王學(xué)梅,許 麗
(1.海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院,???570228;2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,哈爾濱 150030)
大豆黃酮(Da)屬于異黃酮類(lèi)植物雌激素之一,主要存在于大豆等豆科的蝶形花亞科植物中,是一種天然的有效活性成分,具有弱的雌激素和抗雌激素活性,在內(nèi)源激素水平較低時(shí),其可與雌激素受體結(jié)合,表現(xiàn)雌激素激動(dòng)劑作用,而在機(jī)體雌激素水平較高時(shí),則競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合雌激素受體表現(xiàn)抗雌激素作用[1]。膳食中的異黃酮具有防癌和抗癌的作用,近年來(lái)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究表明,大豆黃酮具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、增加產(chǎn)蛋、增強(qiáng)免疫力、調(diào)節(jié)動(dòng)物繁殖等生理功能,是一種具有廣闊開(kāi)發(fā)前景的新型飼料添加劑。本試驗(yàn)通過(guò)在產(chǎn)蛋雞飼糧中添加大豆黃酮探討其對(duì)蛋雞產(chǎn)蛋后期生產(chǎn)性能的影響。
大豆黃酮純度大于98%,試驗(yàn)動(dòng)物為66周齡海蘭褐商品蛋雞。
試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì)。選用體況良好,產(chǎn)蛋率、體重相近的66周齡的海蘭褐產(chǎn)蛋后期試驗(yàn)雞72只,隨機(jī)分成4組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)6只。以海南華星飼料廠生產(chǎn)的華星牌113中雞配合飼料(玉米-豆粕-雜粕型)為基礎(chǔ)日糧,對(duì)照組(Ⅰ)飼喂基礎(chǔ)日糧,各試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加大豆黃酮10mg·kg-1(Ⅱ)、20mg·kg-1(Ⅲ)、30 mg·kg-1(Ⅳ)。預(yù)飼期3 d,正飼期30 d。
試驗(yàn)預(yù)飼期結(jié)束后計(jì)算平均耗料量,確定試驗(yàn)期投料量。正飼期采取定量投料限飼方式。試驗(yàn)雞采用3層階梯式籠養(yǎng),同一列3個(gè)籠為一個(gè)重復(fù)單位,定量采食,自由飲水,光照16 h·d-1,進(jìn)行常規(guī)的免疫,每日以重復(fù)為單位,記錄產(chǎn)蛋數(shù)、產(chǎn)蛋量和畸形蛋數(shù)。
1.4.1 產(chǎn)蛋率和蛋重
以重復(fù)為單位,計(jì)算各重復(fù)平均蛋重和產(chǎn)蛋率。
1.4.2 蛋殼厚度的測(cè)定
每個(gè)處理隨機(jī)取3枚蛋用游標(biāo)卡尺測(cè)量蛋殼大頭、小頭、中段厚度(精確到0.02 mm),平均值即為蛋殼厚度。
1.4.3 蛋中蛋白質(zhì)、鈣和磷含量的測(cè)定
試驗(yàn)結(jié)束時(shí),以處理組為單位每個(gè)處理隨機(jī)取3枚蛋,用真空冷凍干燥法將雞蛋制成凍干樣,待測(cè)。用凱氏定氮法(GB/T 5009.5-1985)測(cè)定蛋白質(zhì)含量。用高錳酸鉀滴定法測(cè)定鈣含量,用釩鉬酸銨顯色法測(cè)定磷含量。
試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用SAS 6.12軟件中的GLM過(guò)程進(jìn)行方差分析,用Duncan′s進(jìn)行多重比較,結(jié)果以X±SD表示。
不同處理對(duì)產(chǎn)蛋性能的影響結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同處理對(duì)產(chǎn)蛋性能的影響
由表1可知,添加適量大豆黃酮能在一定程度上提高產(chǎn)蛋率和蛋重。其中,Ⅱ組、Ⅲ組產(chǎn)蛋率分別比對(duì)照組提高了9.59%、2.60%,而Ⅳ組產(chǎn)蛋率比對(duì)照組下降了0.64%。試驗(yàn)組與對(duì)照組之間差異均不顯著(P>0.05)。由此可見(jiàn),低濃度Da可提高產(chǎn)蛋率,而高濃度的Da則導(dǎo)致產(chǎn)蛋率的下降。同時(shí),添加Da還能使蛋重增加,試驗(yàn)組蛋重均高于對(duì)照組但差異不顯著(P>0.05)。
由表1可知,試驗(yàn)組蛋殼厚度和蛋殼重均與對(duì)照組差異顯著(P<0.05),而試驗(yàn)組之間差異不顯著(P>0.05)。其中,試驗(yàn)Ⅱ組蛋殼厚度和蛋重最高,即添加Da 10mg·kg-1對(duì)增加蛋殼厚度的效果最好。
不同處理對(duì)蛋成分的影響見(jiàn)表2。

表2 不同處理對(duì)蛋成分的影響 %
由表 2可知,Ⅲ組、Ⅳ組與對(duì)照組相比,CP含量差異顯著(P<0.05),而各個(gè)試驗(yàn)組間差異不顯著(P>0.05)。Ⅰ組與Ⅱ組差異不顯著(P>0.05)。結(jié)果表明,添加大豆黃酮使蛋中蛋白質(zhì)的沉積量下降,且隨著添加量越大,蛋白質(zhì)含量越低。
由表2可知,飼糧中添加大豆黃酮可極顯著提高蛋中鈣沉積量(P<0.01)。其中Ⅲ組、Ⅳ組與Ⅰ組、Ⅱ組間差異極顯著(P<0.01),而Ⅰ組與Ⅱ組、Ⅲ組與Ⅳ組間差異不顯著(P>0.05),且隨著Da添加量的增加,蛋中鈣的沉積量顯著增加。添加Da對(duì)蛋中磷的沉積也有促進(jìn)作用,但差異不顯著(P>0.05),隨著Da添加量的增加,蛋中磷的沉積量增加。
3.1.1 對(duì)產(chǎn)蛋率和蛋重的影響
大豆黃酮提高禽類(lèi)產(chǎn)蛋性能可能主要通過(guò)中樞途徑發(fā)揮作用。一是大豆黃酮降低下丘腦中GH和IGF-Ⅰ受體水平,以減弱GH和IGF-Ⅰ的負(fù)反饋?zhàn)饔?,并增加垂體GH的表達(dá),維持血清中較高的GH和IGF-Ⅰ水平,從而提高其產(chǎn)蛋性能[2]。二是大豆黃酮提高GnRH的基因表達(dá),促進(jìn)FSH和LH的釋放,從而增強(qiáng)卵巢E2的產(chǎn)生,通過(guò)高水平的E2來(lái)提高產(chǎn)蛋性能[3-4]。研究表明,體內(nèi)狀態(tài)下或腦內(nèi)灌注大豆黃酮均可改變GnRH的分泌,促進(jìn)LH的釋放,并且調(diào)節(jié)垂體GnRH受體水平[5-6]。周玉傳等試驗(yàn)表明,大豆黃酮能夠顯著提高紹興鴨的產(chǎn)蛋性能,并促進(jìn)下丘腦GnRH基因表達(dá)水平,說(shuō)明大豆黃酮可能通過(guò)禽類(lèi)的高級(jí)神經(jīng)中樞調(diào)控其產(chǎn)蛋性能[7]。但是,大豆黃酮GnRH基因表達(dá)是直接還是間接作用尚需進(jìn)一步研究探討。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,添加大豆黃酮的試驗(yàn)組產(chǎn)蛋性能均有改善,但試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異均不顯著(P>0.05)。而馬學(xué)會(huì)研究表明,在產(chǎn)蛋后期雞日糧中添加大豆黃酮,添加Da組的產(chǎn)蛋率均顯著高于對(duì)照組(P>0.05)[8]。當(dāng)添加大豆黃酮 20 mg·kg-1時(shí),產(chǎn)蛋率最高,比對(duì)照組提高14.56%,差異極顯著(P<0.01);而添加大豆黃酮 30mg·kg-1時(shí),產(chǎn)蛋率又有下降趨勢(shì)。同時(shí),所有添加大豆黃酮組蛋重均有所提高,當(dāng)添加10mg·kg-1時(shí),蛋重達(dá)到最大值且與其他處理組比較差異顯著(P<0.05);當(dāng)添加 20、30mg·kg-1時(shí),蛋重有下降趨勢(shì),兩組之間差異不顯著(P>0.05)。與本試驗(yàn)結(jié)果差異較大。分析其原因有以下兩個(gè)方面:一是與飼養(yǎng)環(huán)境有關(guān)。試驗(yàn)期間正處本地氣溫較高的季節(jié),時(shí)常有雷雨天氣。因此,有可能是高溫等原因使產(chǎn)蛋雞處于熱應(yīng)激狀態(tài),而Da具有抗應(yīng)激作用,從而使Da因?yàn)閷?duì)抗機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)而對(duì)產(chǎn)蛋率和蛋重的影響不顯著[9]。二是與試驗(yàn)設(shè)計(jì)有關(guān)。本試驗(yàn)為了使每只雞攝入的Da量盡量保持一致,因此先測(cè)各處理的平均耗料量,再以此耗料量為基礎(chǔ),采取定量投料的方式飼養(yǎng)。左偉勇等研究表明,在飼料中添加 Da使產(chǎn)蛋初期母雞攝食量增加4.32%,產(chǎn)蛋高峰期母雞攝食量增加7.95%(P<0.01)[10]。因此,有可能是因?yàn)轱曃笵a后沒(méi)有讓雞任意采食,沒(méi)有滿(mǎn)足雞的營(yíng)養(yǎng)需要,從而導(dǎo)致產(chǎn)蛋率和蛋重提高不顯著。
3.1.2 對(duì)蛋殼品質(zhì)的影響
蛋殼強(qiáng)度和厚度隨產(chǎn)蛋雞年齡增加而降低,說(shuō)明產(chǎn)蛋后期雞對(duì)鈣的吸收能力減弱。而雌激素能提高 1α-羥化酶(1α-Hydroxylaser)的活性,促進(jìn)血中25-(OH)-維生素 D3到活性維生素 D3,即 1,25-(OH)2-維生素D3的轉(zhuǎn)化,雌激素還可直接作用于腸黏膜1,25-(OH)2-維生素D3受體,提高對(duì)鈣的吸收。所以,雌激素的活力可使血鈣升高[8,11]。大豆黃酮屬于植物性雌激素,在飼糧中添加大豆黃酮可增加蛋殼厚度和蛋殼重,從而降低破蛋率,改善蛋殼品質(zhì)。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,試驗(yàn)組蛋殼重、蛋殼厚度與對(duì)照組相比均差異顯著(P<0.05),試驗(yàn)組間差異不顯著(P>0.05)。尤其是添加 10 mg·kg-1時(shí),對(duì)蛋殼重、蛋殼厚度的影響最大。此試驗(yàn)結(jié)果與馬學(xué)會(huì)等的研究一致[8,11]。說(shuō)明大豆黃酮可能增加產(chǎn)蛋后期雞對(duì)鈣的吸收,這可能與雌激素的活力可使血鈣升高的機(jī)理是一致的,但對(duì)這一作用及其作用機(jī)制還有待于進(jìn)一步驗(yàn)證。
3.2.1 對(duì)蛋中蛋白質(zhì)沉積的影響
大豆黃酮具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的作用,可能的機(jī)制是:Da與下丘腦、垂體等處的雌激素受體不同程度的結(jié)合,影響動(dòng)物神經(jīng)內(nèi)分泌的性腺軸和生長(zhǎng)軸,使睪酮、生長(zhǎng)激素(GH)和胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-Ⅰ)產(chǎn)生和釋放增加,而睪酮、GH、IGF-Ⅰ均能直接促進(jìn)肌肉和蛋白合成代謝,最終導(dǎo)致動(dòng)物的肌肉肥大,生長(zhǎng)加速[12]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)照組與20和30 mg·kg-1組蛋白質(zhì)沉積量差異顯著(P<0.05),而與 10mg·kg-1組差異不顯著(P>0.05)。說(shuō)明Da對(duì)蛋中CP的沉積有抑制作用。由于大豆黃酮具有雌激素和抗雌激素的雙重生物活性,其發(fā)揮作用取決于靶器官受體數(shù)目以及動(dòng)物機(jī)體的激素水平,故Da導(dǎo)致蛋中蛋白質(zhì)沉積量的減少可能與所選試驗(yàn)動(dòng)物的生理階段以及輸卵管上受體數(shù)目有關(guān),其作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。
3.2.2 對(duì)蛋中鈣和磷沉積的影響
大豆黃酮可通過(guò)內(nèi)分泌途徑改變蛋雞的內(nèi)源激素水平及鈣磷代謝,從而影響生產(chǎn)性能。在飼料中添加Da 3 mg·kg-1可使蛋雞產(chǎn)蛋率和只日蛋重均顯著增加,料蛋比顯著下降;血清總鈣水平和堿性磷酸酶活性提高,無(wú)機(jī)磷水平呈下降趨勢(shì)[11]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)添加Da 20、30 mg·kg-1時(shí),試驗(yàn)組蛋中鈣的沉積量與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01),但10mg·kg-1組與對(duì)照組差異不顯著(P>0.05)。而試驗(yàn)組中磷的沉積與對(duì)照組差異均不顯著。說(shuō)明Da能促進(jìn)蛋中鈣的沉積,而對(duì)磷的沉積作用雖有提高但影響不顯著。蛋殼形成需要大量的鈣,必需從循環(huán)的血液中攝取鈣。在蛋殼形成期,所有進(jìn)入子宮部的鈣都由血液提供,血液中的鈣來(lái)自飼糧和骨組織。研究表明,大豆黃酮具有雌激素樣作用,可使血鈣升高,使蛋殼中鈣的沉積增加,從而增加蛋殼厚度和蛋殼重[12]。因此,蛋中鈣的沉積量的增加,也是由于Da提高血鈣的機(jī)制。
本次試驗(yàn)結(jié)果表明,大豆黃酮可以提高產(chǎn)蛋后期產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能。能促進(jìn)鈣的吸收,提高蛋殼厚度和蛋殼重,改善蛋殼品質(zhì);能增加蛋中鈣的沉積量,而對(duì)蛋中蛋白質(zhì)的沉積有抑制作用。
[1]孟婷,韓正康,王國(guó)杰.大豆黃酮對(duì)初產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能和血清生理生化指標(biāo)的影響[J].中國(guó)家禽,2002,24(13):13-14.
[2]王根林,陳杰.大豆黃酮對(duì)去卵巢豬LH分泌的影響[J].中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志,1998,14(1):70-72.
[3]王根林,陳杰,Parvizi N.大豆黃酮對(duì)體外灌流垂體前葉組織促黃體素分泌的影響[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),1997,20(4):48-53.
[4]趙茹茜,周玉傳,徐銀學(xué),等.大豆黃酮對(duì)高郵鴨增重及血清某些激素水平和垂體GH mRNA表達(dá)的影響[J].農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào),2002,10(2):176-179.
[5]王根林,陳杰,陳偉華.豬腦內(nèi)微量注射大豆黃酮對(duì)血漿LH水平的影響[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(2):198-200.
[6]王根林,趙志輝,陳偉華,等.大豆黃酮肌注仔豬對(duì)垂體GnRH受體水平的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2000,16(4):233-236.
[7]周玉傳,趙茹茜,倪迎冬,等.大豆黃酮對(duì)紹興鴨產(chǎn)蛋性能影響及有關(guān)中樞機(jī)制初探[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,37(2):296-300.
[8]馬學(xué)會(huì).大豆黃酮對(duì)產(chǎn)蛋雞作用研究[D].保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.
[9]高峰,江蕓,馮敬晶,等.日糧中添加大豆黃酮對(duì)大鼠抗熱應(yīng)激能力的影響[J].畜牧與獸醫(yī),2005,37(9):12-14.
[10]左偉勇,王國(guó)杰,韓正康.添喂大豆黃酮對(duì)自由采食蛋雞生產(chǎn)性能的影響[J].畜牧與獸醫(yī),2003,35(10):11-14.
[11]馬學(xué)會(huì),武現(xiàn)軍,倪耀娣,等.大豆黃酮對(duì)產(chǎn)蛋雞蛋殼品質(zhì)和骨骼代謝的影響[J].飼料工業(yè),2004,25(7):32-34.
[12]韓正康.異黃酮植物雌激素—大豆黃酮對(duì)雄性動(dòng)物生長(zhǎng)及其有關(guān)內(nèi)分泌的研究[J].畜牧與獸醫(yī),1999,31(1):1-2.