生物熒光方法快速測定環(huán)境水體中的甾體類激素
2010-04-12 00:00:00于源華王靜華宋禹楊佳新張昊劉紅
分析化學(xué) 2010年7期
摘 要 建立了環(huán)境中甾體類激素的生物熒光測定方法。利用睪丸酮叢毛單胞菌的生物酶基因與甾環(huán)結(jié)構(gòu)特異的分子識別特性，結(jié)合綠色熒光蛋白（GFP）的熒光標(biāo)記技術(shù)，通過基因同源重組技術(shù)建立了特異性生物熒光檢測系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)對環(huán)境中甾環(huán)類化合物的靈敏監(jiān)測。制備綠色熒光突變菌及總蛋白含量為1.0 g/L的非細(xì)胞體系工作液，在室溫條件下對不同濃度雌二醇標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測，10 min即可檢測出fg級的甾體類激素，最佳檢測時(shí)間為30 min，方法的線性范圍1.0~266 ng/L，靈敏度高于高效液相色譜方法。本方法可應(yīng)用于環(huán)境的實(shí)際檢驗(yàn)工作。
關(guān)鍵詞 甾體類激素； 生物熒光； 基因同源重組； 分子識別
