TPPA和 TRUST兩種檢查方法在梅毒血清學(xué)檢查中的應(yīng)用

秦玲

梅毒是一種嚴重的性傳播疾病,它不僅引起全身性損害,同時還可以通過胎盤傳給胎兒,引起先天性梅毒[1]。近年來梅毒的發(fā)病率明顯上升,檢測方法的可靠性治療的準(zhǔn)確性及血液制品使用的安全性[2],采取合適的檢查方法有利于指導(dǎo)臨床的診斷和治療。梅毒的實驗室檢測在梅毒診斷中占有非常重要的地位,是診斷梅毒的重要依據(jù)之一。目前甲苯胺紅不加熱血清試驗 (TRUST)和明膠顆粒凝集試驗 (TPPA)已廣泛應(yīng)用于實驗室,作為檢查梅毒螺旋體的重要方法。本研究旨在探討分別采用 TPPA和 TRUST兩種檢查方法在梅毒血清學(xué)檢查中的應(yīng)用,從而為臨床梅毒檢測方法的選擇提供進一步的指導(dǎo)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選擇我院 2005年 1月—2009年 12月 26例(份)梅毒血清標(biāo)本作為研究對象,其中,男 19例,女 7例,年齡 18-67歲。根據(jù)梅毒的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]:其中Ⅰ期梅毒 10例,Ⅱ期梅毒 9例,Ⅲ期梅毒 4例,潛伏梅毒 3例;另選 10例經(jīng)臨床確定為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、乙型肝炎、SLE、肺結(jié)核的作為對照組;以及 10例健康體檢者作為研究對象。

1.2 試劑與儀器 TRUST試劑由上海榮盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),TPPA試劑由日本富士株式會社生產(chǎn)提供。所用儀器為Biocell-2010酶標(biāo)儀、Biocell-Fluido洗板機均由鄭州博賽生物工程有限公司提供。所有試劑盒 46例標(biāo)本采用 TPPA和TRUST兩種檢查方法同時進行檢測,操作嚴格按照各廠家項目 SOP文件和儀器 SOP文件的要求進行均在有效期內(nèi)按說明書嚴格操作。

1.3 檢測方法 46例標(biāo)本采用 TPPA和 TRUST兩種檢查方法同時進行檢測,操作嚴格按照各廠家項目 SOP文件和儀器SOP文件的要求進行。TRUST結(jié)果判斷:以可見中等或較大的紅色凝聚物為陽性;可見較小的紅色凝聚物為弱陽性;可見均勻的抗原顆粒而無凝聚物為陰性。TPPA結(jié)果判斷:若粒子成紐扣狀凝集,呈現(xiàn)外周邊緣均勻且平滑的圓形為陰性;若粒子形成小環(huán)狀,呈現(xiàn)外周邊緣均勻平滑的圓形為可疑;若外周邊緣不均勻且雜亂的凝集在周圍為陽性。TRUST和 TPPA每次均作陰、陽性對照。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用 SPSS11.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料的比較用 χ2檢驗;以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。其中敏感性=陽性數(shù) /檢測數(shù) ×100%;特異性=TN/(FP+TN)×100%(其中:TP=真陽性,FN=假陰性,FP=假陽性,TN=真陰性)。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢查方法法的檢測陽性率比較 兩組陽性率比較,TPPA檢測法對梅毒檢測的陽性率明顯高于 TRUST檢測法,差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05,見表1)。

2.2 兩種檢測方法的敏感性和特異性比較 TPPA檢測梅毒的敏感性和特異性明顯高于 TRUST檢查法。且檢測Ⅲ期梅毒及潛伏梅毒的陽性率分別均高于 TRUST檢測的陽性率,兩組比較差異具有顯著性 (P＜0.05,見表2)。

表1 兩種檢查方法法的檢測陽性率比較Table1 Two inspection methods tested positie method

表2 兩種檢測方法的敏感性和特異性比較Tab le 2 Two detection method is the sensitivity and specificity

3 討論

梅毒是由于梅毒螺旋體感染引起的傳染性疾病,近年來,我國梅毒的發(fā)病率明顯呈現(xiàn)上升趨勢。因此對梅毒檢測的準(zhǔn)確率及特異性對梅毒的診治具有重要的臨床意義。

目前用于梅毒血清學(xué)檢驗方法有性病研究實驗室試驗(VDRL)、不加熱血清反應(yīng)素試驗 (USR)、快速血漿反應(yīng)素試驗 (RPR)、甲苯胺紅不加熱血清試驗 (TRUST)、梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗 (TP-ELISA)、梅毒膠體金法 (SYP)、熒光密螺旋體抗體吸收試驗 (FTA-ABS)、梅毒螺旋體血凝試驗(TPHA)、梅毒螺旋體抗體 TPPA、梅毒螺旋體制動試驗(TPI)等 10種,但臨床檢驗室較常用的是 TRUST、TPPA[3]。

TRUST主要是測定血清中的心磷脂抗體。梅毒螺旋體內(nèi)部具有類脂質(zhì)抗原,在螺旋體屬中各群之間或同螺旋體以外均可出現(xiàn)交叉反應(yīng),而且采用肉眼觀測,其漏檢率較高,故特異性、敏感度較低,但其價格低廉、操作簡便。TRUST檢測在梅毒感染的不同時期檢出率差別較大。除Ⅱ期檢出率高外,其他各期極易漏檢出現(xiàn)假陰性結(jié)果。由于心磷脂存在其他組織中,自身免疫性疾病,如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、乙型肝炎患者、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、活動性肺結(jié)核等甚至正常人都能產(chǎn)生抗心磷脂抗體,導(dǎo)致生物性假陽性結(jié)果。在Ⅰ期、Ⅲ期和潛伏期梅毒時,可呈陰性反應(yīng),TRUST作為過篩試驗具有操作簡便、快速、價格低廉的特點,是其他方法替代不了的,但其靈敏度、特異性、符合率均低于 TPPA[4]。

梅毒螺旋體 TPPA是檢測梅毒特異性抗體,感染者一旦感染后,該抗體終身檢測為陽性。TPPA是在人工載體明膠粒子上包被純化后梅毒菌株成分,滴加樣本后樣本中的抗體與菌株結(jié)合,凝聚于明膠顆粒,用于梅毒抗體的檢測。明膠顆粒凝集試驗法能偶敏感的反應(yīng)梅毒螺旋體抗體的滴度,但其在相鄰滴度的判斷常與檢測者的主觀感覺有關(guān)[5]。TPPA是將純化的致病性梅毒的精致菌株成分包被在人工載體明膠粒子上,檢測血清中相應(yīng)的抗體。TPPA敏感性、特異性較高,但檢測時間較長,結(jié)果判定常有主觀色彩,不適于大批量的篩選試驗[6-8]。

以上研究說明,TPPA的敏感性和特異性優(yōu)于 TRUST檢測法,是臨床常用的梅毒確診試驗,但其不適合大量標(biāo)本的篩查,更適合用于 TRUST測定陽性后的確診試驗,建議臨床檢驗醫(yī)師應(yīng)予以注意。

1 吳志華.皮膚性病學(xué)第 3版 [M].廣州:廣東科學(xué)技術(shù)出版社,2001:132.

2 張學(xué)軍.皮膚性病學(xué) [M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:486.

3 阮樂幸.TP-ELISA用于血清梅毒篩查的可行性評價 [J].中國輸血雜志,2002,15(6):413.

4 周渭珩,裘新民,洪為松,等.梅毒膠體金法和 TPPA診斷梅毒的比較研究 [J].浙江臨床醫(yī)學(xué),2004,6(4):324-325.

5 李衛(wèi)紅,曹付群,張振武,等.駐馬店市 1997—2006年淋病、梅毒流行病學(xué)分析及預(yù)防策略 [J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2008,35(1):150-151.

6 曾英.梅毒血清學(xué)檢測方法比較及臨床應(yīng)用探討 [J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2007,28(11):1054-1055.

7 孔麗蕊.3種梅毒血清學(xué)檢測方法的評價 [J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(18):1119-1120.

8 胡艷文,邢雙,于曉紅,等.梅毒血清學(xué)不同檢測方法的檢測結(jié)果評價 [J].山西醫(yī)學(xué)雜志,2009,10:942.