刺參對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠抗疲勞作用的研究

李 冰，王靜鳳，傅 佳，李曉林，李 輝，趙 芹，薛長(zhǎng)湖*

(中國(guó)海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，山東 青島 266003)

刺參對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠抗疲勞作用的研究

李 冰，王靜鳳，傅 佳，李曉林，李 輝，趙 芹，薛長(zhǎng)湖*

(中國(guó)海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，山東 青島 266003)

研究北方養(yǎng)殖刺參的主要活性成分和對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠抗疲勞的作用。結(jié)果表明：養(yǎng)殖刺參體壁富含酸性黏多糖、膠原蛋白、活性氨基酸和活性脂質(zhì)等多種活性成分，能提高小鼠負(fù)重游泳能力、肝糖元含量和安靜狀態(tài)下小鼠血紅蛋白含量，保持運(yùn)動(dòng)小鼠血紅蛋白水平穩(wěn)定，顯著降低運(yùn)動(dòng)小鼠血乳酸的生成，促進(jìn)運(yùn)動(dòng)后血乳酸的消除，加速運(yùn)動(dòng)血清尿素氮的清除。說(shuō)明養(yǎng)殖刺參具有顯著的抗疲勞和提高運(yùn)動(dòng)耐力的作用。

養(yǎng)殖刺參；抗疲勞；肝糖原；血乳酸；血清尿素氮

Abstract ：This paper describes the bioactive composition of cultured sea cucumber Stichopus japonicus and its anti-fatigue effect in mice. The results indicated that body wall of S. japonicus was rich in acidic mucopolysaccharides, collagen, bioactive amino acids and lipids. In comparison with the control group, administration of Stichopus japonicus for 30 consecutive days prolonged the duration of exhaustive swimming in mice weighted with weights (approximately 5% of body weight), promoted the synthesis of liver glycogen and hemoglobin and kept a level of hemoglobin 90 min post-swimming similar to that before swimming, significantly decreased the generation of blood lactic acid and accelerated the elimination of blood lactic acid and blood urea nitrogen in mice after swimming. Based on these investigations, S. japonicus has an obvious anti-fatigue effect and improves exercise endurance in mice.

Key words：cultured Stichopus japonicus；anti-fatigue；liver glycogen；blood lactic acid；blood urea nitrogen

運(yùn)動(dòng)性疲勞既與體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)的消耗有關(guān)，也與神經(jīng)、內(nèi)分泌以及免疫系統(tǒng)的平衡調(diào)節(jié)相關(guān)。海參為棘皮動(dòng)物門(Echinodermata)海參綱(Holothuroidea)楯手目(Aspidochirota)動(dòng)物，是海洋中重要的食物和藥物資源。現(xiàn)已證明，海參體壁中含有海參多糖、海參皂苷、海參膠原蛋白肽、海參腦苷酯、神經(jīng)節(jié)苷酯等多種生物活性物質(zhì)[1]，這些活性物質(zhì)作為生物信息分子對(duì)人類生理功能的調(diào)節(jié)起著重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，具有提高免疫功能、抗腫瘤、抗凝血、抗血栓、降血脂、抗衰老等多種生理功效[2-5]。海參的種類和來(lái)源不同，因生活環(huán)境和所攝食物各異，致使其營(yíng)養(yǎng)成分和功效存有差異。本實(shí)驗(yàn)擬在前期工作的基礎(chǔ)上，以北方養(yǎng)殖刺參為研究對(duì)象，分析養(yǎng)殖刺參的主要成分及其對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠抗疲勞作用的影響，以期為養(yǎng)殖刺參的深度開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

養(yǎng)殖刺參，購(gòu)自青島市膠南養(yǎng)殖場(chǎng)，經(jīng)本院中試實(shí)驗(yàn)基地加工成干制刺參。用于成分分析的刺參，經(jīng)粉碎后備用。用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的刺參，分別制成勻漿，－40℃貯存，實(shí)驗(yàn)時(shí)以蒸餾水配成所需濃度懸濁液。Balb/c小鼠，雄性，體質(zhì)量(18±1)g，SPF級(jí)，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證號(hào)為SCXK(京)2007 — 0001。

糖原試劑盒、尿素氮試劑盒、乳酸試劑盒 南京建成科技有限公司；巖藻聚糖硫酸酯 美國(guó)Sigma公司；木瓜蛋白酶 廣西南寧龐博生物工程有限公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純或以上級(jí)別。

CA-958D型半自動(dòng)生化分析儀 長(zhǎng)春光機(jī)醫(yī)療儀器有限公司；Model 680型酶標(biāo)儀 Bio RAD公司；835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀 日本日立公司。

1.2 方法

1.2.1 蛋白含量分析

采用凱氏定氮法測(cè)定[6]。

1.2.2 膠原蛋白含量分析

刺參經(jīng)水解后，采用比色法測(cè)定其中羥脯氨酸含量，再經(jīng)系數(shù)折算的方法測(cè)定膠原蛋白含量[7]。

1.2.3 酸性黏多糖含量分析

將刺參以木瓜蛋白酶酶解24h后，經(jīng)離心、上清液定容，采用次甲基藍(lán)法測(cè)定[8]。

1.2.4 總脂質(zhì)含量分析

總脂質(zhì)含量測(cè)定采用Folch法[9]。將刺參切碎，用氯仿:甲醇(2:1，V/V)勻漿，用乙酸鋅靜置過(guò)夜分層。收集下層氯仿層，無(wú)水硫酸鈉脫水后過(guò)濾，真空旋蒸至干，所得殘余物即為總脂質(zhì)。氮?dú)獯敌羝恐临|(zhì)量恒定后稱質(zhì)量，旋蒸瓶增加的質(zhì)量即為總脂質(zhì)質(zhì)量，除以原料質(zhì)量即為總脂質(zhì)含量。

1.2.5 總脂質(zhì)組成成分分析

脂肪組分的測(cè)定采用硅膠柱層析法[10]。采用濕法裝柱，將活化后的硅膠緩緩倒入層析柱(30cm×2.1cm)中，靜置30min待硅膠柱穩(wěn)定后，將含200～300mg總脂質(zhì)的少量氯仿溶液上樣，依次用氯仿洗脫中性脂、丙酮洗脫糖脂、甲醇洗脫磷脂，各自單獨(dú)收集后旋蒸至干、稱質(zhì)量。得到各脂肪組分質(zhì)量。

1.2.6 氨基酸組成分析

刺參準(zhǔn)確稱量(精確到0.0001g)，經(jīng)6mol/L HCl 溶液水解，采用氨基酸自動(dòng)分析儀對(duì)其主要氨基酸組成進(jìn)行分析。

1.2.5 動(dòng)物分組及實(shí)驗(yàn)

Balb/c小鼠共4批，每批小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和海參低、中、高劑量組，每組10只，分別測(cè)定負(fù)重游泳時(shí)間、血清尿素氮與血紅蛋白含量、肝糖原含量、血乳酸含量。劑量組小鼠分別灌胃不同劑量的刺參(劑量分別為100、200mg/(kg bw·d)和400mg/(kg bw·d))。正常對(duì)照組小鼠灌胃生理鹽水，灌胃體積為0.1mL/10g bw，連續(xù)30d。于末次灌胃后1h進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2.5.1 負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)

將各組小鼠分別稱質(zhì)量、編號(hào)，尾部各負(fù)一重物(約為體質(zhì)量的5%)。分別把小鼠放入玻璃水族箱(50cm×30cm×40cm)，水深為30cm，水溫保持在(25±0.5)℃中游泳，以小鼠頭部沉入水中10s不能浮出水面者為體力耗竭，記錄小鼠自游泳開始至體力耗竭的時(shí)間，作為小鼠游泳時(shí)間。

1.2.5.2 血清尿素氮的測(cè)定

使小鼠在30℃的水中無(wú)負(fù)重游泳。分別于游泳前、游泳90min休息60min等不同時(shí)間，眼眶靜脈叢采血，分離血清。按試劑盒法測(cè)定血清尿素氮含量。

1.2.5.3 血紅蛋白水平測(cè)定

使各組小鼠分別在30℃的水中無(wú)負(fù)重游泳。分別于游泳前、游泳90min等不同時(shí)間，眼眶靜脈叢取血，按照試劑盒法測(cè)定小鼠血紅蛋白含量。

1.2.5.4 肝糖原含量測(cè)定

使各組小鼠分別在30℃的水中無(wú)負(fù)重游泳。分別于游泳前、游泳10min、游泳90min等不同時(shí)間脫頸椎處死小鼠，取肝臟。按照試劑盒法測(cè)定小鼠肝糖原含量。

1.2.5.5 血乳酸含量測(cè)定

使各組小鼠分別在30℃的水中無(wú)負(fù)重游泳。分別于游泳前、游泳10min、游泳10min休息20min等不同時(shí)間，眼眶靜脈叢采血，按照試劑盒法測(cè)定小鼠全血乳酸含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 11.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，并以LSD法進(jìn)行兩兩比較，以P＜0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用±s表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 刺參的主要活性成分

化學(xué)分析結(jié)果表明，刺參體壁中蛋白、膠原蛋白、酸性黏多糖、總脂質(zhì)的含量分別為72.7%、52.1%、14.9%和4.24%。總脂質(zhì)中中性脂、糖脂和磷脂含量分別占26.1%、30.1%和43.8%。

表1 刺參體壁氨基酸的組成和含量Table 1 Amino acid composition of body wall of Stichopus japonicus

由表1可見，除色氨酸和胱氨酸因水解時(shí)被破壞，共檢測(cè)出16種氨基酸，總含量為67.1%，以Gly、Glu、Asp、Arg等藥效氨基酸含量為高。必需氨基酸、支鏈氨基酸和藥效氨基酸分別占氨基酸總量的29.3%、16.1%和64.2%。

2.2 對(duì)小鼠負(fù)重游泳耐力的影響

表2 刺參對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間及對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠血紅蛋白和血清尿素氮含量的影響(±s，n=10)Table 2 Effect of Stichopus japonicus on the duration of weightloaded exhausive swimming and the contents of hemoglobin and blood urea nitrogen in mice (± s，n=10)

表2 刺參對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間及對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠血紅蛋白和血清尿素氮含量的影響(±s，n=10)Table 2 Effect of Stichopus japonicus on the duration of weightloaded exhausive swimming and the contents of hemoglobin and blood urea nitrogen in mice (± s，n=10)

注：*.與正常對(duì)照組相比，差異顯著(P＜0.05)；**.與正常對(duì)照組相比，差異極顯著(P＜0.01)；#.與游泳前相比，差異顯著(P＜0.05)；##.與游泳前相比，差異極顯著(P＜0.01)。下同。

組別 負(fù)重游泳時(shí)間/min 血紅蛋白/(g/L) 血清尿素氮/( mmol/L)游泳前 游泳90min 游泳前 游90min休息60min正常對(duì)照組 7.38±2.43 145.7±8.94135.3±7.85#5.78±0.43 10.9±0.94##海參低劑量 13.8±3.24**155.5±3.74*150.7±6.85**5.41±0.75 6.46±0.81**#海參中劑量 15.4±3.15**158.9±12.4*152.7±7.72**5.38±0.84 6.36±0.57**#海參高劑量 13.1±4.38*158.8±9.79*152.9±7.51**5.65±0.89 6.76±0.80**#

由表2可見，不同劑量的刺參均能顯著提高小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。與正常對(duì)照組比較，小鼠的平均負(fù)重游泳時(shí)間提高了91.1%，表明刺參能明顯提高小鼠的運(yùn)動(dòng)耐力。

2.3 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠血紅蛋白含量的影響

由表2可見，不同劑量刺參均能顯著提高安靜狀態(tài)下小鼠體內(nèi)血紅蛋白含量。當(dāng)游泳開始后，隨著體力繼續(xù)消耗，正常對(duì)照組小鼠的血紅蛋白含量明顯下降，而刺參各組小鼠的變化不大，表明刺參能維持運(yùn)動(dòng)小鼠體內(nèi)血紅蛋白含量的相對(duì)穩(wěn)定。

2.4 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠血清尿素氮含量的影響

由表2可見，刺參對(duì)運(yùn)動(dòng)前安靜狀態(tài)下小鼠體內(nèi)的血清尿素氮含量無(wú)顯著性影響。運(yùn)動(dòng)后，各組小鼠體內(nèi)血清尿素氮含量都明顯增加。但與正常對(duì)照組比較，刺參組小鼠的血清尿素氮平均降低了40.15%。說(shuō)明刺參能加速運(yùn)動(dòng)后血清尿素氮的清除。

2.5 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠肝糖原含量的影響

表3 刺參對(duì)小鼠肝糖原和全血乳酸含量的影響(±s，n=10)Table 3 Effect of Stichopus japonicus on the contents of liver glycogen and blood lactic acid in mice (±s，n=10)

表3 刺參對(duì)小鼠肝糖原和全血乳酸含量的影響(±s，n=10)Table 3 Effect of Stichopus japonicus on the contents of liver glycogen and blood lactic acid in mice (±s，n=10)

組別 肝糖原/(mg/g) 血乳酸/(mmol/L)游泳前 游泳10min 游泳前 游泳10min游10min休息20min正常對(duì)照組 41.1±3.51 27.1±6.851.56±0.423.36±0.94 2.78±0.80海參低劑量 58.2±9.80**40.2±3.97**1.26±0.302.25±0.45* 1.93±0.62*海參中劑量 61.3±5.03**46.6±8.53**1.22±0.392.21±0.65* 1.82±0.58*海參高劑量 61.5±7.73**49.1±9.77**1.22±0.412.35±0.57* 1.80±0.52*

由表3可見，不同劑量刺參均能顯著提高運(yùn)動(dòng)前安靜狀態(tài)下小鼠的肝糖元含量，與正常對(duì)照組比較，平均提高了49.7%。運(yùn)動(dòng)后小鼠要消耗肝糖元來(lái)維持血糖水平穩(wěn)定，肝糖元含量隨游泳時(shí)間的延長(zhǎng)而迅速降低。游泳10min后，刺參組小鼠肝糖元含量較正常對(duì)照組平均提高了29.1%，說(shuō)明刺參能明顯延緩疲勞出現(xiàn)。

2.6 對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠血乳酸水平的影響

由表3可見，在游泳前安靜狀態(tài)時(shí)，刺參對(duì)小鼠全血乳酸含量無(wú)顯著性影響。游泳10min，各組小鼠全血乳酸含量均較安靜狀態(tài)下顯著提高。但與正常對(duì)照組比較，刺參能顯著降低運(yùn)動(dòng)小鼠全血乳酸含量，平均下降了30.1%。游泳10min休息20min后，不同劑量的刺參均能顯著降低運(yùn)動(dòng)后小鼠全血乳酸含量，較正常對(duì)照組平均降低了35.3%。說(shuō)明刺參具有明顯的消除乳酸、促進(jìn)疲勞恢復(fù)的作用。

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)北方養(yǎng)殖刺參體壁的主要活性成分及其抗疲勞作用進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，養(yǎng)殖刺參體壁中富含酸性黏多糖、膠原蛋白、藥效和支鏈氨基酸、糖脂和磷脂等主要活性成分，具有顯著的抗疲勞作用。

疲勞最直接和客觀的表現(xiàn)是運(yùn)動(dòng)耐力下降，而力竭游泳時(shí)間是反映運(yùn)動(dòng)耐力的重要指標(biāo)。負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，刺參能顯著提高小鼠的負(fù)重游泳時(shí)間，提高小鼠的運(yùn)動(dòng)耐力。血糖是影響長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)動(dòng)能力的重要限制性因素之一。肝糖元是血糖的貯存庫(kù)，在機(jī)體血糖降低時(shí)可迅速分解釋放入血，以維持血糖水平的穩(wěn)定[11]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，刺參能顯著提高小鼠的肝糖元儲(chǔ)備，保證小鼠在運(yùn)動(dòng)過(guò)程中的供糖能力，從而延緩運(yùn)動(dòng)小鼠疲勞出現(xiàn)。乳酸是機(jī)體在激烈運(yùn)動(dòng)初期通過(guò)葡萄糖的無(wú)氧糖酵解途徑獲能的代謝終產(chǎn)物，乳酸在肌肉和血液中的堆積是運(yùn)動(dòng)性疲勞產(chǎn)生的主要原因之一。乳酸的消除有利于疲勞的恢復(fù)，提高小鼠的運(yùn)動(dòng)能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，刺參能顯著降低運(yùn)動(dòng)小鼠血乳酸的生成和促進(jìn)運(yùn)動(dòng)后血乳酸的消除。血紅蛋白的主要功能是運(yùn)輸氧氣，其含量直接影響機(jī)體的運(yùn)動(dòng)耐力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，刺參能維持運(yùn)動(dòng)小鼠體內(nèi)血紅蛋白含量的相對(duì)穩(wěn)定，保證機(jī)體氧氣供應(yīng)充足，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體有氧代謝的進(jìn)行和乳酸的消除，提高運(yùn)動(dòng)耐力。血清尿素氮是蛋白質(zhì)代謝的終產(chǎn)物，是評(píng)定機(jī)體對(duì)運(yùn)動(dòng)適應(yīng)能力的重要指標(biāo)之一。機(jī)體血清尿素氮含量隨運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的增加而增加，機(jī)體對(duì)負(fù)荷的適應(yīng)能力越差，血清尿素氮的增加就越明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，刺參能加速運(yùn)動(dòng)小鼠血清尿素氮的清除，顯著提高小鼠的運(yùn)動(dòng)適應(yīng)能力。

自由基的生成是導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)性疲勞的一個(gè)重要的因素。自由基以及脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物一方面引起線粒體膜脂和膜蛋白發(fā)生交聯(lián)，膜脂鏈縮短，引起線粒體膜流動(dòng)性下降，膜的完整性破壞或者引起酶構(gòu)象變化，亞基結(jié)構(gòu)受損，致使ATP酶活性下降，機(jī)體分解利用ATP減少[12]；另一方面破壞了電子漏的受控機(jī)制使線粒體呼吸Ⅲ態(tài)出現(xiàn)電子漏，致使合成ATP的效率下降[13]。養(yǎng)殖刺參體壁的化學(xué)分析結(jié)果顯示，刺參體壁富含酸性黏多糖、膠原蛋白、活性脂質(zhì)和活性氨基酸。有關(guān)海參酸性黏多糖的藥效學(xué)已進(jìn)行了深入研究，證明海參酸性黏多糖能顯著提高紅細(xì)胞SOD活性，具有顯著的抗氧化作用。膠原蛋白是刺參體壁粗蛋白的主要成分，含有多種功能性活性肽，能有效清除超氧陰離子自由基和羥自由基，降低細(xì)胞MDA含量，提高細(xì)胞抗氧化能力，增強(qiáng)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性[14-15]。刺參體壁的藥效氨基酸Gly、Glu、Asp、Arg具有抗疲勞活性。Gly是合成血紅蛋白的基本原料，是生血、補(bǔ)血的物質(zhì)基礎(chǔ)；Gly和Glu是細(xì)胞合成谷胱甘肽的重要原料，谷胱甘肽在機(jī)體的抗氧化機(jī)制中起重要作用，尤其是還原型谷胱甘肽對(duì)于維持紅細(xì)胞膜的完整性以及血紅蛋白的運(yùn)氧能力十分重要[16]。Glu是肌肉合成谷氨酰胺的前體物質(zhì)，而谷氨酰胺能直接通過(guò)血腦屏障調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性。另外，谷氨酰胺還能將運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的氨運(yùn)送到肝腎解毒，從而維持血氨濃度的穩(wěn)定，延遲中樞疲勞的出現(xiàn)。谷氨酰胺是糖異生供能的重要能源物質(zhì)，在糖氧化供能不足的情況下，谷氨酰胺糖異生作用增強(qiáng)，從而提高運(yùn)動(dòng)能力[17]。L-Arg和L-Asp是較早提出的氨基酸抗疲勞產(chǎn)品，已經(jīng)證明，Arg和Asp分別通過(guò)NO和促進(jìn)脂肪氧化代謝途徑提高運(yùn)動(dòng)耐力[18-20]。

支鏈氨基酸(亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸)作為必需氨基酸，不僅是合成機(jī)體蛋白質(zhì)的原料，還具有顯著的抗疲勞作用[21]：能夠抑制血液中的色氨酸進(jìn)入腦內(nèi)，減少5-羥色氨的合成，減輕中樞疲勞；通過(guò)清除生成的過(guò)多自由基或阻斷線粒體膜上的自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，保護(hù)心肌和骨骼肌的抗氧化功能，維持細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)。另外，支鏈氨基酸能促進(jìn)機(jī)體胰島素、生長(zhǎng)激素的分泌[22]，從而加速肌肉蛋白質(zhì)的合成，防止肌肉組織的降解，具有抗外周性疲勞作用，加快運(yùn)動(dòng)后機(jī)體的修復(fù)，具有糖的異生作用。黃金麗等[23]的研究表明，補(bǔ)充支鏈氨基酸可促進(jìn)糖的異生作用，減少骨骼肌乳酸的積累，延緩疲勞的發(fā)生和促進(jìn)運(yùn)動(dòng)后疲勞的消除。

另外，糖脂和磷脂是構(gòu)成生物膜的重要脂質(zhì)組分，具有參與造血、促進(jìn)免疫功能、保持生物膜的結(jié)構(gòu)和功能、促進(jìn)大腦發(fā)育和提高反應(yīng)能力、抗疲勞等重要生理功能[1]。

綜上所述，養(yǎng)殖刺參體壁中含有全面的抗疲勞活性物質(zhì)，具有顯著的抗疲勞和提高運(yùn)動(dòng)耐力的作用。

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Anti-fatigue Effect of Sea Cucumber Stichopus japonicus in Mice

LI Bing，WANG Jing-feng，F(xiàn)U Jia，LI Xiao-lin，LI Hui，ZHAO Qin，XUE Chang-hu*
(College of Food Science and Engineering, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)

TS254.1

A

1002-6630(2010)15-0244-04

2009-12-22

國(guó)家“863”計(jì)劃項(xiàng)目(2007AA091805)；國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30972284；30871944)

李冰(1985—)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)楹Ｑ笊锘钚晕镔|(zhì)。E-mail：lb435317714@163.com

*通信作者：薛長(zhǎng)湖(1964—)，男，教授，博士，研究方向?yàn)樗a(chǎn)品化學(xué)。E-mail：xuech@ouc.edu.cn