伏立康唑與羥丙基－β－環糊精包合常數的測定

趙 慶，朱春霞

（1.江蘇省南京市藥品檢驗所，江蘇 南京 210015； 2.南京圣和藥業有限公司，江蘇 南京 210038）

伏立康唑（voriconazole）是高親脂性三唑類廣譜抗真菌藥物，在水中溶解度為0.2mg/mL（pH=3）且不穩定（其水解逆羥醛產物可重組為一種不活潑的對映體），因此難以開發成注射劑。筆者采用相溶解度法測定了伏立康唑與羥丙基-β-環糊精（HP-β-CD）的包合常數，旨在為國內醫藥企業研發伏立康唑靜脈給藥制劑和HP-β-CD的應用提供參考。

1 儀器與試藥

UV2401型紫外分光光度計（日本島津）；BS200S型電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）。伏立康唑對照品（純度為99.9％，自制）和原藥（純度為 99.5％，自制）；HP-β-CD（批號為20030520，西安德立生物化工有限公司）。

2 方法與結果

2.1 相溶解度法原理

環糊精包合物的包合常數（K值）是決定環糊精包合性質的一個重要參數，通過 K值的測定能對包合平衡作出定量描述，K值的大小反映了環糊精（CD）與藥物分子（G）形成包合物（CD-G）時的結合能力強弱[1-2]。環糊精和藥物在水溶液中的包合是一個平衡過程，符合質量作用定律。環糊精與藥物形成1∶1包合物的平衡過程可用公式Ⅰ表示：

CD+G?CD-G

K=[CD-G]/[CD][G] （公式Ⅰ）

式中[CD-G]，[CD]，[G]分別代表平衡時包合物、游離環糊精和藥物的濃度。環糊精和藥物的起始濃度[CD]0和[G]0，可表示為：

[CD]0=[CD]+[CD-G]=[CD]+K[CD][G] （公式Ⅱ）

[G]0=[G]+[CD-G]=[G]+K[CD][G] （公式Ⅲ）

用相溶解度法測定 K值目前在藥學領域應用較廣泛。假設環糊精與藥物分子形成1∶1的包合物，在無環糊精時藥物的固有溶解度為S0；藥物被環糊精包合后溶解度增加，即[CD-G]=[G]0-S0。由公式Ⅰ～Ⅲ可得：

K=（[G]0-S0）/｛[CD]0-（[G]0-S0）｝S0（公式Ⅳ）

[G]0=KS0/（1+KS0）[CD]0+S0（公式Ⅴ）

以[G]0對[CD]0作圖，其斜率為 K S0/（1+K S0），截距為S0，故得：

K=斜率/截距（1-斜率） （公式Ⅵ）

2.2 標準曲線繪制

取伏立康唑適量，分別用甲醇稀釋成含伏立康唑5，10，20，30，40，60μg/mL的溶液，于255 nm波長處測定吸光度，以質量濃度對吸光度繪制標準曲線（見圖1），回歸方程為 Y=0.022 8X+ 0.001 9，r=0.999 9（n=6）。

圖1 伏立康唑標準曲線圖

2.3 包合常數測定

將HP-β-CD配成質量濃度為200 g/L的水溶液，備用。分別稱取100mg伏立康唑，置8個10mL具塞試管中，依次加入相同質量濃度、不同體積的HP-β-CD水溶液（1，2，3，4，5，6，7，8 mL），用蒸餾水定容，將定容過的過飽和溶液超聲30 min，靜置24h，待固液平衡后過濾，取濾液1mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀釋定容，取上述溶液2.5mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀釋定容。于255 nm波長處測定吸光度，計算出伏立康唑的溶解度，以HP-β-CD的質量濃度為橫坐標、伏立康唑溶解度為縱坐標進行線性回歸，回歸方程為 Y=0.255 3X+2.109 3，r=0.998 6（n=8）。結果見表1及圖2。因此，K=斜率/截距（1-斜率）=0.255 3/[0.002 109 3（1-0.255 3）]=162.5 L/mol。

表1 相溶解度研究測定值

圖2 伏立康唑與HP-β-CD的相溶解度曲線圖

3 討論

試驗結果表明，伏立康唑與HP-β-CD的相溶解度曲線呈AL型，說明伏立康唑與HP-β-CD形成了1∶1的包合物，故按穩定性常數計算公式 K=斜率/S0（1-斜率）計算，伏立康唑的環糊精包合穩定性常數為162.5 L/mol，且伏立康唑的相溶解度與HP-β-CD的摩爾濃度成正比。

由包合常數可知，將伏立康唑制備成注射劑所需的HP-β-CD用量較大，而目前國內尚無可供注射用的HP-β-CD，因此制藥企業應該制訂嚴格的內控標準，以保證產品的安全性。

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