林 淼 趙志輝 雷 萍
近年來,隨著我國飼料工業的迅猛發展,魚粉的需要量逐年增加,魚粉的質量問題越來越引起飼料行業、養殖業的重視。魚粉是水產飼料的主要蛋白源,尤其含有動物生長所必需的氨基酸,含量豐富且配比合理,在飼料、養殖行業中起著不可代替的作用。由于用量大,價格高,有些商家在魚粉中摻雜使假、以次充好,使魚粉質量參差不齊,給市場造成了一定的混亂[1-2]。摻假、摻雜魚粉中往往是摻入兩種或兩種以上雜質,并且有些魚粉因加工工藝不當造成腐敗,這給魚粉品質分析帶來了一定的困難。因此,有必要建立一個有效的手段對魚粉中的氨基酸進行定量分析。目前,只有少數幾篇文獻涉及到魚粉的定量分析。對于氨基酸的分析大多采用液相色譜[3]、氣相色譜-質譜聯用[4-5]、毛細管電泳[6]、凱氏定氮法[7]和光譜法[8-9]等。然而,這些方法或試劑費用昂貴,或分離效率低,有些方法還不能同時測定多種氨基酸。運用氨基酸分析儀可解決上述問題,同時方法操作簡便,重現性好,靈敏度高。
氧化水解法是將魚粉中的氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸等)用過甲酸氧化,然后進行酸解,再經離子交換色譜分離、測定[10]。脯氨酸在570 nm處有最大吸收峰,除脯氨酸外,其他各氨基酸均在440 nm有最大吸收峰。因此,在570 nm檢測波長計算脯氨酸含量,而在440 nm檢測波長計算其它各氨基酸含量。
1.2.1 試劑
過甲酸溶液:將30%過氧化氫與88%甲酸按1:9(體積比)混合,于室溫下放置1 h,置冰水浴中冷卻30 min(臨用前配制);……