枳實健胃顆粒的藥材質(zhì)量研究

蘇 瑾,于德成,曲楠楠

(佳木斯大學(xué)藥學(xué)院黑龍江省生物藥制劑重點實驗室,黑龍江 佳木斯 154007)

功能性消化不良(functional dyspesia,FD),是指具有腹痛、腹脹、早飽、噯氣、食欲不振、惡心嘔吐等不適癥狀,經(jīng)檢查排除引起這些癥狀的器質(zhì)疾病的一組臨床綜合征。歐美的流行病組織調(diào)查表明,普通人群中有消化不良癥狀者占19%～ 41%[1]。其病因和發(fā)病機制至今尚未清楚,一般認為,上胃腸動力障礙是 FD的主要病理生理學(xué)基礎(chǔ)。“枳實健胃顆粒”是由古方“枳實消痞湯”[2]變化而來,選擇將其制成顆粒劑,作用迅速且克服了湯劑煎煮不便的缺點,服用、貯藏及運輸均較方便[3]。組方中君藥枳實為蕓香科植物酸橙 Citrus aurantium L.及其栽培變種或甜橙 Citrus sinensis Osbeck的干燥幼果。味苦、辛、酸 ,性微寒,歸脾、胃經(jīng),具有有理氣寬中,行滯消脹等功能,用于胸脅氣滯,脹滿疼痛,食積不化,痰飲內(nèi)停等癥[4]。本文通過對枳實藥材質(zhì)量標準的研究,為保證制劑質(zhì)量和開發(fā)新藥奠定基礎(chǔ)。

1 實驗材料

1.1 藥品與試劑

辛弗林對照品(批號 120936-200404,含量測定用 ),中國藥品生物制品檢定所;枳實藥材(購于佳木斯市金天醫(yī)藥公司,經(jīng)佳木斯大學(xué)藥學(xué)院生藥學(xué)教研室劉娟鑒定為正品);其他試劑均符合規(guī)定。

1.2 儀器

Agilent1100高效液相色譜儀,美國 Agilent公司;Olympus顯微成像系統(tǒng),U-CMAD3型,日本。

2 實驗方法

2.1 枳實的性狀鑒別

取枳實藥材三批,與《中國藥典》(2005年版)特征對照。

2.2 枳實的顯微鑒別

分別取枳實藥材橫切片和粉末進行顯微鏡觀察。

2.3 枳實的理化鑒別

取本品粉末0.5g,加甲醇 10mL,加熱回流10min,濾過。取濾液1mL,加四氫硼鉀約5mg,搖勻,加鹽酸數(shù)滴,觀察溶液顏色。

2.4 辛弗林的定性鑒別和含量測定

2.4.1 辛弗林的定性分析

取本品粉末0.5g,加甲醇 10mL,超聲處理20min,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇0.5mL使溶解,作為供試品溶液。另取辛弗林對照品,加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各2 μL,分別點于同一以含1%氫氧化鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠 G薄層板上,以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:5)的上層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以0.5%茚三酮乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。

2.4.2 辛弗林的含量測定

色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水(0.18%含磷酸和0.22%十二烷基磺酸鈉)(55:45)為流動相;檢測波長 274nm。理論板數(shù)按辛弗林峰計算,應(yīng)不低于4000[5]。

對照品溶液的制備:精密稱取在80℃干燥至恒重的辛弗林對照品適量,加甲醇溶解,搖勻,制成每1mL含辛弗林0.1mg的溶液 ,即得。

供試品溶液的制備:將藥材粉碎成細粉,混勻,取0.1g,精密稱定 ,加甲醇 40mL,加熱回流90min,濾過,濾液蒸干 ,殘渣加甲醇使溶解,定量轉(zhuǎn)移至2mL量瓶中 ,加甲醇至刻度。

3 實驗結(jié)果

3.1 性狀觀察

呈半球形,少數(shù)為球形,直徑 0.5～ 2.5cm。外果皮黑綠色或暗棕綠色,具顆粒狀突起和皺紋,有明顯的花柱殘跡或果梗痕。切面中果皮略隆起,黃白色或黃褐色,厚0.3～ 1.2cm,邊緣有 1～ 2列油室,瓤囊棕褐色,質(zhì)堅硬,氣清香 ,味苦、微酸。

3.2 顯微鑒別

本品中果皮細胞類圓形或形狀不規(guī)則,壁大多呈不均勻增厚。果皮表皮細胞表面觀多角形、類方形或長方形,氣孔近環(huán)式,直徑18～ 26μ m,副衛(wèi)細胞5～ 9個;側(cè)面觀外被角質(zhì)層。草酸鈣方晶存在于果皮和汁囊細胞中,呈斜方形、多面形或雙錐形 ,直徑2～ 24 μm。橙皮苷結(jié)晶存在于薄壁細胞中,黃色或無色,呈圓形或無定形團塊,有的顯放射狀紋理。油室碎片多見,分泌細胞狹長而彎曲。螺紋、網(wǎng)紋導(dǎo)管和管胞細小。

3.3 理化鑒別結(jié)果

溶液顯櫻紅色至紫紅色。

3.4 辛弗林的定性和定量鑒別結(jié)果

供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點[6]。定量鑒別結(jié)果,見表1。

表1 辛弗林的進樣量與峰面積

以測定的峰面積積分值為縱坐標,進樣量為橫坐標,繪制標準曲線,Y= 36.07556+ 226.50556X,r= 0.9999。測定三批供試品含量。《中國藥典》(2005年版)規(guī)定“本品按干燥品計算,含辛弗林不得少于0.30%”,三批藥材中辛弗林含量分別為0.39%,0.41%,0.41%,符合規(guī)定。

4 討論

枳實的商品規(guī)格通常按直徑大小區(qū)分等次,從檢查結(jié)果來看,三批枳實藥材的在性狀鑒別及顯微特征上均符合《中國藥典》中枳實項下規(guī)定;枳實藥材中揮發(fā)油含量和辛弗林含量有明顯差異,其含量高低與傳統(tǒng)等次劃分相符。因辛弗林等生物堿為枳實的主要有效成分,因此枳實藥材的質(zhì)量標準研究中可選擇辛弗林為指標并規(guī)定其限量。與現(xiàn)行藥典標準中枳實項下規(guī)定相比,本文探討了高效液相色譜法測定辛弗林的色譜條件,可更有效地評價枳實藥材的質(zhì)量,為枳實藥材的商品流通和研究開發(fā)提供依據(jù)。

[1]聶玉強.羅馬Ⅱ功能性胃腸疾病分類及診斷標準 [J].國外醫(yī)學(xué)內(nèi)科冊,2001,28(4):147-150

[2]鄭宏斌,趙茂森.枳實消痞湯治療功能性消化不良療效觀察 [J].四川中醫(yī),2007,25(3):61

[3]張保國,王學(xué)禮,劉慶芳.中藥顆粒劑研究的現(xiàn)狀與發(fā)展動態(tài) [J].中國藥學(xué)雜志,2000,(07):57-59

[4]中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京:化學(xué)工業(yè)出社,2005

[5]劉振麗,宋志前,張玲,等.枳實飲片中3類化學(xué)成分含量測定 [J].中國中藥雜志,2006,31(17):1425-1427

[6]許妍,付輝政.RP-HPLC法測定枳實中辛弗林的含量 [J].藥品評價,2005,(06):39-40