兩種分析儀C反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果的比對

孟秀芹 張善輝

近年來C反應(yīng)蛋白(CRP)作為一種敏感的急性時相蛋白，頗受臨床的重視。本室近期引進一臺由芬蘭Orion Diaqnostica公司提供的小型QuikRead CRP分析儀。根據(jù)臨床實驗室質(zhì)量管理的要求，臨床實驗室采用新的檢測系統(tǒng)，必須對該系統(tǒng)的性能進行測試驗證［1］。我們以目前檢測血清CRP較為成熟的ARRAY360特定蛋白分析儀作為比對系統(tǒng)，對QuikRead CRP分析儀的精密度、線性、可比性等進行評價。

1 材料與方法

1.1 儀器 芬蘭QuikRead 101 CRP分析儀，檢測原理:人血清或全血中的CRP與包被在微球顆粒上的抗人CRP抗體結(jié)合，產(chǎn)生濁度，在QuikRead上可測得其濁度改變，根據(jù)隨試劑配備磁卡上儲存的預(yù)先設(shè)定的校正曲線，可直接讀出其濃度值;美國ARRAY360特定蛋白分析儀，原理為速率散射比濁法。

1.2 試劑 QuikRead CRP分析儀采用Orion Diaqnostica公司提供的 CRP原裝試劑和配套質(zhì)控品;ARRAY360采用Beckman-Coulter公司提供的CRP原裝試劑和配套質(zhì)控品。

1.3 樣本 收集50例無溶血、脂血及黃疸的新鮮血樣各兩管，一份不抗凝，一份用EDTA-K2抗凝。

1.4 方法

1.4.1 儀器定標(biāo) 常規(guī)開機后用各自的配套定標(biāo)系統(tǒng)對CRP進行定標(biāo)。

1.4.2 質(zhì)量控制 采用配套質(zhì)控品分別在兩臺儀器上作室內(nèi)質(zhì)控，確保質(zhì)控結(jié)果在允許范圍內(nèi)。

1.5 評價方法

1.5.1 重復(fù)性測定 將本院2008～2010年間由特定蛋白儀檢測的1832例血清樣本的CRP濃度進行分組(見表1);按照CRP濃度的分布情況，選取由QuikRead CRP分析儀測得的80 mg/L(高)、20 mg/L(中) 、3 mg/L(低)全血標(biāo)本各1例，重復(fù)測定6次，記錄結(jié)果;將樣本在室溫放置2 h后，重復(fù)上述操作，所得結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析，可觀察到不同濃度水平的批內(nèi)和批間精密度(見表2)。

1.5.2 線性檢測 1份CRP濃度為140 mg/L的全血標(biāo)本，用新鮮混合血漿(CR P＜1 mg/L)稀釋為以下8個濃度:140、120、100、80、60、40、20、10 mg/L，按常規(guī)方法測定 CRP，各個濃度測定3次，結(jié)果見表3，并用統(tǒng)計學(xué)方法進行測定值與理論值相關(guān)性分析。

1.5.3 對比實驗 按照表1中CRP濃度分布比例，取CRP低值(＜10 mg/L)、中值(10～50 mg/L)和高值(＞50 mg/L)共50份血樣，在QuikRead上檢測每份標(biāo)本全血和血漿的CRP濃度，在ARRAY360測定血清CRP濃度，比較3組結(jié)果的相關(guān)性。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 線性回歸和相關(guān)性分析均由SPSS 13.0統(tǒng)計軟件完成。

2 結(jié)果

見表 1、2、3、4。

表1 1832例血清樣本的CRP濃度分組結(jié)果

表2 不同濃度水平的批內(nèi)和批間精密度

表3 線性稀釋結(jié)果

表4 比對實驗結(jié)果

3 討論

C反應(yīng)蛋白(C reactiveprotein，CRP)是急性時相反應(yīng)中重要的標(biāo)志物之一，在各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤、手術(shù)創(chuàng)傷等時迅速升高，病變好轉(zhuǎn)時又迅速降至正常［2］。新生兒期感染性疾病缺乏特異性表現(xiàn)，特別是新生兒敗血癥，病原菌的分離、培養(yǎng)時間長，陽性率低，使早期診斷受到限制，而CRP可為新生兒感染性疾病的早期診斷提供有效的客觀依據(jù)［3］。連續(xù)、定量、快速測定CRP，有利于疾病早期診斷、監(jiān)測療效及預(yù)后判斷，對抗生素應(yīng)用是否有效，更有獨特的重要作用。

目前檢測CRP較為廣泛和成熟的系統(tǒng)是特定蛋白分析儀，本科一直使用ARRAY360檢測血清CRP，但因標(biāo)本用量大、嬰幼兒采血困難、報告不及時等因素，CRP作為急性時相反應(yīng)蛋白的優(yōu)勢不能充分體現(xiàn);而QuikRead CRP分析儀使用簡便、用血量少(全血20 μl)、2.5分鐘內(nèi)即可檢出結(jié)果。

QuikRead檢測CRP時，如樣本濃度＞160 mg/L，則需對樣本進行稀釋;通過對近兩年本院血清CRP濃度分布的分析，血清CRP濃度＞160 mg/L的樣本只占1.3%，可見常規(guī)工作中，需要稀釋的樣本很少;重復(fù)性試驗結(jié)果顯示QuikRead檢測全血CRP濃度結(jié)果精確性較高;比對結(jié)果顯示:CRP的QuikRead血漿濃度和ARRAY360血清濃度的相關(guān)性極好(r=0.998)，優(yōu)于QuikRead全血濃度和ARRAY360血清濃度的相關(guān)性(r=0.964)，也優(yōu)于QuikRead全血濃度和QuikRead血漿濃度的相關(guān)性(r=0.968)，分析原因，QuikRead全血檢定的試劑定標(biāo)是在紅細(xì)胞壓積為40時測定的，因此全血CRP濃度受紅細(xì)胞壓積的影響;在進行全血CRP線性稀釋試驗時，按照儀器說明提供的紅細(xì)胞壓積校正公式將稀釋結(jié)果進行了校正，結(jié)果顯示，全血CRP有良好的稀釋線性，線性范圍亦較寬。

QuikRead可檢測全血或血漿CRP，因?qū)嶋H工作中CRP通常與血常規(guī)聯(lián)單，兩個項目可共用一管EDTA-K2抗凝全血，我科首選檢測全血CRP，簡化操作，方便患者，亦可彌補紅細(xì)胞壓積對全血CRP濃度的影響。

［1］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第3版.東南大學(xué)出版社，2006:58.

［2］周宓，潘柏申.C反應(yīng)蛋白在臨床應(yīng)用中的進展.國外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊，2005，26(1):56-57.

［3］昊苔，陳莉亞.血清C反應(yīng)蛋白在新生兒感染時的變化.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2001，13:46.