一株飼用枯草芽孢桿菌CCAM 080032固態發酵工藝的研究

付小猛 趙述淼 梁運祥 葛向陽

因抗生素的濫用而導致的毒性殘留、耐藥性等問題已引起人們的廣泛關注。尋找安全、無毒的替代品迫在眉睫。作為抗生素的替代品之一，芽孢桿菌制劑能抑制腸道腐敗菌的生長，促進動物生產，并且能形成芽孢，可以耐受高溫和具有良好的貯存性能，一直都是畜牧業科研和生產人員關注的焦點[1]。

芽孢的形成受環境因素的影響，不同菌種形成芽孢的條件不同。枯草芽孢桿菌的芽孢較其它營養體細胞易保存，存活率高，是制備枯草芽孢桿菌制劑的理想存在形式，而制劑中的芽孢含量是影響產品應用效果的關鍵因素[2]。目前,芽孢桿菌制劑的生產方式有兩種：液態發酵和固態發酵。液態發酵易實現純培養和工業化生產，但對設備要求高，生產工藝復雜，且環境污染嚴重；而固體發酵采用的原料一般是廉價的農副產品(如麩皮、谷殼等)，采用的設備也較液體發酵簡單，生產成本大大低于液體發酵。因此，選取合適的生產方式，實現低成本、高產率，滿足畜牧業生產發展的需要，是一個亟待解決的課題[3]。本課題的研究目的就是通過對枯草芽孢桿菌固態發酵工藝的優化，以期獲得較佳產孢條件，為飼用枯草芽孢桿菌制劑的產業化生產提供基礎。

1 材料與方法

1.1 菌種

枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）CCAM 080032，本實驗室保藏。

1.2 培養基

液體種子培養基：LB液體培養基；平板計數培養基：LB固體培養基；固體發酵培養基原料及試劑：麩皮、稻草粉、葡萄糖、胰蛋白胨、NH4NO3、KH2PO4等。……