毛細(xì)管氣相色譜法同時(shí)測(cè)定鹽酸替利定原料藥中4種有機(jī)溶劑殘留量

韓學(xué)靜，張軼華，郄冰冰（河北省藥品檢驗(yàn)所，石家莊市 050011）

鹽酸替利定（Tilidine hydrochloride）是由華納-蘭伯特公司研發(fā)，于1970年在西德上市的一種阿片類止痛劑，目前尚未在國(guó)內(nèi)上市銷售。該藥的鎮(zhèn)痛強(qiáng)度與哌替啶相當(dāng)，約為嗎啡的1/10[1]，其主要的作用部位是腦部，作用包括影響疼痛傳遞以及對(duì)疼痛刺激反應(yīng)性的改變，主要用于緩解急性疼痛、中毒及重度疼痛以及癌癥患者的止痛。鹽酸替利定在合成過程中使用了丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、甲苯等有機(jī)溶劑，為有效控制該原料藥中上述有機(jī)溶劑的殘留量，筆者參考文獻(xiàn)[2，3]建立了以毛細(xì)管氣相色譜法同時(shí)測(cè)定4種有機(jī)溶劑殘留量的方法。結(jié)果表明，該方法簡(jiǎn)單靈敏、準(zhǔn)確可靠。

1 儀器與試藥

6890型全自動(dòng)氣相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）。

鹽酸替利定原料藥（國(guó)藥集團(tuán)工業(yè)股份有限公司廊坊分公司提供，批號(hào)：071201、071202、021203，含量：99.6%、99.7%、99.6%）；丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、甲苯均為氣相色譜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）；二甲基甲酰胺（DMF）為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

對(duì)照品溶液：分別精密量取丙酮630.0 μL（500 mg）、乙酸乙酯 554.9 μL（500 mg）、四氫呋喃 80.9 μL（72 mg）、甲苯102.7 μL（89 mg），置于同一100 mL容量瓶中，用DMF定容，搖勻，得到濃度分別為5、5、0.72、0.89 mg·mL－1的對(duì)照品貯備液。精密量取5 mL置于50 mL容量瓶中，用DMF定容，即得對(duì)照品溶液。

供試品溶液：精密稱取鹽酸替利定1.0 g，置于10 mL容量瓶中，用DMF溶解并定容，搖勻，即得。

2.2 色譜條件

色譜柱為DB-1701毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；檢測(cè)器為氫火焰離子檢測(cè)器（FID），檢測(cè)器溫度為250℃；柱溫采用程序升溫，初始溫度為35℃，保持8 min，以30℃·min－1升至180℃，保持2 min；進(jìn)樣口溫度為155℃；載氣為氮?dú)猓魉贋?.7 mL·min－1；分流比為15∶1；進(jìn)樣量為1 μL。

取對(duì)照品和供試品溶液進(jìn)樣，色譜見圖1。

圖1 氣相色譜圖A.對(duì)照品溶液；B.供試品溶液；1.丙酮；2.乙酸乙酯；3.四氫呋喃；4.甲苯Fig 1 Gas chromatogramsA.reference solution；B.sample solution；1.acetone；2.ethyl acetate；3.tetrahydrofuran；4.toluene

由圖1可見，丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、甲苯的保留時(shí)間分別為5.67、7.65、7.81、10.86 min，各組分理論板數(shù)均不低于100 000，且分離完全（乙酸乙酯與四氫呋喃的分離度為1.7），空白溶劑無干擾。

2.3 線性試驗(yàn)與檢測(cè)限

精密量取對(duì)照品貯備液10 mL置于50 mL容量瓶中，用DMF定容。分別精密量取1、1.25、3、5、7、8.5 mL置于10 mL容量瓶中，用DMF定容，制備成一系列濃度的溶液，分別進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜。以峰面積（A）為縱坐標(biāo)、濃度（C，mg·mL－1）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表1。

表1 各溶劑線性范圍與回歸方程（n＝6）Tab 1 Linear ranges of regression equations of solvent（sn＝6）

由表1可見，各組分在其檢測(cè)濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

當(dāng)S/N≥3時(shí)，丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、甲苯的檢測(cè)限分別為0.06、0.06、0.05、0.02 μg·mL－1。

2.4 精密度與重復(fù)性試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算得丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、甲苯峰面積的RSD分別為1.1%、0.8%、1.3%、1.5%。

取同一批號(hào)供試品溶液，共6份，進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果乙酸乙酯未檢出，丙酮峰面積的RSD為1.1%，四氫呋喃峰面積的RSD為1.3%，甲苯峰面積的RSD為1.0%。

2.5 回收率試驗(yàn)

分別精密量取對(duì)照品貯備液4、5、6 mL各置于50 mL容量瓶中，加DMF定容，作為對(duì)照品溶液A、B、C。精密稱取已知各有機(jī)溶劑殘留量的鹽酸替利定原料藥（批號(hào)為071201）約1.0 g，共9份，置于10 mL容量瓶中，分別用對(duì)照品溶液A、B、C溶解并定容，各3份。進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算得丙酮、乙酸乙酯、四氫呋喃、甲苯的平均回收率分別為98.9%、99.0%、98.2%、99.5%；RSD分別為2.5%、1.4%、2.3%、2.1%。

2.6 樣品中有機(jī)溶劑殘留量測(cè)定

分別取3個(gè)批號(hào)的供試品溶液進(jìn)樣測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算其中有機(jī)溶劑殘留量，結(jié)果3批中乙酸乙酯均未檢出，丙酮?dú)埩袅糠謩e為0.039%、0.036%、0.036%，四氫呋喃殘留量分別為0.042%、0.043%、0.041%，甲苯殘留量分別為0.036%、0.034%、0.037%，符合《中國(guó)藥典》2005年版要求[4]。

3 討論

本試驗(yàn)選用中極性DB-1701毛細(xì)管柱為色譜柱，采用程序升溫，使4種殘留溶劑均能達(dá)到完全分離，縮短了分析時(shí)間。選擇DMF作溶劑，與鹽酸替利定和被測(cè)的4種殘留溶劑均能互溶，并且DMF沸點(diǎn)較高（153℃），在被測(cè)組分之后出峰，且不干擾其它峰的測(cè)定。為測(cè)定原料中所含低沸點(diǎn)殘留溶劑，采用35℃為起始溫度，可確保乙酸乙酯與四氫呋喃的分離。

進(jìn)樣口溫度的選擇：鹽酸替利定熔點(diǎn)為160～165℃，且熔融同時(shí)發(fā)生分解，筆者曾嘗試進(jìn)樣口溫度設(shè)定為180℃進(jìn)行操作，發(fā)現(xiàn)約5 min處出現(xiàn)1個(gè)較大的“饅頭”峰，可能系鹽酸替利定的熱分解產(chǎn)物；故將進(jìn)樣口溫度定為155℃，結(jié)果既可避免熱分解現(xiàn)象的發(fā)生，又可使DMF完全氣化。

筆者曾嘗試選用強(qiáng)極性HP-INNOWax寬口徑、厚液膜毛細(xì)管柱進(jìn)行分離，但丙酮與四氫呋喃難以分離；改用中極性DB-1701毛細(xì)管柱后，分離極大得到改善。

《中國(guó)藥典》2005年版規(guī)定[4]，四氫呋喃、甲苯均為第2類溶劑，限度分別為0.072%、0.089%，乙酸乙酯、丙酮為第3類溶劑，限度均為0.5%。因此，從本試驗(yàn)的測(cè)定結(jié)果來看，樣品中4種有機(jī)溶劑殘留量均符合規(guī)定。

[1]陳素青，黃新潔，崔艷英，等.鹽酸替利定的依賴性評(píng)價(jià)[J].中國(guó)藥物依賴性雜志，2006，15（5）：363.

[2]李珂珂，譚豐蘋.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定拉米夫定中有機(jī)溶劑的殘留量[J].中國(guó)藥房，2007，18（19）：1 502.

[3]馬虹英.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定穿琥寧中吡啶殘留量[J].中國(guó)藥房，2007，18（15）：1 165.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì)編.中華人民共和國(guó)藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：54～57.