凝血試驗檢測結(jié)果的影響及分析

李秀蘭，於蘭婭

(江蘇省揚州市中醫(yī)院檢驗科，江蘇 揚州 225009)

凝血試驗檢測主要用于凝血、出血及血栓疾病的診斷，也常作為手術(shù)前的常規(guī)檢測。凝血試驗的準(zhǔn)確性，是指導(dǎo)臨床正確治療疾病的保證。它一般包括凝血酶原時間(PT)，凝血酶時間(TT)，活化部分凝血活酶時間(APTT)，纖維蛋白原(FIB)及各種凝血因子。由于其反應(yīng)的特殊性不同于一般的酶類檢測，當(dāng)起動因子被某因素激活后，就會發(fā)生一系列的連鎖反應(yīng)，導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)較大誤差，所以對檢驗人員來說，掌握影響凝血試驗的有關(guān)因素尤為重要。現(xiàn)將試驗中影響因素作如下分析。

1標(biāo)本的采集 (1)采集標(biāo)本前盡量使患者處于平靜狀態(tài)，情緒激動、劇烈運動會引起血小板增高，凝血活性增強。(2)采血時，止血帶不應(yīng)扎得太緊或時間過長，時間不宜超過3min，盡可能做到一針見血，避免因多次靜脈穿刺損傷血管和組織，使有些凝血因子和組織纖溶酶激動劑釋放和活化而影響結(jié)果。(3)采血最好采用一次性硅化真空采血管，避免注射血液入試管時用力過大，速度過快，紅細(xì)胞被擠壓破碎，從而激活凝血系統(tǒng)影響檢測結(jié)果。

2抗凝劑的使用 (1)抗凝劑有很多種，因為凝血因子Ⅴ和Ⅷ在枸櫞酸中比較穩(wěn)定，所以應(yīng)選用0.109mol/l的枸櫞酸鈉。(2)抗凝劑與血液的比例應(yīng)為1:9，若抗凝劑的量過多，血液過少則凝血酶原時間(PT)，活化部分凝血酶時間(APTT)均延長。若血液量過多可使PT結(jié)果縮短。(3)若紅細(xì)胞比容 (HCT)>55%或<25%應(yīng)按如下公式核算抗凝劑的用量，抗凝劑的量(ml)=0.00185×全血量(ml)×[100-HCT(%)][1]。

3標(biāo)本的處理及保存 (1)采集好的標(biāo)本需要及早分離血漿，最好在2h內(nèi)，離心的速度和時間應(yīng)為3000r/min，離心10min，并盡快檢測。(2)標(biāo)本存放的溫度和時間不同對各種凝血因子的活性檢測會有所不同。室溫下，富血小板血漿可存放3h，乏血小板血漿可存放2h，全部試驗不能在4h內(nèi)完成時，應(yīng)將血漿分裝后快速冷凍，儲存于-20℃冰箱中，在試驗前將血漿于37℃下快速融化后進行檢測，融化的血漿不能再次冷凍[2]。

4試劑與儀器 (1)凝血試驗按照儀器的性能盡可能選用與儀器配套的試劑，由于檢測中所使用的試劑盒是根據(jù)不同反應(yīng)而加入不同的凝血因子，均為生物試劑，容易受環(huán)境影響而降低其生物活性。因此使用試劑最好是現(xiàn)用現(xiàn)配，否則復(fù)溶后放置時間過長容易影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，暫時不用的試劑要放回冰箱冷藏。PT試劑由于每批國際敏感度指數(shù)(ISI)值不一定相同，每一批試劑使用前均要先檢測20份18～55歲男女各半健康人的正常血清平均值作為正常值，以便正確計算出國際標(biāo)準(zhǔn)化凝血酶原時間(INR)比值。FIB不同批號的試劑均應(yīng)用參比血漿制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。試劑應(yīng)放置2～8℃冰箱保存。并且每天均應(yīng)做室內(nèi)質(zhì)控血清的檢測。(2)儀器是保證檢測結(jié)果可靠性的關(guān)鍵，應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程進行操作，并要定期進行校正，保養(yǎng)及維護，使儀器能保證在良好的工作狀態(tài)下進行標(biāo)本、室內(nèi)、室間質(zhì)控的測定。

5其他因素 目前隨著半自動、全自動凝血儀的廣泛使用，對檢驗人員的要求也越來越高，僅會使用和操作儀器是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，全面了解和掌握儀器的性能、影響檢測的因素，以及具備有效解決處理不同緊急情況下的應(yīng)變能力尤為重要。檢驗人員還需要熟練掌握分析前及分析中的質(zhì)量控制和熟悉檢測結(jié)果的判斷，如肝實質(zhì)性損傷，重癥肝炎，肝硬化等患者由于肝細(xì)胞長期受損，影響凝血因子的合成；DIC病人由于血小板及凝血因子的大量消耗，重度黃疸以及脂血的患者等PT、APTT、TT、FIB 不同程度的改變。

某些藥物本身就具有影響凝血機制的作用，或具有協(xié)同抗凝的作用，如阿司匹林、保泰松、氯霉素、長效磺胺類藥等可使口服抗凝藥物在血中濃度明顯升高，口服華法林及溶栓治療的患者。如肝素、雙香豆素低分子右旋糖酐等抑制凝血酶從而妨礙纖維蛋白原變成纖維蛋白，阻止血小板的黏附和聚集，使凝血結(jié)果延長。大劑量應(yīng)用青霉素可使PT，APTT明顯延長，INR比值也相應(yīng)延長。大劑量應(yīng)用頭孢類抗生素(β-內(nèi)酰胺酶)可明顯抑制腸道桿菌，影響維生素K的吸收，導(dǎo)致凝血因子Ⅱ、Ⅲ、Ⅸ、Ⅺ的合成障礙，使凝血指標(biāo)的結(jié)果明顯延長。因此，對于藥物干擾 凝血試驗結(jié)果的問題需要加以注意和重視，在采集標(biāo)本前必須了解受檢者是否用過藥、何種藥、用藥時間和濃度等。有關(guān)藥物對凝血指標(biāo)的認(rèn)識尚不十分全面，還有待于進一步觀察和探討。

綜上所述，影響凝血試驗檢測結(jié)果的原因較多，只有掌握了各方面影響因素，才能保證檢測結(jié)果最大限度的準(zhǔn)確和可靠。才能更好的為臨床診斷、鑒別診斷、病情觀察、藥物療效、預(yù)后判斷提供更可靠的依據(jù)。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版,東南大學(xué)出版社,2006:211.

[2]王毓三.醫(yī)院檢驗科建設(shè)管理規(guī)范[M].第1版,東南大學(xué)出版社,2003:59.