高原護唇膏對家兔皮膚長期毒性的實驗研究

顧宜 王榮 張小麗 張桃莉 董建山 鐘超團 王榮華 王曉娟

高原護唇膏由第四軍醫大學口腔醫院藥劑科借鑒唇炎等口腔黏膜疾病30余年的研究經驗，針對高原地區日照時間長，空氣透明度高，對紫外線輻射阻擋小以及冰雪的反射率高，紫外線很強烈等特點，運用血清學免疫因子檢測的方法探察、分析了高原寒區特發性唇炎的致病因素和病理機制而研制的，是一種具有修復功能的防曬藥物唇膏，該防曬藥物唇膏對唇炎具有預防功能，能顯著降低唇炎的發生率;對已發生唇炎所造成的唇部各種損害具有很好的治療作用，能顯著縮短愈合時間，主要用于治療高原性唇炎［1］。它主要是通過處方中的不同組分:煙酰胺，氧化鋅及二氧化鈦而對唇部起到修復，抗輻射的作用。

1 材料

1.1 動物 SPF級ICR小鼠，雌雄各半，♀體質量(20.9±1.4)g，♂體質量(21.3±1.6)g［西安交通大學醫學院實驗動物中心，許可證號:SCXK(陜):2007-001］。普通級新西蘭兔，雌雄各半，♂體質量1.7～2.0kg［西安交通大學實驗動物中心，動物許可證號:SCXK(陜)第2008-008］，♀體質量1.8～2.1kg［西安迪樂普生物資源開發有限公司，動物許可證號:SCXK(陜)2006-01］。

1.2 試劑與儀器 高原護唇膏(規格:總含藥量3%，第四軍醫大學口腔醫院藥劑科，批號:090105)，高原護唇膏(兩種規格:大劑量組總含藥量45%，小劑量組總含藥量15%。第四軍醫大學口腔醫院藥劑科，批號:090405)，賦形劑(規格:唇膏基質，第四軍醫大學口腔醫院藥劑科，批號:090405)。7170A型全自動生化分析儀(日本HITACH生產)，血液學指標用雅培CD-1600儀((深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司)，JA2003型電子天平(上海精密科學儀器有限公司)，PM一10AD光學顯微鏡(日本Olympus公司)

2 方法

2.1 小鼠急性毒性實驗［3，4］因受藥物濃度和體積限制，無法測出半數致死量LD50，做最大給藥量試驗［2］。取40只小鼠，雌雄各半，按文獻方法［3］禁食不禁水，隨機分成實驗組和空白組，20只/組，以最大可灌胃濃度灌胃給藥，空白組為基質:麻油 =1∶2，實驗組為高原護唇膏:麻油 =1∶1，40ml/kg，1d內每間隔4h給藥1次，共3次。給藥后密切觀察14d內動物的一般情況，存活情況，小鼠中毒癥狀。14d后處死動物，對中毒死亡動物及處死動物進行尸檢，若有異常變化，進行病理組織學觀察。

2.2 大鼠長期毒性實驗［5］根據預實驗，最大劑量組的藥物含量為45%，取36只家兔，按體重性別隨機分成3組，每組12只，雌雄各半，按性別單籠飼養，分為如下三組:①賦形劑組:給予賦形劑，2次/d;②小劑量組:2mg/cm2即160mg/kg(總含藥量15%)，2次/d;③大劑量組:6mg/cm2即480mg/kg(總含藥量45%)，2次/d，按上述劑量涂抹。每周稱體重1次，根據體重調整給藥量，并觀察動物的一般情況。給藥28d后，每組各取4只家兔及給藥90d后，每組各取6只家兔，雌雄各半，心臟采血檢查血液學指標及血液生化學指標。實驗結束后取重要臟器，稱其濕重，計算臟器系數。

2.3 統計學方法 應用SPSS16.0軟件包處理實驗數據，各組實驗數據以均數±標準差()表示，組間進行t檢驗，P＜0.05表示有統計學意義。

3 結果

3.1 小鼠急性毒性實驗結果 高原護唇膏藥粉灌胃給予ICR小鼠后，部分小鼠活動減少，有一半小鼠有腹瀉現象，但無其他異常現象發生。在觀察期內，無1只動物死亡，處死小鼠，解剖，肉眼觀察各臟器，均無異常發現。灌胃給予ICR小鼠后，測不出LD50，測得最大給藥量:濃度1.5%，120ml/kg。

3.2 家兔長期毒性實驗結果

3.2.1 對家兔一般狀況的觀察 家兔在試驗期內及停藥恢復后均活動正常，行為活潑，未見糞便異常，口、鼻、眼無分泌物及呼吸困難等病理改變。護唇膏大、小2個劑量組與賦形劑組動物體重比較，體重基本一致，無明顯影響。

3.2.2 對家兔臟器系數的影響 給藥28d及90d后，心、肝、肺、腎、腦、睪丸、子宮臟器系數統計與賦形劑組比較，未見顯著性差異，恢復期也無明顯影響。

3.2.3 對家兔血液學指標的影響 給藥組給藥28d后血液學指標與賦形劑組比較，無明顯差異;給藥90d后，小劑量PLT與賦形劑對照組比較，統計學有顯著性差異，但根據其正常生理值，并結合大劑量組的值及病理報告顯示此變化無生物學意義，是正常的生理波動，恢復期也無明顯影響。

3.2.4 對家兔血液生化指標的影響 給藥組給藥28d后生化指標與賦形劑組比較，無明顯差異，恢復期也無明顯影響。

4 討論

高原護唇膏的急性毒性實驗結果顯示，用藥后豚鼠采食、體重等均未見異常反應，無叫聲異常、震顫、驚厥、流涎、流淚、流鼻涕、呼吸困難、腹瀉等現象發生，解剖后也未發現心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、胃、十二指腸、前列腺、睪丸、卵巢各臟器異常，灌胃給予ICR小鼠后，測不出LD50，測得最大給藥量濃度為1.5%，120ml/kg。而家兔長期毒性實驗結果顯示，在本實驗條件下:護唇膏大、小劑量組對家兔的一般情況、體重、飲食飲水、血液學、血液生化學、系統解剖和臟器系數均無明顯影響，未發現長期毒性及中毒靶器官，恢復期亦無延遲性毒性反應，結果提示護唇膏皮膚給予3個月，家兔無毒反應劑量為6mg/cm2即480mg/kg。約為臨床人用劑量的165倍。上述結果都足以說明高原護唇膏可安全使用。

高原護唇膏是針對高原地區特殊環境因素研制開發的，高原地區缺氧、干燥、寒冷、紫外線強度高，各種惡劣的環境會引發機體的各種生理機能改變，唇黏膜作為全身唯一的長期暴露在外的無角質層黏膜，抵御外界環境變化的能力較弱，直接受到各種惡劣環境的不良刺激后，所受損害最為明顯。久住高原的官兵，唇部癥狀與季節有明顯關系。冬季寒冷、多風、少雨雪，干燥發病率高，癥狀重，春秋次之?；颊咭蚓植刻弁春统鲅?，給飲食及生活帶來痛苦，難以保持足夠軍事活動能力。西藏地區位處號稱世界屋脊的青藏高原，氣候寒冷、紫外線強度高，唇炎的患病率(76.8%)明顯高于低海拔地區［6］，其中干燥脫屑型唇炎是主要患病類型(89.1%)，臨床表現為唇部干燥脫屑、皸裂，腫脹等，病程長，可反復發作。目前國內外尚沒有針對唇炎的有效治療方案。針對高原地區的氣候特點，我們結合以往的研究經驗和李朝斌等人［7，8］的治療經驗，開發出具有自主知識產權的具有修復、抗光輻射、滋養、保濕作用的防護產品-高原護唇膏。此產品在處方、劑型、臨床應用等方面具有優越性，使用方便，能夠減輕唇紅及口角部黏膜干燥、脫屑、皸裂的癥狀，能加快唇炎的愈合，縮短唇炎治愈的時間，是高原地區駐軍人員健康的有力保障。

［1］韓英軍，胡文才，向澤輝，等.西藏阿里官兵口腔疾病發病情況分析.武警醫學，2001，12(3):178.

［2］李詠梅，張志勇，肖佳尚，等.慢性咽炎合劑長期毒性試驗研究.中國實用醫藥，2009，4(25):10-11.

［3］胡瓊力，陳寶田，崔桂梅，等.天麻鎮眩顆粒毒理學實驗研究.浙江中醫藥大學學報，2008，32(1):96-99.

［4］陳奇.中藥藥理研究方法學.人民衛生出版社，2006:107-108.

［5］李新宇，高紀偉，徐蘭芳，等.酞丁安乳膏在大鼠局部皮膚上的毒理實驗.華西藥學雜志，2009，24(2):168-170.

［6］陳奇.中藥藥理研究方法學.人民衛生出版社，2006:110-114.

［7］劉勇，王勤濤，李剛，等.西藏地區男性干燥脫屑性唇炎流行病學調查.臨床口腔醫學雜志，2007，5(23):308-310.

［8］李朝斌，張西洲.多種維生素膠丸油液和高原護膚霜預防急性高原性唇炎的效果觀察.高原醫學雜志，1998，8(3):44-47.