Ti-SBA-15介孔材料用于磷酸化肽的高效富集

張 宇, 秦洪強, 吳仁安, 鄒漢法

(中國科學院大連化學物理研究所,中國科學院分離分析化學重點實驗室,遼寧大連116023)

Ti-SBA-15介孔材料用于磷酸化肽的高效富集

張 宇, 秦洪強, 吳仁安, 鄒漢法＊

(中國科學院大連化學物理研究所,中國科學院分離分析化學重點實驗室,遼寧大連116023)

結合基質輔助激光解吸飛行時間質譜(MALD I-TOF MS)檢測技術,考察了Ti-SBA-15介孔材料對β-酪蛋白酶解產物中磷酸化肽的選擇性富集性能。實驗結果顯示,含Ti和Si物質的量比為0.08的Ti-SBA-15介孔材料可選擇性地對β-酪蛋白酶解產物中的磷酸化肽進行選擇性富集;對于β-酪蛋白和牛血清白蛋白物質的量比為1∶100的蛋白質酶解混合液,Ti-SBA-15仍能實現對其磷酸化肽的有效富集。上述結果表明,作為一種多孔、高比表面積的磷酸化多肽的選擇性吸附材料,Ti-SBA-15有望在磷酸化蛋白質組的分析中得到廣泛的應用。

Ti-SBA-15介孔材料;磷酸化肽;選擇性富集;基質輔助激光解吸飛行時間質譜

Abstract:A titanium-incorporated SBA-15m esoporous m aterial(Ti-SBA-15)was synthesized viatheco-condensation of tetraethy lorthosilicate(TEOS)and tetrabutyl titanateusing surfactant P123as the template.Due to the existence of Ti in the fram ew ork of SBA-15,the synthesized Ti-SBA-15was applied as the selective adsorbent of phosphopep tides from the comp lex tryp tic digest of β-casein.The matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry(MALD I-TO F MS)analysis show ed that the phosphopep tides ofβ-casein digest could be selectively enriched by the Ti-SBA-15with Ti/Simolar ratio of0.08,even under the interference of bovine serum album in(BSA)with the molar ratio of β-casein to BSA up to 1∶100.It can be concluded that the Ti-SBA-15show ed the specific adsorption toward the phosphorylated peptides,which providesgreat potential in the specificca pture of phosphopep tides.

Key words:titanium-incorporated SBA-15m esoporous material(Ti-SBA-15);phosphopeptides;selective enrichment;matrix assistedlaser desorption/ionizationtime of flight mass spectrometry(MALD I-TO F MS)

蛋白質的磷酸化過程是指蛋白質在激酶的作用下將三磷酸腺苷(ATP)或三磷酸鳥苷(GTP)上的磷酸基團轉移到底物蛋白質上的過程,是生物體內一種非常重要的蛋白質翻譯后修飾方式[1-5],也是蛋白質組學研究的熱點之一。目前,蛋白質組學研究的主要技術手段是基于蛋白質酶解技術的多肽離子化質譜檢測方法。然而,由于非磷酸化多肽對磷酸化多肽質譜離子化的抑制作用以及磷酸化蛋白質的含量相對較低,使得對磷酸化蛋白質的檢測較為困難[6]。……