微血管生成在腦膠質瘤中央與外周分布關系的探討

羅勇 林少華

（中山市第一人民醫院神經外科 廣東中山 5284000）

眾所周知,腫瘤的生長、轉移是血管依賴性的。腦膠質瘤生長同樣也依賴于持續和廣泛的新生血管生成，而腦膠質瘤又不斷刺激新生血管生成以保證其生長。本研究采用免疫組化SP法檢測微血管密度MVD在腦膠質瘤中央及外周的計數情況，運用統計學進行分析比較，探討微血管生成在腦膠質瘤中央及外周的分布關系，為了解腦膠質瘤侵襲性生長的生物學行，并在以微血管為靶點的抗腦膠質瘤的治療指導方面為提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院從2005年至2009年經病理證實為腦星型細胞瘤的石蠟標本42例，其中Ⅰ級星型細胞瘤16例、Ⅱ級星型細胞瘤8例、Ⅲ級星型細胞瘤10例，Ⅳ級星型細胞瘤8例；男性27例，女性15例，男女比例為1.8：1。

1.2 免疫組織化學方法

本實驗采用鏈霉素抗生物蛋白－過氧化酶免疫組織化學染色法，即S-P法。所用的CD34抗體以及SP試劑盒均購自福州邁新生物技術開發公司。免疫組織過程中，以PBS置換一抗染色作為陰性對照，用已知的CD34染色陽性的乳腺癌切片作為陽性對照。

1.3 血管內皮細胞染色的判斷和MVQ計數

染色以在腫瘤間質血管內皮細胞胞漿出現棕褐色顆粒為陽性，凡呈現棕褐色的單個內皮細胞或內皮細胞群均作為一個血管計數，管腔直徑>8個紅細胞的血管不計數。參照Niu等[1]的方法，在低倍鏡下（100×）全面觀察切片，尋找高血管密度區，然后在高倍視野內（200×）計數微血管的數目。記錄3個視野內的微血管數，取其平均值作為該病例的MVQ值。

1.4 統計學處理

應用SPSS 13.0軟件包進行統計學處理，采用配對樣品t檢驗分析，以P＜0.01判斷為有統計學意義。

2 結果

2.1 MVD的計數

腦膠質瘤中央區MVD為(25.84±4.11)，腦膠質瘤外周部MVD為(42.13±5.50)，配對t檢驗分析分析，2組數據的差異有統計學意義(表1)。

表1 MVD在腦膠質瘤中央區與外周部的t檢驗分析(±s)

表1 MVD在腦膠質瘤中央區與外周部的t檢驗分析(±s)

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2.2 MVD在腦膠質瘤中央區與外周部的分布關系

腦膠質瘤中央區的微血管密度（MVD）明顯低于外周部。

3 討論

微血管密度（micro vessel density,MVD）是一個反映腫瘤小血管生成的重要指標本[2]。采用對血管內皮細胞抗原的免疫組織化學技術染色進行微血管定量的方法（即MVD測定），能較準確地反映腫瘤的血管生成。在內皮細胞的眾多標記物中，抗人原始造血細胞抗原（CD34）單克隆抗體對淋巴細胞和基質細胞不存在交叉反應，比Ⅷ因子和CD31更具敏感性和特異性，微血管染色較Ⅷ因子、CD31定位更準確[3]。血管生成（angiogenesis）是指在原有微血管（毛細血管和小靜脈）的基礎上通過“出芽”方式形成新的毛細血管。實體瘤的生長亦和成熟組織的生長、重建、再生一樣伴隨著血管生成。腫瘤血管生成是腫瘤生長和轉移的形態學基礎,它不僅向腫瘤提供充足的營養,同時也向機體輸出腫瘤細胞,導致腫瘤細胞的惡性性長和轉移，所以腫瘤的血管生成與它的生物學行為息息相關。本實驗結果顯示：腦膠質瘤組織中微血管染色呈棕褐色，清晰可辨，切片背景清晰，為準確計數MVD提供保障。腦膠質瘤中央區MVD為(25.84±4.11)，腦膜瘤外周部MVD為(42.13±5.50)，腦膠質瘤中央區的微血管密度（MVD）明顯低于外周部,這也解析了腦膠質瘤具有侵襲性生長的特性。本實驗對微血管生成在腦膠質瘤中分布規律的研究結果，為了解腦膠質瘤侵襲性生長的生物學行，并在以微血管為靶點的抗腦膠質瘤的治療指導方面為提供臨床參考。

[1]Niu XY,Wang ZR,Zhang YF,et al.Relationship between NOS expression and angiogesis in gallbladder carcinoma tissue[J].Fourth MilMed Univ,2003,24(3):265～268.

[2]Kerbel RS.Tumor angiogenesis,past,present and the near future[J].Carcinogenesis,2000,21:505～515.

[3]顧應江,夏祥國.缺氧誘導因子-1的表達與腦膜瘤血管生成的關系[J].國際神經病學神經外科學雜志,2006,35(5):402～405.