清熱解毒口服液薄層鑒別方法的改進研究

趙 琦，張軍武，安國軍

（1.咸陽市衛生學校，陜西 咸陽 712000；2.陜西中醫學院，陜西 咸陽 712046）

清熱解毒口服液是由石膏、金銀花、玄參、地黃、連翹、梔子、黃芩、龍膽、知母、麥冬等中藥制成的復方制劑，具有清熱解毒的功效，收載于2010年版一部《中國藥典》［1］。臨床上主要用于熱毒壅盛所致發熱面赤，煩躁口渴，咽喉腫痛等癥以及流感，上呼吸道感染及各種發熱疾病見上述證候者。為了加強對該品種的質量控制，我們進行了一系列實驗研究，在原清熱解毒口服液標準的基礎上增加了玄參的薄層色譜鑒別并改進了金銀花、連翹的鑒別方法，使其質量標準可操作性更強，從而有效地控制該制劑的質量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 電子天平（北京賽多利斯儀器有限公司）；電熱鼓風干燥箱（中國重慶銀河儀器有限公司）；超聲清洗儀，SB3200DT型（寧波新芝生物科技股份有限公司）。

1.2 試藥 硅膠G，化學純，薄層層析用；綠原酸對照品，批號：110753-200413（薄層層析用）；連翹苷對照品，批號：110821-200508（薄層層析用）；玄參對照藥材，批號：121008-200505。以上檢驗用對照品，均由中國藥品生物制品鑒定所提供。其他試劑均為分析純。清熱解毒口服液市售（自制）。

2 薄層鑒別

2.1 金銀花的薄層鑒別［2-3］取本品10 mL，蒸干，殘渣加乙醇5 mL使溶解，濾過，濾液濃縮至2 mL，作為供試品溶液。再按上述處方比例，除去金銀花藥材以同樣的方法制成陰性對照品溶液。另取綠原酸對照品，加乙醇制成1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄VIB）試驗，吸取上述三種溶液各10μL，分別點于同一硅膠 G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水 （2∶1∶1）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與陰性對照色譜相應位置上，未顯相同顏色的斑點。

2.2 連翹的薄層鑒別［4-5］取本品40 mL，加三氯甲烷20 mL回流萃取3次，每次20 min，收集三氯甲烷層，用10%氨水洗滌2次，每次40 mL，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。再按上述處方比例，除去連翹藥材以同樣的方法制成陰性對照品溶液。另取連翹苷對照品，加甲醇制成0.15 mg／mL的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法［1］試驗，分別吸取上述3種溶液各10μL，點于同一硅膠 G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-冰醋酸（17∶2∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；在與陰性對照色譜相應位置上，未顯相同顏色的斑點。實驗的重現性和專屬性較好。

2.3 玄參的薄層鑒別［6］取本品20 mL，用水飽和正丁醇超聲提取2次，每次15 mL，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加無水乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。再按上述處方比例，除去玄參藥材以同樣的方法制成陰性對照品溶液。另取玄參對照藥材2 g，加水適量，煎煮30 min，濾過，濾液同法制得對照藥材溶液。照薄層色譜法［1］試驗，分別吸取上述溶液各10μL，點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇（5∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；在與陰性對照色譜相應位置上，未顯相同顏色的斑點。實驗的重現性和專屬性較好。

3 討論

3.1 金銀花與玄參的薄層色譜 經多次實驗，發現采用藥典中展開劑的比例，分離斑點不清晰，改變展開劑比例后能很好的鑒別綠原酸。玄參為方中的臣藥，具有清熱涼血、養陰生津、瀉火解毒等功效；故建議藥典增加玄參藥材的鑒別項，以有效的控制藥品質量［2-3］。

3.2 連翹的薄層色譜 在《中國藥典》2010年版一部［1］中提取本品20 mL，加乙酸乙酯振搖提取3次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加30%乙醇5 mL使溶解，通過 D101型大孔吸附樹脂柱（內徑1 cm，柱高24 cm），用30%乙醇50 mL洗脫，棄去洗液，再用稀乙醇50 mL洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。本方法節約時間，方便操作，專屬性較強［4-5］。

3.3 陰性對照組 增加了陰性對照試驗，通過陰性對照、供試品以及對照品的相互比較更能科學的說明其專屬性，達到準確鑒別的目的［6］。

［1］中華人民共和國藥典委員會.中國藥典［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄VIB.

［2］李煥榮，崔健，宋玉環.不同產地的金銀忍冬中綠原酸、異綠原酸的含量測定——雙波長薄層掃描法［J］.吉林中醫藥，1989，9（2）：21.

［3］廖婉，傅超美，李瑤，等.清熱解毒口服液質量標準的研究［J］.成都中醫藥大學學報，2008，31（2）：39-42.

［4］田云.清熱解毒口服液的質量分析［J］.黑龍江醫藥科學，2004，27（4）：62.

［5］謝程，張蘭杰，鄭平，等.婦炎康膠囊薄層色譜鑒別研究［J］.吉林中醫藥，2001，21（6）：59.

［6］劉翠艷，鄭玉光，石紅，等.清熱解毒口服液中梔子、玄參的薄層鑒別［J］.河北中醫藥學報，2005，20（2）：292-301.