Bax和E2F-1在子宮腺肌病中的表達及意義

張 巍，艾中偉，鄭立紅，陳 萍，王 玉

（齊齊哈爾醫學院病理中心，黑龍江齊齊哈爾 161006）

子宮腺肌病（adenomyosis，AM）嚴重影響婦女的身心健康，發病率逐年上升而發病機制尚不清楚，因而備受關注。近年來，關于子宮內膜異位癥（endometriosis，EM）的研究取得很大進展，但對子宮腺肌病的深入研究卻較少。本研究應用免疫組化SP法檢測子宮腺肌病中凋亡調節蛋白Bax及轉錄因子E2F-1的表達情況，以探討其與子宮腺肌病發生及發展的相關性，為尋找該病的病因及臨床防治提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集齊齊哈爾醫學院各附屬醫院2006～2008年因患子宮腺肌病而行手術治療的術后切除標本72例為研究組，取其異位子宮內膜及原位內膜，其中，增生期39例，分泌期33例；對照組正常子宮內膜取自因非子宮內膜疾病（子宮肌瘤等良性病變）而切除子宮的內膜標本55例，其中，增生期31例，分泌期24例。所有患者平均年齡（43.5±4.7）歲，月經周期25～41 d。兩組患者術前均無性激素治療等特殊病史，孕產次、月經周期等差異均無統計學意義，標本內膜分期及診斷依據月經周期時間結合HE染色組織切片后的病理診斷為準。

1.2 試劑與方法

所有標本行常規石蠟包埋后4 μm厚連續切片4張，1張行HE染色，其他做免疫組化染色（SP法）。E2F-1鼠抗人單克隆抗體購自美國Neo Markers公司。Bax單克隆抗體、SP試劑盒、DAB顯色試劑盒購自福州邁新生物技術公司。設陰性及陽性對照，其他按說明書常規操作。

1.3 結果判定

免疫組化染色反應為黃至棕黃色顆粒，Bax的陽性表達產物為細胞膜和細胞質內黃色或棕黃色顆粒，E2F-1的陽性表達產物為細胞核內棕黃色顆粒。細胞數>10%為陽性標準。

1.4 統計學處理

采用χ2檢驗，經SPSS 12.0分析，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Bax的表達

在子宮腺肌病組織中，其原位子宮內膜和異位子宮內膜中Bax蛋白的表達明顯增加，與正常子宮內膜組織比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。子宮腺肌病組織中Bax表達在增生期和分泌期差異無統計學意義（P>0.05），Bax在原位與異位內膜組間表達差異無統計學意義（P>0.05）（表1）。

表1 子宮腺肌病組織和正常子宮內膜組織中Bax的表達[n(%)]Tab.1 The expression of Bax in endometrium of adenomyosis and normal endometrium[n(%)]

2.2 E2F-1的表達

轉錄因子E2F-1在子宮腺肌病組織中的表達明顯增加，且其表達與正常子宮內膜組織比較，差異有統計學意義（P<0.05）。子宮腺肌病組織中E2F-1表達在增生期與分泌期差異無統計學意義（P>0.05），E2F-1在原位與異位內膜組間的表達差異無統計學意義（P>0.05）。在子宮腺肌病患者組織中Bax、E2F-1的表達具有一定的正相關性（表2）。

表2 子宮腺肌病組織和正常子宮內膜組織中E2F-1的表達[n(%)]Tab.2 The expression of E2F-1 in endometrium of adenomyosis and normal endometrium[n(%)]

3 討論

細胞凋亡（apoptosis，APO）是一種由基因調控的細胞自身程序性死亡，在生物體的正常生理活動和病理過程中都有十分重要的意義。當細胞凋亡調控程序紊亂時就會引發疾病，但近年研究熱點都在惡性腫瘤上[1-2]，子宮腺肌病雖為良性病變，但其異位內膜腺體及間質侵及子宮肌層，其生物學行為與惡性腫瘤有相似之處，以此推斷其發病機制可能與凋亡相關。近年來研究發現，子宮內膜異位癥患者內膜細胞與正常人內膜細胞凋亡率差異顯著，細胞凋亡異常可能是子宮內膜異位癥發生及發展的重要原因之一[3-4]。

凋亡調節蛋白Bax于1993年被發現，作為Bcl-2的對抗劑。bcl-2基因是近年來發現的細胞凋亡控制基因，通過控制細胞凋亡而延長細胞的壽命[5]。在正常子宮內膜中Bcl-2表達呈周期性變化，增生期強于分泌期，分泌期強于月經期，但在子宮腺肌病病灶中，Bcl-2持續表達而無周期性變化[6]。與其相似，Bax可促進細胞死亡，被稱為“凋亡促進基因”，可通過調節細胞凋亡而縮短細胞壽命。本研究顯示，在正常子宮內膜中Bax表達呈明顯周期性變化，且增生期高于分泌期；在子宮腺肌病組織中Bax蛋白的表達顯著高于正常子宮內膜組織，且持續表達而無周期性變化（正常子宮內膜Bax表達低于子宮腺肌病的異位內膜Bax表達）。以此推斷子宮腺肌病的發病機制可能與Bax的表達增加、內膜細胞對凋亡敏感性下降有關。這為研究子宮腺肌病的發病機制和尋找防治對策提供了新的理論依據。

E2F-1蛋白作為轉錄因子家族中的一員，對細胞周期限制點起直接調控作用，是細胞周期中G1期向S期過渡的重要調控因子[7-8]。E2F-1的表達可縮短細胞從G1期進入S期的時間，使細胞周期失調，引發細胞過度增殖。研究顯示，E2F-1既可作為癌基因又能作為抑癌基因起作用，推測與細胞所處環境不同及器官特異性有關[9-12]。本研究表明，E2F-1的表達在子宮腺肌病組織中明顯高于正常子宮內膜組織，說明E2F-1蛋白的高表達可促進異位內膜過度增殖，可使異位內膜細胞具有更強的分裂增殖及浸潤能力，與子宮腺肌病的發生呈正相關。

綜上所述，Bax、E2F-1的表達與子宮腺肌病的發生密切相關。子宮內膜細胞自發性凋亡是其保持正常結構的關鍵，而凋亡異常是子宮腺肌病發生的重要因素。因此，推測E2F-1表達增高，同時Bcl-2也增高，兩者發揮協同作用誘發子宮腺肌病。研究細胞凋亡對探討子宮腺肌病的發病機制及指導臨床治療有重要意義。

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