乙肝產婦乳汁血清HBV-DNA相關性分析

鐘偉明，何浩瑜

（廣西壯族自治區貴港市婦幼保健院檢驗科，廣西貴港 537100）

乙肝產婦乳汁血清HBV-DNA相關性分析

鐘偉明，何浩瑜

（廣西壯族自治區貴港市婦幼保健院檢驗科，廣西貴港 537100）

目的：探討乙肝產婦乳汁中乙肝病毒標志物（HBV-M）和HBV-DNA的關系，從而正確指導乙肝產婦產后母乳喂養。方法：采用時間分辨熒光免疫定量分析法（TRFIA）檢測乙肝產婦血清中的HBV-M，采用熒光定量PCR法（FQ-PCR）檢測血清及乳汁中HBV-DNA含量情況。結果：120例乙肝陽性產婦大三陽的血清與乳汁HBV-DNA陽性檢出率為100%，二者HBV-DNA含量為最高，小三陽組HBV-DNA陽性率分別為87.2%和85.1%，HBsAg/HBcAb組的陽性率分別為88.3%和86.0%，后兩組血清HBV-DNA含量分別為4.57×105和5.84×106copy/ml，乳汁HBV DNA分別為4.40×105和5.98×106copy/ml。結論：乙肝產婦產后能不能母乳喂養與產后產婦血清和初乳中HBV-DNA情況有關，根據檢測結果決定喂養方式，以保證分娩嬰兒的安全哺乳環境。

乙肝病毒標志物；HBV-DNA；乳汁

乙型肝炎是世界上最常見的傳染病之一，母嬰乙肝病毒的傳播途徑為胎盤傳播感染，分娩時經產道被感染或產后哺乳感染及母嬰的密切接觸感染[1-2]。了解乙肝表面抗原（HB-sAg）陽性乳汁中的HBV-DNA含量，有利于指導母乳喂養。

1 資料與方法

1．1 一般資料

收集2006年5月～2008年6月檢測HBsAg陽性并在本院分娩的產婦120例，年齡20～35歲；健康產婦對照20例，是本院同期住院患者，年齡21～36歲。

1．2 標本采集

血液標本：采用無菌操作技術采集產后2～7 d內產婦血液3 ml，置干燥試管中，3 000 r/min，離心 5 min，取血清；乳汁采集：產婦乳頭用無菌0.9%NaCl溶液消毒后，用無菌干燥試管留取乳汁3～4 ml，3 000 r/min，離心15 min，取上清液檢測。

1．3 檢測方法

TRFIA 法 進 行 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 5項HBV標志物指標定量檢測。儀器與試劑為上海新波生物技術有限公司提供的SYM-B10型時間分辨熒光免疫分析儀及配套試劑，操作嚴格按試劑說明書，結果判斷：HBsAg≥0.5 ng/ml，HBsAb≥10 mIU，HBeAg≥0.03 NCU/ml，HBeAb≥1.5 NCU/ml，HBcAb≥0.1 NCU/ml為陽性。HBV-DNA 定量使用美國ABI公司PE5700自動熒光PCR擴增儀，試劑盒由中山醫科大學達安基因診斷中心提供，操作嚴格按說明書，臨界陽性標準品 1.0×103copy/ml，強陽性標準品為 1.0×108copy/ml。

1.4 統計學處理

HBV-DNA定量結果用求對數平均值的方法來計算HBV-DNA平均拷貝數，陰性結果不參加平均值的統計，采用SPSS 11.0統計軟件包進行t檢驗。

2 結果

對照組20例健康產婦的HBV-DNA含量和乙肝標志物的檢測結果均為陰性，120例產婦血清乙肝陽性產婦HBsAg(+)，HBeAg(+)，HBcAb(+)(大三陽)30 例，占 25%，HBsAg(+)，HBeAb(+)，HBcAb(+)(小三陽)47 例，占 39.2%，HBsAg(+)，HB-cAb(+)43例，占35.8%。120例產婦血清與乳汁HBV DNA檢測結果見表1。

表1 120例產婦血清與乳汁HBV-DNA結果和陽性率比較

120例乙肝陽性產婦大三陽的血清與乳汁HBV-DNA陽性檢出率為100%，二者HBV-DNA含量為最高，小三陽組HBV-DNA陽性率分別為87.2%和85.1%，HBsAg/HBcAb組的陽性率分別為88.4%和86.0%，后兩組血清HBV-DNA含量分別為 4.57×105和 5.84×106copy/ml，乳汁 HBV-DNA 分別為 4.40×105和 5.98×106，兩組相比，差異有統計學意義（P<0.01），乳汁HBV-DNA含量與血清HBV-DNA含量正相關（r=0.921）。

3討論

眾所周知，母乳喂養嬰兒是最好的喂養方式，母乳成分是嬰兒最佳營養品，母嬰密切接觸有利于母嬰的身心健康。乙肝病毒攜帶者母乳傳播問題一直是醫務人員比較關注的重要問題之一，關于乙肝病毒標志物陽性產婦能否進行母乳喂養一直有爭議。母嬰傳播是乙肝病毒感染流行的重要途徑之一，約占HBV感染的1/3，新生兒感染HBV，則將有90%可轉變為慢性HBsAg攜帶者，因此乙肝的傳播已成為影響人口素質的重要問題[3]。

從120例乙肝產婦的乳汁HBV-DNA檢測中，血清HBV陽性的母親，其乳汁可能存在HBV-DNA。HBV攜帶者產婦乳汁和血清中HBV-DNA差異無統計學意義（P>0.05），血中HBeAg陽性產婦其初乳中HBV-DNA含量更高[4]，本文也說明這一點。從檢測結果來看，乙肝產婦乳汁HBV-DNA含量，大三陽組>HBsAg/HBcAb+組>小三陽組，乳汁和血清HBV-DNA含量呈正相關；血清大三陽產婦的乳汁HBV-DNA含量最高，檢出率為100%。大量資料表明，血清中HBeAg陽性率與HBV-DNA陽性率之間有較好的相關性，HBeAg能基本反映HBV在體內的復制狀態[5]。血HBeAg陽性產婦具有較大的潛在危險性，HBV-DNA是HBV的遺傳物質，是病毒復制的指標之一[6]。HBV-DNA定量測定的意義是判斷HBV感染者病毒復制的水平，關于血液循環中HBV-DNA濃度與患者傳染性之間的關系，通常血漿HBV-DNA濃度大于109copy/ml則日常生活中密切接觸中具有較強的傳染性，105～106copy/ml生活中密切接觸中傳染性較小，小于105copy/ml則日常生活中密切接觸幾乎無傳染性[7]。

結果表明HBeAg陽性產婦體內HBV處于復制活躍期，傳染性大，建議采取人工喂養。

血HBeAg陰性的HBV攜帶產婦不能排除HBV通過乳汁傳播的可能[8]。本實驗對其中47例HBeAg陰性HBV攜帶產婦乳汁HBV-DNA檢測時發現，有85.1%HBV-DNA檢出率。血HBeAg陰性產婦HBV攜帶者母乳喂養應慎重。

筆者認為產婦HBV攜帶者母乳喂養應慎重，較理想的方法是HBV感染者在婚前、孕期在醫生指導下做相關檢查，根據需要采取一些防御措施，如妊娠晚期是否需要注射高效乙肝免疫球蛋白，盡量防止或減少母嬰間的垂直傳播，給將分娩的嬰兒一個安全的哺乳環境。

[1]李甲芬.HBV標志物陽性者產婦乳汁HBV DNA檢測[J].臨床檢驗雜志,2005,23(2):119.

[2]隋愛華,劉相萍,楊堃.乙肝血清學陽性產婦乳汁中HBV DNA檢測的意義[J].實用醫藥雜志,2008,25(11):1329.

[3]林瑞珠.新生兒注射滅活乙肝疫苗的效果評價[J].廣東醫學,2004,25(1):106.

[4]吳岷岷,唐引榮,郭彩玉,等.采用阻斷措施的乙型肝炎病毒攜帶產婦哺乳結果的觀察[J].中華婦產科雜志,2002,37(4):235.

[5]洪艷華.乳汁乙肝病毒標志物檢測的臨床意義[J].臨床和實驗醫學雜志,2007,6(2):92.

[6]陸德源.微生物學[M].5版.北京:人民衛生出版社,2002:289-293.

[7]李金明.實時熒光PCR技術北京[M].北京:人民軍醫出版社,2007:198.

[8]吳曉蔓,馮秀蘭,周利純.乙肝病毒攜帶產婦乳汁、唾液乙肝病毒標志物檢測結果分析[J].中國婦幼保健,2009，24(8):1037.

R512.6+2

B

1674-4721（2010）09（b）-077-02

2010-06-21)