秋季阿什河水體真菌群落研究

周秀華, 楊秀冬, 林海坤

(1.長春大學 生物科學技術學院 , 吉林 長春 130022;2.吉林龍灣國家級自然保護區管理局 , 吉林 輝南 135102; 3.吉林省輝南森林經營局 , 吉林 輝南 135102)

秋季阿什河水體真菌群落研究

周秀華1, 楊秀冬2, 林海坤3

(1.長春大學 生物科學技術學院 , 吉林 長春 130022;2.吉林龍灣國家級自然保護區管理局 , 吉林 輝南 135102; 3.吉林省輝南森林經營局 , 吉林 輝南 135102)

應用真菌分類學 、群落生態學的基本研究方法 ,對秋季黑龍江省阿什河水體中真菌群落進行了分離培養 ,共獲得 16個菌株 。該水體中真菌種類較少 ,而且多為常見種類 ,這主要與分離方法以及人為活動對該地區水體的干擾有關。

阿什河 ;真菌 ;分離

生物多樣性的保護全世界都極為關注 ,真菌是微生物中的一大類群 ,其中水生真菌是一類與人類生活息息相關的珍貴生物資源。在淡水生態環境的物質循環中水生真菌扮演著重要的角色 ,它們分解物質的有機組織并且釋放營養和碳源 。目前 ,水生真菌的研究已成為真菌研究的熱點之一 ,水生真菌與其生活水體溫度、季節、地理、污染和著生基質關系的研究逐步展開 。我國對水生真菌的研究開始于 20世紀 80年代 ,尚處于初級階段 。更多的分離培養 、鑒定水生真菌 ,不但對增加生物多樣性的內容具有十分重要的意義 ,而且在環境指示 、污染處理、新功能結構化合物以及生物防治等方面也有廣泛的利用價值[1]。

阿什河是松花江的一級支流 ,是哈爾濱市市區內流程最長的清水源河流 ,對于提高城市生態效應 、防風固沙 、保護植物多樣性具有重要作用。本文對秋季阿什河水體中的真菌進行分離培養 、鑒定 ,初步了解該水體中真菌群落現狀 ,旨在為當地水體保護提供參考。

1 材料和方法

1.1 樣品的采集

采集時間與地點 :分別于 2007年 9、10、11月份在黑龍江省阿什河上游水體中取樣三次。

采集方法 :為了盡可能多地分離出水生真菌 ,分別采集了水樣和水草以及水中的枯枝木條 。 Ⅰ水樣 :將滅菌的塑料瓶在水面下開蓋 ,灌滿水后在水中蓋好蓋子 ;Ⅱ水草及枯枝木條 :用滅菌后的鑷子將水草及枯枝木條夾入無菌的采集袋中封口保存。

1.2 樣品的分離

培養基 :所有樣品均采用兩種培養基進行菌種分離。 Ⅰ馬丁氏培養基 :葡萄糖 10g,蛋白胨 5g,KH2PO41g,MgSO4·7H2O 0.5g,孟加拉紅 (1mg/ml)3.3ml,瓊脂 20g,鏈霉素 30μg/ml,蒸餾水 1 000ml,pH 自然 。 ⅡPDA 綜合培養基 :馬鈴薯 200g,葡萄糖 20g,瓊脂 20g,KH2PO43g,MgSO41.5g,蒸餾水 1 000ml,pH 自然 。

水樣中真菌的分離 :在無菌操作下取滅菌的濾紙過濾河水 ,然后用無菌剪刀將濾紙剪成 5mm 的方塊 ,分別放入上述兩種培養基上 ,每個培養皿 5塊 ,設五個重復 ,置于 25℃下倒置培養 。

水草及枯枝木條上真菌的分離 :用滅菌剪刀將材料剪成 5mm 左右的小段 ,分別放入上述兩種培養基上 ,每個培養皿 5段 ,每種樣品設五個重復 ,置于 25℃下倒置培養 。

1.3 菌種鑒定

隨時觀察真菌的長出情況 ,及時純化 ,采用 MEA 培養基進行純化鑒定 ,MEA 配方 :麥芽浸膏 30g,大豆蛋白胨 3g,瓊脂 15g,蒸餾水 1 000ml,pH 5.4～5.8;對于在 MEA 培養基上未產生孢子的菌株用促孢培養基培養 ,促孢培養基配方 :蔗糖 1g,瓊脂 5g,酵母浸膏 0.1g,KH2PO40.1g,蒸餾水 1 000ml,pH 自然 。純化后的菌種 ,在顯微鏡下依據形態學特征并結合在培養皿中的培養特性進行鑒定[2～4]。

1.4 數據統計

在培養過程中定期觀察培養基中菌落生長情況 ,統計菌種的檢出率 。檢出率 =(分離到該菌種材料數 /該處理材料總數 ) ×100%[5]。

2 結果與分析

經過分離 、培養和純化 ,在采集的樣品中共分離出 16個真菌菌株 ,分別屬于 9個屬 12種 ,見表 1。其中 ,水樣中分離出 9個菌株 ,水草上分離出 10個菌株 ,枯枝木條上分離出 13個菌株 。枯枝木條可能比較易于真菌附著 ,所以分離菌株較豐富 。在所分離真菌中 ,有 5個菌株在三種采集樣品中均有出現 ,分別是Alternaria sp.、Aspergillus niger、Cladosporium sp.、Penicillium sp.1、Trichoder m a sp.1,除Cladosporium sp.外總體出現頻率較高 ,均超過了 10% 。另外 ,M ucorsp.的出現頻率也較高 。出現頻率較高的菌株在空氣中和土壤中也比較常見 ,屬于氣生或陸生真菌中的腐生菌或污染菌 ,這些菌株在水體中的大量出現可能與近年來人們對阿什河的干擾有關。

表 1 各樣品中真菌的檢出率 (%)

3 結 論

本研究所得真菌種類不多 ,其原因可能與分離技術有關 ,有些水生真菌比較難分離 ,或者是在人工培養基質上難以生長。在今后的研究中需要不斷改進實驗手段和方法 ,以便得到更多的菌株。

水生真菌對其生活的水生生態環境質量變化比較敏感 ,有研究表明 ,水生真菌多樣性和區系特征在不同污染程度的水生生態環境中具有一定的特異性 ,一般來講 ,潔凈水體中水生真菌的多樣性要比被污染水體中的水生真菌多樣性豐富。本研究所得真菌種類較少 ,而且多為污染菌的另一個原因應該與阿什河水質現狀有關。近年來阿什河非法采沙屢禁不止 ,沿河企業不斷向河內排放污水 ,加之阿什河上開展漂流等旅游項目 ,均對阿什河水體造成了嚴重的污染。從保護水生真菌多樣性的角度出發 ,阿什河水體污染的治理刻不容緩。

[1] 羅晶 ,張克勤 ,蔡磊 ,等.中國大陸淡水真菌研究 [J].華中農業大學學報 ,2004,23(1):7-13.

[2] 中國科學微生物研究所.常見與常用真菌 [M].南京 :江蘇科學出版社 ,1984:30-1401.

[3] H.L. 巴尼特 ,B.B. 享特.半知菌屬圖解 [M].沈崇堯 ,譯.上海 : 科學出版社 ,1977:5-376.

[4] 戴芳瀾.真菌的形態和分類 [M].南京 :江蘇科學出版社 ,1987:45-1651.

[5] 周秀華 ,崔磊 ,宋瑞清.樟子松葉棲真菌的群落結構 [J].東北林業大學學報 ,2006,34(2):30-32.

[6] 周秀華.樟子松芽棲真菌群落結構 [J].長春大學學報 ,2006,16(5):77-78.

責任編輯:鐘 聲

Study on aquatic mycoflora i n autumn in Ashihe Valley

ZHOU Xiu-hua1,YANG Xiu-dong2,L IN Hai-kun3

(1.Bio-Scientific and Technical College,Changchun University,Changchun 130022,China; 2.Longwan NationalNature Reservation Administration Bureau of Jilin Province,Huinan 135102,China; 3.Huinan ForestManagementBureau of Jilin Province,Huinan 135102,China)

An investigation is conducted to study aquatic mycoflora in autumn in Ashihe Valley by the basic methods ofmycology and community ecology.A totalof 16 species fungi are isolated.There are few species of fungi inAshiheValley,and the species identified are common ones.The importance reasons are the identifymethod and the human disturbances in this area.

Ashihe Valley;fungi;isolation

S718.81

A

1009-3907(2010)06-0029-02

2010-04-03

周秀華 (1978-),女 ,黑龍江同江人 ,講師 ,博士研究生 ,主要從事園林植物保護方面研究 。