131I-組胺-吲哚美辛對大鼠Lewis肺癌的SPECT顯像及療效觀察

劉侃峰,張彩霞

(中國醫科大學附屬盛京醫院 核醫學科,遼寧沈陽 110001)

吲哚美辛(Indometacin,IN)是一種非甾體抗炎藥,是最強的前列腺素(PG)合成酶抑制劑之一。它具有鎮痛、抗炎及解熱作用,緩解炎性疼痛作用強,在臨床使用多年。近年來,有大量臨床研究顯示,該藥對肺癌、膀胱癌、食管癌、腸癌、肝癌等都有較好的療效[1-9]。本研究小組[10-13]曾將氚標記的吲哚美辛引入到荷瘤小鼠體內,應用放射自顯影(ARG)和液閃測量(LSC)技術,觀察氚標記的吲哚美辛在荷瘤鼠體內的分布情況及其親腫瘤性的強弱,證實了氚標記的吲哚美辛在荷瘤鼠的腫瘤組織中有明顯放射性濃聚,即吲哚美辛有較好的瘤組織親和性,且能在腫瘤細胞中存留較長時間,這為吲哚美辛發揮抗腫瘤作用提供了必要的條件。但由于3H的半衰期很長,不適于臨床應用。故選擇臨床常用放射性核素131I標記吲哚美辛,本工作擬將131I標記的組胺-吲哚美辛(131I-His-IN)引入荷瘤鼠體內,以了解其對腫瘤的SPECT顯像效果。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及儀器

Infinia2 VC Hawkeye SPECT、OLYMPUS C-5050光學顯微鏡、OLYMPUS BX41數碼相機:由中國醫科大學盛京醫院病理科提供。

吲哚美辛:化學純度98.5%,山西臨汾云鵬藥業公司提供;組胺-IN(His-IN):化學純度＞95%,委托沈陽藥科大學合成。131I-His-IN:放化純度＞95%,比活度＞185 GBq/g,由江蘇省原子醫學研究所同位素標記實驗室協同標記。

1.2 實驗動物

21只近交系Wistar大鼠(體重120±20 g,鼠齡約2個月,均為雌性,普通級),購于中國醫科大學實驗動物中心;荷Lewis肺癌模型鼠:購自中國醫學科學院藥物研究所。

1.3 動物模型復制與分組處理

將荷Lewis肺癌鼠處死,選擇生長良好的瘤組織,剪成小塊,用200目不銹鋼篩網摩擦,過濾制成單細胞懸液,用細胞計數板測得活瘤細胞計數約為2×106/mL,接種于21只大鼠右腋皮下,每只0.6 mL。待瘤體直徑長至1.5～2 cm時,隨機取6只大鼠進行預實驗:先給予復方碘溶液,行甲狀腺封閉,每次1滴,每天3次,連續7 d,此后采用灌胃法,一次性分別給予370～2 220 kBq131I-His-IN,于 24、48、72 h 進行SPECT顯像,確定最適劑量。預實驗結束后,將另外15只大鼠平均分為3組,同樣采用灌胃法一次性給予 1480 kBq131I-His-IN,分別于 24、48、72 h進行SPECT顯像。

1.4 SPECT顯像

顯像前夜所有模型鼠均被禁食,可自由飲水。將大鼠俯臥位固定后應用SPECT進行掃描。掃描條件:高能平行孔準直器,靜態平掃,矩陣為128×128;能峰為 364 keV;窗寬為20%;放大2.5倍。利用感興趣區(ROI)技術計算腫瘤部位的放射性計數。

1.5 病理檢查

取出腫瘤組織用10%中性甲醛緩沖液固定,石蠟切片、做HE染色。光鏡下觀察各治療組腫瘤細胞的壞死情況。

1.6 統計學處理

2 結果與討論

2.1 SPECT顯像結果

荷瘤鼠灌服131I-His-IN后,其SPECT顯像結果示于圖1。大鼠各部位不同時間的放射性攝取及腫瘤與非腫瘤的放射性攝取比(T/NT)分別列于表1和表2。

由圖1可以看出,注藥后24 h時,胃、膀胱、腫瘤區域放射性核素濃度較高,24 h后各區域濃度呈下降趨勢,但是腫瘤區域相對放射性濃度增高,表明吲哚美辛在胃及膀胱進行攝取及排泄,而在腫瘤區域吲哚美辛有選擇性吸收及儲留作用。

由圖1還可以看出,各顯影區域放射性核素濃聚程度隨時間的延長而降低,注藥后24 h,腫瘤區域、胃區、膀胱區域顯影,其中以胃的放射性核素分布最為濃聚,膀胱和腫瘤區域次之;注藥后48 h,各顯像區域放射性核素分布較前明顯稀疏,腫瘤區域相對放射性核素分布濃聚超過膀胱區域;注藥后72 h,僅可見少量放射性核素分布于各區域,此時腫瘤區相對放射性核素濃聚度最高。這表明131I-His-IN主要經泌尿系統排泄,在胃部組織中有一定程度攝取,而在腫瘤組織中有選擇性地吸收及儲留。

由表1可見,131I-His-IN在腫瘤、胃、膀胱的不同時間的放射性攝取具有統計學意義,p＜0.05。這也證實了圖1的顯像結果。

由表2可見,腫瘤與非腫瘤組織的 T/NT也具有統計學意義,p＜0.05。說明131I-His-IN能釋放γ射線,使腫瘤組織能進行 SPECT顯像。

圖1 荷瘤大鼠灌服131 I-His-IN后的SPECT顯像圖

表1 SPECT顯像各部位不同時間放射性計數(,n=5)

表1 SPECT顯像各部位不同時間放射性計數(,n=5)

注:各組間比較,p＜0.05

時間/h放射性計數腫瘤 胃 膀胱24 679.4±45.8 3 108.8±194.2 1 034±131.7 48 394.6±18.8 506.8±38.6 218.4±14.8 72 105.4±13.8 60.4±3.2 19.4±7.7

表2 不同時間腫瘤與非腫瘤的放射性計數比(T/NT,n=5)

2.2 腫瘤的病理檢查結果

肉眼觀察腫瘤組織可見腫瘤中心壞死組織隨時間延長而有所增多。光鏡下觀察病理結果示于圖2。由圖2可以看出,HE染色切片鏡下見腫瘤細胞有不同程度的壞死,各組腫瘤細胞的壞死部分隨時間推移而有所增多,并且出現了一定量的碎裂細胞,細胞碎裂數目逐漸增多。這也表明腫瘤區域對IN及131I-His-IN有選擇性吸收及儲留作用,131I-His-IN是將IN作為載體特異地聚集于腫瘤細胞內或其表面,131I釋放出的射線(β粒子)的電離輻射生物效應作用于腫瘤,殺傷或殺死腫瘤細胞,因此131I-His-IN具有雙重治療腫瘤作用。

圖2 荷瘤大鼠灌服131I-His-IN后腫瘤組織病理檢查結果a——服藥后 24 h;b——服藥后48 h;c——服藥后 72 h

4 結 論

131I-His-IN能選擇性在腫瘤組織濃集并長時間儲留,可以作為顯像和治療用放射性藥物進行深入研究。

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