chǎn)試劑的自建檢測(cè)系統(tǒng)與使用原裝進(jìn)口配套試劑的配套檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)性能進(jìn)行比較研究，探討使用非配套國(guó)產(chǎn)試劑的可行性及可能存在的一些問(wèn)題。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1 .1儀器 Sysmex公司生產(chǎn)的XE-2100血細(xì)胞分析儀(A3140)由于使用配套校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、試劑，具有良好的精密度及準(zhǔn)確性，每年參加衛(wèi)生部、廣東省臨檢中心的室間質(zhì)評(píng)，結(jié)果均合格，故選擇其作為其他兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)參考儀器。

1.1 .2檢測(cè)系統(tǒng)的組成 配套檢測(cè)系統(tǒng)由KX-21N血細(xì)胞分析儀 (A9398)、原裝配套試劑稀釋液CELLPACK(CPK-303A， 批號(hào) G8035)、 溶血素STROMATOLYSER-WH(SWH-200，批號(hào) R8041)和EIGHTCHECK-3WP質(zhì)控品(批號(hào) 92150822)組成；自建檢測(cè)系統(tǒng)由KX-21N血細(xì)胞分析儀(A9394)、國(guó)產(chǎn)稀釋液 (適用于日本Sysmex KX-21系列稀釋液，批號(hào)A080728)和溶血素(適用于日本Sysmex KX21溶血素，批號(hào)A080722)組成。

1.2 標(biāo)本來(lái)源 本院門(mén)診、住院、體檢患者靜脈采血 2ml，EDTA-K2濃度為 4.45±0.85μmol/L 血液，所有檢測(cè)均在4h內(nèi)完成。

1.3 方法

1.3 .1檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn) 使用SCS-1000校準(zhǔn)品按照CLSIH38-P文件[3]要求對(duì)XE-2100進(jìn)行校準(zhǔn)；后采用彭黎明等介紹的方法[4]用經(jīng)校準(zhǔn)過(guò)的XE-2100定值的新鮮全血標(biāo)本校準(zhǔn)兩臺(tái)KX-21N血細(xì)胞分析儀。

1.3 .2試劑理化性質(zhì) 對(duì)國(guó)產(chǎn)試劑及進(jìn)口試劑的理化性質(zhì)進(jìn)行比較。

1.3 .3精密度

1.3 .3.1 日內(nèi)精密度 分別選取(WBC、RBC、Hb、Hct、PLT)高、中、低濃度新鮮標(biāo)本各一份于兩套系統(tǒng)進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)11次，棄去第一次結(jié)果，計(jì)算10次結(jié)果的均值及變異系數(shù)。

1.3 .3.2日間精密度 每日使用同一批號(hào)的配套質(zhì)控品于兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)各檢測(cè)1次，連續(xù)檢測(cè)30d，計(jì)算各系統(tǒng)結(jié)果的均值及變異系數(shù)。

1.3 .4相關(guān)性 選取住院門(mén)診患者和健康體檢者(男性：139、女性：101，年齡：最大 68 歲，最小 8 歲)標(biāo)本240例，分別在兩臺(tái)KX-21N上進(jìn)行平行測(cè)定，對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.3 .5檢測(cè)性能 以配套檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，分別以 WBC≥3.5×109/L，RBC≥3.9×1012/L，Hb≥110g/L，Hct≥0.37，PLT≥100×109/L，WBC≤10.0×109/L，RBC ≤5.5 ×1012/L，Hb ≤170g/L，Hct≤0.51，PLT ≤300×109/L作為陽(yáng)性界值對(duì)自建檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果進(jìn)行ROC曲線分析，分別計(jì)算其曲線下面積(AUC)，陽(yáng)性似然比(PPV)，陰性似然比(NPV)。

1.3 .6 參考范圍驗(yàn)證[6]選取在我院2009年9月至2009年10月期間健康體檢標(biāo)本，根據(jù)CLSI C28-A3文件要求自建檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行參考范圍的驗(yàn)證，同時(shí)與配套檢測(cè)系統(tǒng)參考范圍進(jìn)行比較。

1.3 .7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件以及Microsoft Excel 2003進(jìn)行處理。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)

對(duì)三個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)均合格，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 試劑理化性質(zhì)

兩種試劑的理化性質(zhì)均無(wú)差異，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 精密度

表1 三套檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)結(jié)果(n=10)

表2 兩種血細(xì)胞分析儀試劑的理化性質(zhì)比較*

2.3 .1 日內(nèi)精密度 結(jié)果顯示兩套檢測(cè)系統(tǒng)的日 內(nèi)精密度均良好，均在儀器要求CV之內(nèi)[5]，見(jiàn)表3。

表3 兩套檢測(cè)系統(tǒng)的日內(nèi)精密度結(jié)果的比較(n=10)

2.3 .2日間精密度 結(jié)果顯示兩套檢測(cè)系統(tǒng)的日間精密度結(jié)果均良好，均在儀器要求CV之內(nèi)[5]，見(jiàn)表4。

2.4 相關(guān)性

在檢測(cè) WBC、RBC、Hb、Hct、PLT 時(shí)，兩套檢測(cè)系統(tǒng)的結(jié)果間具有良好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)均大于0.95。結(jié)果見(jiàn)表5。

表4 兩套檢測(cè)系統(tǒng)的日間精密度結(jié)果的比較

表5 兩套檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果的相關(guān)性

2.5 檢測(cè)性能 以配套檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，分別以 WBC≥3.5×109/L，RBC≥3.9×1012/L，Hb≥110g/L，Hct≥0.37，PLT≥100×109/L，WBC≤10.0×109/L，RBC ≤5.5 ×1012/L，Hb ≤170g/L，Hct≤0.51，PLT ≤300×109/L作為陽(yáng)性界值對(duì)自建檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果進(jìn)行ROC曲線分析，結(jié)果自建檢測(cè)系統(tǒng)在測(cè)定評(píng)價(jià)項(xiàng)目(WBC、RBC、Hb、Hct、PLT) 時(shí)具有良好的檢測(cè)性能，見(jiàn)表6。

2.6 參考范圍驗(yàn)證

表6 自建檢測(cè)系統(tǒng)的診斷性能結(jié)果

自建檢測(cè)系統(tǒng)與配套檢測(cè)系統(tǒng)的參考范圍不存在差別，結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 兩套檢測(cè)系統(tǒng)的參考范圍比較(x±2sd)

3 討論

使用進(jìn)口配套檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果穩(wěn)定可靠，但由于其試劑、校準(zhǔn)品等比較昂貴，使用國(guó)產(chǎn)試劑可以降低成本，目前國(guó)內(nèi)多數(shù)廠家生產(chǎn)的試劑眾多，如何在使用國(guó)產(chǎn)試劑的同時(shí)，與進(jìn)口配套檢測(cè)系統(tǒng)間具有可比性，成為近期一個(gè)研究的課題。

彭黎明等研究表明用新鮮血校準(zhǔn)儀器雖較麻煩，但適用于所有儀器，特別是不易獲得配套校準(zhǔn)品的儀器，成本低，適用性強(qiáng)[4]；且根據(jù)準(zhǔn)確度傳遞的原理，認(rèn)真做好每一個(gè)環(huán)節(jié)，通過(guò)分析驗(yàn)證后的結(jié)果也表明，其結(jié)果是可靠的，標(biāo)準(zhǔn)品重新定值后的準(zhǔn)確度有進(jìn)一步提高[7]。

本研究通過(guò)使用儀器配套的校準(zhǔn)物SCS-1000對(duì)使用配套試劑的XE-2100進(jìn)行校準(zhǔn)后，用經(jīng)其定值的新鮮全血對(duì)兩臺(tái)KX-21N進(jìn)行校準(zhǔn)，使兩臺(tái)KX-21N的結(jié)果可以溯源到XE-2100，保證了儀器在使用非配套試劑降低成本的同時(shí)，使結(jié)果更具可靠性。

使用病人標(biāo)本進(jìn)行相關(guān)性分析時(shí)，兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)間結(jié)果具有良好的相關(guān)性，WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等項(xiàng)目相關(guān)系數(shù)均＞0.95，P值均＞0.05。

以配套檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)自建檢測(cè)系統(tǒng)的結(jié)果進(jìn)行診斷性能研究發(fā)現(xiàn)，自建檢測(cè)系統(tǒng)在測(cè)定WBC、RBC、Hb、Hct、PLT 項(xiàng) 目 時(shí) 其 AUC 均 較 好 ＞0.93。

在參考范圍的驗(yàn)證方面，使用自建檢測(cè)系統(tǒng)與配套檢測(cè)系統(tǒng)的參考范圍的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。

Taouinet R等也論述了使用非配套血細(xì)胞分析儀試劑的可能性、可行性[8]。但由于儀器、試劑等因素改變，需定期與配套檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行比對(duì)，確保其準(zhǔn)確性。

[1]胡曉波,李 泳,吳駕浦,等.上海地區(qū)血液分析儀上準(zhǔn)確性的研究和探討[J].上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2001,16(16):355-357.

[2] The national committee for clinical laboratory standards method comparison and bias estimation using patient samples. Approved Guidline[S].Second Edition.EP9-A2,2002:4

[3]CLSI.Calibration and quality control of automated hematology analyzer;Proposed standard[S].National Committee for Clinical Laboratory Standards.Villanova,PA,1999,H38-P.1-22．

[4]彭黎明,蔣能剛,府偉靈.多臺(tái)血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)方法的建立[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(5):539-542.

[5]Sysmex KX-21N血細(xì)胞分析儀操作說(shuō)明書(shū),日本Sysmex公司,2004年4月.

[6]Clinical and Laboratory Standards Institute.Defining,establishing,and verifying reference intervals in the clinical laboratory;approved guideline-third edition[S].CLSIdocument C28-A3.Wayne 2008.

[7]李熙建,王 鵬,鄧述琴,等.自建檢測(cè)系統(tǒng)與目標(biāo)檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)結(jié)果一致性的方法探討[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2008,28(5):655-659.

[8]Taouinet R,Mougin G,Brun C,Darodes de Tailly P.Statistical comparison of the results of the blood cells count obtained with a Micros 60 ABX analyzer using the genuine reagents and generics reagents kits[J].Ann Biol Clin(Paris),2007,65(6):671-676.