消癥丸的制備及質量控制

黃祖光， 孫 臻， 梁建珍

(三亞市中醫院，海南三亞572000)

消癥丸由川芎、浙貝母、丹參、枳實、柴胡、紅花、鱉甲(醋)、穿山甲(炮)等14味中藥組成的中藥制劑。具有疏肝理氣，化瘀散結之功效。主要用于乳腺增生，卵巢囊腫，子宮肌瘤，以及輸卵管不通等癥。其中主藥川芎活血祛瘀，行氣開郁，祛風止痛。其主要有效成分川芎嗪，原標準中無含量測定項目，為有效地控制該制劑的質量;采用高效液相色譜法對川芎中川芎嗪進行了含量測定［1，2］，在原基礎上提高了質量標準，也能更好的控制消癥丸的質量。

1 儀器與試劑

PERKIN ELMER高效液相色譜儀，295紫外-可見波長檢測器，1022數據處理機(美國);甲醇(色譜級);鹽酸川芎嗪對照品(來源:中國藥品生物制品檢定所，批號:110817-200305);川芎對照藥材(來源:中國藥品生物制品檢定所，批號:120918-200406);浙貝母對照藥材(來源:中國藥品生物制品檢定所，批號:120972-200404);丹參對照藥材(來源:中國藥品生物制品檢定所，批號:120923-200509);丹參酮IIA對照品(來源:中國藥品生物制品檢定所，批號:110766-200417);消癥丸(三亞市中醫院制劑室自制);AEL-40SM1/100000稱量天平(日本Shimadzu公司);硅膠G(青島海洋化工廠，批號:980803);水為蒸餾水;乙醚(上海振興化工一廠，AR級);其它試劑均為分析純。

2 處方及制備

2.1 處方 柴胡84 g，枳實105 g，紅花56 g，浙貝母105 g，海藻 105 g，昆布 105 g，丹參 140 g，川芎 105 g，山楂(焦)210 g，青皮 105 g，龜板(制)140 g，鱉甲(醋)140 g，穿山甲(炮)35 g，牡蠣 210 g，共制成 1000 g。

2.2 制法 以上14味藥材，將枳實、浙貝母、川芎、丹參、青皮、龜板(制)、鱉甲(醋)、穿山甲(炮)粉碎成粗粉，混勻，得粗粉備用。其余柴胡等6味加10倍水煎煮2次，每次1.5 h，合并煎液，濾過，濃縮成為相對密度:1.20 ～1.28(60 °C)的清膏，與上述粗粉混勻，干燥，粉碎成細粉，過篩，混勻，用適量蒸餾水泛丸，干燥，打光，即得。

3 質量標準

3.1 性狀

本品為灰棕色至灰褐色圓形小丸，氣香，味微苦。

3.2 薄層色譜法［3］

3.2.1 川芎的薄層色譜鑒別［3］:取本品 3 g，加硅藻土 2 g，研勻，加乙醚20 mL，加熱回流1 h，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1 mL溶解，作為供試品溶液;另取川芎對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液;再取鹽酸川芎嗪對照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液;又再取缺川芎的陰性樣品，同法制成陰性溶液。照薄層色譜法(附錄VIB)試驗，吸取上述4種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照試驗無干擾。

3.2.2 浙貝母的薄層色譜鑒別［4］:取本品粉末5 g，加濃氨試液3 mL與氯仿25 mL，超聲處理15 min，放置過夜，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿0.5 mL使溶解，作為供試品溶液;另取浙貝母對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液;再取缺浙貝母的陰性樣品，同法制成陰性溶液。照薄層色譜法(附錄VIB)試驗，吸取上述3種溶液5 μL，分別點于同一2%氫氧化鈉硅膠G薄層板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(30∶40∶15∶10)10℃以下放置后的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液和亞硝酸鈉乙醇試液置日光下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。陰性對照試驗無干擾。

3.2.3 丹參的薄層色譜鑒別［3］:取本品 3 g，加乙醚 20 mL，振搖，放置1 h，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作為供試品溶液;另取丹參對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液;再取丹參酮IIA對照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液;又再取缺丹參的陰性樣品，同法制成陰性溶液。照薄層色譜法(附錄VIB)試驗，吸取上述4種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯(19∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。陰性對照試驗無干擾。

3.3 含量測定

3.3.1 色譜條件 色譜柱為Symmetry C18柱(150 mm×3.9 mm，5 μm);流動相為甲醇-水(60 ∶40);流速為 1.0 mL/min;檢測波長為296 nm;柱溫為室溫;進樣量為10 μL。

3.3.2 對照品溶液的制備 精密稱取鹽酸川芎嗪對照品80 mg，置200 mL量瓶中，加甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得鹽酸川芎嗪的對照液。

3.3.3 供試品溶液的制備 精密稱取消癥丸2 g。用乙醚15 mL加熱回流1 h，放冷，濾過，濾液置100 mL量瓶中，再加入25%的鹽酸使溶液的pH值為2～3，揮干，殘渣加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

3.3.4 陰性對照液的制備 按處方比例，取除川芎外的其他幾味藥材，按生產工藝制備陰性樣品，并依3.3.3項下方法制成陰性樣品溶液。

3.3.5 系統適用性試驗 分別吸取對照品溶液、陰性樣品溶液、供試品溶液各10 μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，從圖中可見陰性樣品無干擾。結果見圖1。

3.3.6 線性關系考察 精密稱取鹽酸川芎嗪對照品80 mg，置200 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密吸取上述溶液1、2、4、6、8 和10 mL，置50 mL 量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，得每1 mL含鹽酸川芎嗪分別為 8、16、32、48、64、80 μg標準系列溶液，分別精密吸取上述各標準溶液10 μL注入色譜系統中，記錄峰面積，以峰面積對濃度計算回歸方程為:A=405.86+21052.47C，r=0.99999，n=6，川芎嗪濃度在8～80 μg/mL范圍內呈良好的線性關系。

圖1 消癥丸的高效液相色譜圖

3.3.7 精密度試驗 取對照品按供試品溶液的制備方法制備供試液，重復進樣6次，記錄色譜，RSD為0.4%(n=6)。結果表明儀器精密度良好。

3.3.8 穩定性試驗 取同一供試品溶液，分別在0、3、6、9、12、24 h進樣，記錄色譜圖，測定峰面積。結果，RSD=1.56%(n=6)，表明供試品溶液在24 h內穩定。

3.3.9 重復性試驗 取供試品(批號:070516)按供試品溶液的制備方法制備6份供試液，分別進樣，記錄色譜，RSD為0.34%(n=6)。結果表明本法重復性良好。

3.3.10 加樣回收率試驗 取已知含量的同一批(批號:070516)樣品粉末適量，精密稱取6份，分別精密加入鹽酸川芎嗪對照品約80 mg，按3.3.3項下方法制成供試品溶液，分別精密吸取10 μL，記錄色譜峰面積，計算回收率。平均回收率為100.10%，RSD 為1.70%，結果詳見表1。

表1 加樣回收率試驗結果(n=6)

3.3.11 樣品含量測定

按供試品溶液的制備方法制備供試液和對照品溶液，分別進樣，記錄色譜，測定峰面積。測定了6批樣品中鹽酸川芎嗪含量。結果詳見表2。

4 討論

本標準對消癥丸中的川芎、浙貝母和丹參進行了薄層色譜考察，結果與對照藥材及對照品斑點一致，效果較好，可作為定性控制指標;以川芎中有效成分川芎嗪為含量測定指標，用高效液相色譜法進行含量測定，選擇甲醇-水(60∶40)為流動相，使川芎嗪與其它組分能較好地分離，不會出現拖尾現象。

表2 6批樣品含量測定結果(n=6)

由于川芎嗪在高溫條件下不穩定、易氧化和見光易分解，而在酸性條件下相對穩定，故選用鹽酸川芎嗪作為含量測定指標。對消癥丸進行定量分析，可有效控制該制劑的質量。

［1］張 嵩，陳蔚林，饒高堂，等.HPLC法測定鹽酸川芎嗪的含量［J］，中國藥業，2000，9(6):18-19.

［2］趙志春，俞惠琴，陸克平，等.中藥制劑川芎嗪含量的高效液相色譜法測定［J］.中國中藥雜志，1991，16(12):729-730.

［3］中國藥典［S］.一部.2005:28，52.

［4］中華人民共和國衛生部藥典委員會編.中藥薄層色譜彩色圖集［M］.廣州:廣東科技出版社，1995:66.