基于在線二維色譜的不同生長時期鹿茸的比較蛋白質(zhì)組分析

高 亮, 喬曉強(qiáng), 梁 振, 張麗華＊, 霍玉書, 張玉奎

(1.中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所,中國科學(xué)院分離分析化學(xué)重點實驗室,國家色譜研究分析中心,遼寧大連116023;2.中國科學(xué)院研究生院,北京100039;3.美國得克薩斯大學(xué),圣安東尼奧78229-3900)

基于在線二維色譜的不同生長時期鹿茸的比較蛋白質(zhì)組分析

高 亮1,2, 喬曉強(qiáng)1,2, 梁 振1, 張麗華1＊, 霍玉書3, 張玉奎1

(1.中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所,中國科學(xué)院分離分析化學(xué)重點實驗室,國家色譜研究分析中心,遼寧大連116023;2.中國科學(xué)院研究生院,北京100039;3.美國得克薩斯大學(xué),圣安東尼奧78229-3900)

建立了基于在線二維弱陰離子交換色譜-反相液相色譜(2D-WAX-RPLC)的蛋白質(zhì)分離系統(tǒng),并用于不同生長時期鹿茸的比較蛋白質(zhì)組分析。以5種標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的混合物為樣品,考察了系統(tǒng)的重現(xiàn)性。通過改變標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)之間的濃度比,研究了該系統(tǒng)進(jìn)行蛋白質(zhì)相對定量的能力。在此基礎(chǔ)上,針對4個不同生長時期的鹿茸樣品,分別采用5種不同的方法進(jìn)行蛋白質(zhì)提取,經(jīng)2D-WAX-RPLC分離后,收集各生長時期對應(yīng)蛋白質(zhì)的峰高最大比超過2的組分。酶解后,采用微柱反相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(μRPLC-MS/MS)進(jìn)行肽段的分離鑒定;共從9個差異蛋白質(zhì)峰中鑒定到了22個差異蛋白質(zhì)。研究結(jié)果表明,利用基于蛋白質(zhì)水平的在線二維液相色譜分離技術(shù)找尋差異蛋白質(zhì),具有重現(xiàn)性好、自動化程度高等優(yōu)點,可用于開展比較蛋白質(zhì)組學(xué)的研究。

在線二維液相色譜;鹿茸;蛋白質(zhì)組;不同生長時期;比較蛋白質(zhì)……