家兔膽囊炎模型腹部循膽經高溫反應與NE、5-HT、E含量變化的觀察＊

羅明富，郭 瑩，張 棟，馬惠敏，王淑友

（中國中醫科學院 針灸研究所，北京 100700）

研究證明，循經高溫現象（紅外輻射軌跡）是經絡生物物理特性的一個顯著特征，是反映經穴生理或病理現象較客觀的指標之一［1］。已有實驗證明，兔膽囊炎模型可在腹部沿膽經出現高溫反應現象。去甲腎上腺素（NE）、E（腎上腺素）和5-羥色胺（5-HT）對組織物質能量代謝有調控作用。目前，對NE、5-HT、E在循膽經高溫反應組織內的變化還缺乏了解。故本實驗以兔膽囊炎模型為基礎，觀察NE、E、5-HT與循膽經高溫反應的相關性。

1 材料與方法

1.1 動物與分組

清潔級日本大耳白家兔14只，體重1.5kg～2.5kg，雌雄各半，由中國醫學科學院實驗動物中心提供。飼養1周后，隨機分為對照組6只，膽囊炎模型組（簡稱模型組）8只。

1.2 主要儀器與試劑

AGA-782型紅外熱像儀系統（AGA公司產），AH-2型高級顯微鏡（OLYMPUS），酶聯免疫試劑盒（北京華英生物技術研究所），STAT FAX 2100全自動酶標儀。

1.3 模型制作

按照張棟等報道的膽囊炎模型制作方法造模［2］，術后家兔自由飲食。對照組除不做手術外，其他處理均與模型組相同。

1.4 紅外熱像觀測方法

造模后，飼養動物 11d，期間分 3d、7d、11d 3個時段沿膽經腹段，采用紅外熱像儀系統做體表熱像圖觀察和記錄，并用標記筆標記出高溫線的具體位置。

1.5 檢測指標

紅外熱像觀察結束后麻醉動物，在左右腹側沿膽經的位置，迅速切取模型組的循經高溫反應部位和對照組相應部位的皮下組織（0.5g/只）進行勻漿，12000 rpm離心5 min離心處理后取上清液，采用酶聯免疫技術對上清液內的 NE、E、5-HT進行檢測。

1.6 統計學分析

用SPPS 11.5統計軟件分析，數據采用均數±標準差（±s）表示，組間采用單因素方差分析，以t檢驗對實驗數據進行顯著性分析。

2 結果

2.1 紅外熱像檢測

體表紅外熱像檢測結果顯示模型組在造模后的第3、7、11天，約70％的動物在左右腹側沿膽經的位置出現長短不一的循經溫度變化帶或區，與對照組或造模前比較循經高溫反應一般隨天數的增加而增加，特別在第7天和11天后，循經高溫反應則逐漸明顯。這些循經高溫反應的帶或區，其走行與膽經相近，出現率右側腹部（患部）多于左腹部側（對側），而對照組相應部位的溫度變化則不明顯（圖1A～D）。結果顯示模型組的循經高溫反應均比造模前或對照組的循經溫度升高約0.5℃ ～1.4℃。

2.2 膽囊炎模型兩側腹部循膽經組織內NE、E和5-HT的檢測

表1顯示，取膽囊炎模型兩側腹部循膽經發生高溫反應部位的組織和對照組相應部位組織進行勻槳和離心等處理，采用酶免疫法對各樣品 NE、E和5-HT含量進行檢測和統計學處理。結果如下：與對照組比較，模型組兩側腹部循膽經發生高溫反應部位的組織內 NE、5-HT含量升高，差異有顯著性意義（P＜0.05）。同體的對側（左側）與患側（右側）比較，NE和5-HT含量變化均沒有顯著性差異性，2組E含量沒有顯著性差異（P＞0.05）。

表1 2組腹部循膽經組織內NE、5-HT、E含量的變化（ng/L）±s）

表1 2組腹部循膽經組織內NE、5-HT、E含量的變化（ng/L）±s）

注：與對照組比較：*P＜0.05；與對照組比較：#P＞0.05，E含量的變化（μg/L）

組 別 n NE 患側對側5-HT E NE 5-HT E對照組 6 26.61±1.5 37.98±2.09 2.01±0.19 27.19±1.3238.92± 2.12 1.95±0.14模型組 8 34.59±8.18* 47.26±7.39* 2.08±0.32# 32.51±5.72* 49.70±12.15* 2.03±0.48#

結果表明，NE和5-HT與膽囊炎引起的腹部循膽經高溫反應有一定相關性。

圖1 （A）造模前，左右腹側沿膽經的熱像圖溫度約35.8℃；（B～D）分別為造模后第3、7、11天，循膽經的熱像圖溫度依次為 35.3℃、36℃、37.2℃

3 討論

循經感傳是經絡的主要功能之一，也是臨床判斷針灸療效的重要標準。現代紅外技術證明，臟腑發生病變可在體表出現循經高溫反應，為經絡研究提供客觀指標。本實驗觀察到，在模型組右側和左側腹部循膽經高溫反應組織內NE含量明顯高于對照組，表明循經高溫反應組織內NE釋放增多。NE可作用于脂肪細胞 β3受體，通過UCP使細胞產熱增加，進而使組織溫度增加影響局部組織的溫度變化或循經感傳。5-HT又稱血清素，它既是神經遞質又是炎癥介質，參與免疫調節過程。5-HT其相應的受體可分為7種類型和至少14種亞型，除5-HT3受體為配體門控離子通道外，其余則為G蛋白偶聯受體，可見5-HT從中樞到外周廣泛分布，參與機體的許多生理或病理過程［3］。根據臨床研究，5-HT使內皮細胞上的5-HT1受體啟動，可通過釋放內皮細胞舒張因子（EDRF）和前列腺素（PGS）使血管平滑肌收縮、毛細血管擴張、通透性增高，引起皮膚紅斑水腫、發紅發熱、出血、疼痛及瘙癢等炎癥反應。據實驗研究報道，電針穴位所產生的氣至病所效應與抑制上述炎性介質的釋放有關［4］。眾所周知，熱反應是炎癥的主要癥狀之一，實驗性膽囊炎所引起的循經高溫現象也是一種病理反應的結果，并與5-HT含量的增加呈正相關性，表明5-HT作為一種炎癥介質可能參與了臟腑體表相關的病理反應過程。

當然，本研究的這些結果只是從NE和5-HT等因素對循經高溫現象進行一些探索，對循經高溫反應復雜機制的揭示還需做更深入的研究。

［1］胡翔龍，培清，許金森，等.人體體表循經紅外輻射軌跡的熱源及其形成機理的探討［J］.針刺研究，2002，27（6）：258-260.

［2］張棟，付衛星，葉燕燕，等.實驗性膽囊炎家兔體表循經高溫線顯示［J］. 上海針灸雜志，2001，20（1）：42-43.

［3］周舒，婁艾琳.5-羥色胺的生理和病理生理［M］.北京：人民衛生社，1998.1-49.

［4］李熳，施靜，李玲俐，等.“氣至病所”對相關皮瓣浸泡液內5-羥色胺、腎上腺素、去甲腎上腺素含量的影響［J］.針刺研究，2001，26（4）：292-298.