新型功能性蜜棗對失血性貧血模型小鼠的影響

摘要：通過觀察新型功能性蜜棗對失血性貧血模型小鼠的影響，探討其保健功效。實驗采用放血法造成小鼠貧血模型，以益氣養血口服液為陽性對照，功能性蜜棗水提液高、低劑量組進行治療。觀察測定小鼠紅細胞數、血紅蛋白量、紅細胞壓積，計算胸腺及脾臟重量指數。實驗結果顯示，功能性蜜棗高劑量組能夠明顯升高小鼠外周血中紅細胞數、血紅蛋白含量、紅細胞壓積(p<0.05) ，并能明顯提高胸腺及脾臟重量指數(p<0.05)。實驗結果提示，功能性蜜棗尤其是高劑量(20g蜜棗/kg)可改善小鼠的貧血癥狀，具有補血養血作用。

關鍵詞：新型功能性蜜棗 脾臟重量指數 胸腺重量指數 外周血細胞指標。

贊皇大棗是河北著名的土特產，在贊皇已有上千年栽培歷史，因其味道甘甜，鮮美可口，風味極佳，品質在大棗中名列前茅。蜜棗為贊皇最主要的大棗加工品，長期以來，蜜棗就是贊皇大棗加工的代稱。但僅憑蜜棗“單打一”，無法抵御市場風險，粗放加工也嚴重影響了贊皇蜜棗的品質和聲譽。為增強贊皇蜜棗的競爭力，急需開發營養、健康、保健的蜜棗新品。

新型功能性蜜棗是依據中醫藥理論組方，由大棗、山藥、龍眼肉、薏苡仁、蓮子、黃精、百合等多味藥食兩用中藥為原料，結合現代綠色食品加工技術生產而來。其中，山藥功偏補腎生精，益肺腎之陰；龍眼肉能夠滋陰補腎、補中益氣、養血安神；薏苡仁能健脾、滲濕、止瀉；蓮子有養心、益腎、補脾的功效；黃精可補中益氣、強筋骨；百合可養陰潤燥。故功能性蜜棗具有益氣健脾、滋陰養血功效，具有陰陽雙補的作用。本研究主要通過觀察功能性蜜棗對失血性貧血模型小鼠的影響，探討其補血養血作用，為開發新型功能性保健食品提供依據?，F將研究結果總結如下。

1 材料

1.1 動物 健康雄性KM小鼠，清潔級，體重18~23g，由河北省實驗動物中心提供，許可證為SCXK（冀）2008－1－003，動物飼料亦由該中心提供。

1.2 藥物與試劑 功能性蜜棗由大棗、山藥、龍眼肉、薏苡仁、蓮子、百合、黃精等為原料加工制得，實驗時在河北醫科大學中醫學院中藥化學實驗室水提濃縮成相應濃度。益氣養血口服液（10ml/支），通化茂祥制藥有限公司出品，實驗時用蒸餾水稀釋一倍配成陽性藥物溶液。

1.3 主要儀器 MB10Kpw型電子天平（上海?？惦娮觾x器廠），JA2003 SHP07003型精密電子天平（上海恒平科學儀器有限公司），BC-2300型全自動三分群血細胞分析儀（深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司）。

2 方法

2.1 分組與造模 60只健康雄性KM小鼠，體重18~23g，自由飲水進食，飼養于18℃~22℃明暗各12小時的清潔級動物實驗室內，正常喂養3天。動物造模參考文獻[1~3]，以75%酒精棉球擦拭小鼠尾部，使血管擴張充血，剪去鼠尾尖端0.2~0.3cm，立即采血，EDTA抗凝，測定紅細胞計數（RBC）、血紅蛋白含量GB）、紅細胞壓積（HCT）。然后將鼠尾傷口浸入裝有37℃±1℃水的刻度試管中，直至小鼠失血0.5ml。失血24小時后，尾端采血測RBC、HGB、HCT。取造模成功小鼠50只，隨機分成5組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組、功能性蜜棗低劑量組、功能性蜜棗高劑量組及陽性（益氣養血口服液）對照組。

2.2 給藥方法 功能性蜜棗高劑量組、低劑量組小鼠分別灌服20g蜜棗/kg體重、10g蜜棗/kg體重，給藥容量為0.2ml/10g體重；陽性對照組灌服益氣養血口服液稀釋液0.2ml/10g體重；正常組和模型組灌服等容量蒸餾水，連續10天。

2.3 檢測指標及方法

2.3.1 小鼠體重及外觀形態的變化 自給藥開始每天觀察小鼠的精神、食欲、皮毛、眼睛、尾部及體重變化情況。記錄給藥前、后小鼠體重。

2.3.2 外周血細胞指標 各組小鼠末次給藥前禁食18小時，正常飲水。末次給藥1小時后，摘除眼球取血，通過血液分析儀檢測各組小鼠紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細胞壓積（HCT）等血液指標，并記錄數據。

2.3.3 脾指數與胸腺指數 取血后，將小鼠頸椎脫臼處死，剖開腹腔，取胸腺和脾臟，分別稱量胸腺和脾臟的重量，記錄數據，并按下式計算胸腺指數和脾指數。

臟器指數=

2.4 統計學處理 實驗數據用X±S表示，統計學處理采用spss11.0 for window統計軟件。所有數據先行正態性和方差齊性檢驗，各組間比較采用單因素方差分析，樣本均數間的兩兩比較采用LSD-t檢驗。

3 結果

3.1 對失血性貧血模型小鼠形態學的影響 正常組小鼠神氣矯健，行動敏捷；皮毛光澤而密，緊貼皮膚；眼睛明亮，色澤粉紅；鼻唇清潔，濕潤，呈淡粉紅色；尾粗、圓而呈粉紅色；腰背平直，食欲正常。模型組小鼠表現出精神萎靡，倦臥少動嗜睡，皮毛蓬松枯槁；眼睛淡白無神；鼻唇淡白失澤；團縮拱背，明顯消瘦；食欲下降，飲水增多，并于造模后少數出現死亡。各蜜棗組小鼠造模后出現貧血特征，其癥狀、體征基本同模型組，給藥后程度出現減輕，而且未出現小鼠死亡現象。造模組小鼠體重低于空白對照組。給藥后，模型組小鼠體重低于益氣養血口服液對照組以及功能性蜜棗高、低劑量組。各組小鼠體重變化見表1。

3.2 對失血性貧血模型小鼠血細胞數的影響 造模24小時后，與空白組小鼠相比，各組小鼠外周血中RBC、HGB及HCT均顯著降低，說明失血性貧血模型造模成功。給藥10天后，與模型組小鼠相比，功能性蜜棗高劑量組小鼠外周血中RBC、HGB、HCT均明顯升高（P<0.05），低劑量組小鼠外周血中RBC、HGB、HCT也出現升高，說明功能性蜜棗有改善外周血指標的作用（見表2）。

與空白組比較，△△：P＜0.01；與模型組比較，*：P<0.05。

3.3 對失血性貧血模型小鼠免疫器官的影響 功能性蜜棗高劑量組小鼠的脾重明顯高于模型組（P<0.05），脾指數較模型組也有升高趨勢；功能性蜜棗高劑量組小鼠胸腺重及胸腺指數明顯高于模型組（P<0.05）。低劑量組小鼠脾重、脾指數、胸腺重及胸腺指數也高于模型組小鼠。說明功能性蜜棗有增強免疫器官重量，增強免疫功能的作用。（見表3，表4）

與模型組比較，*P<0.05

與模型組比較，*：P<0.05

4 討論

河北是個農業大省，特別是西部太行山區，是生態環境的凈土，有著豐富的特色農副產品資源。其中贊皇是中國大棗之鄉，贊皇大棗是目前棗中唯一發現的三倍體品種。贊皇大棗產品主要有干制紅棗、鮮食棗和加工品，其中蜜棗為最主要的加工品。目前，市場上蜜棗的加工多處于資源型、初級型、低端型的狀況，產品單一，市場競爭力差。這個現象的背后，有著巨大的商機，那就是把贊皇大棗通過深加工，生產保健營養食品，一方面滿足現代人追求高質量生活的需求，另一方面使山區農副產品的價值得以最大化的利用，造福山區群眾。

本課題組依據中醫藥理論組方，由大棗、山藥、龍眼肉、薏苡仁、蓮子、黃精、百合等多味藥食兩用中藥為原料，結合現代綠色食品加工技術制得新型功能性保健蜜棗。本研究主要通過觀察新型功能性蜜棗對失血性貧血模型小鼠的影響，探討其補血養血作用，為開發新型功能性保健食品提供依據。

實驗結果表明，灌服了功能性蜜棗的高、低劑量組小鼠的狀態均較造模后有明顯改善，且未出現死亡情況。高劑量功能性蜜棗能明顯升高失血性貧血模型小鼠的紅細胞數、血紅蛋白含量及紅細胞壓積，低劑量組小鼠的紅細胞數、血紅蛋白含量及紅細胞壓積也有升高趨勢，提示功能性蜜棗具有較好的補血養血作用。

脾臟、胸腺均為人體重要的免疫器官，且脾臟具有一定的造血功能。因此，通過免疫器官重量的改變可間接評價機體造血及免疫功能的高低[4]。實驗結果顯示，與模型組小鼠相比，功能性蜜棗高劑量小鼠的脾重、脾指數、胸腺重及胸腺指數均顯著升高，低劑量小鼠的脾重、脾指數、胸腺重及胸腺指數也有升高趨勢，提示功能性蜜棗對小鼠的造血機能有一定的促進作用，還可提高免疫機能而起到強身健體的作用。

參考文獻：

[1]楊麗，黃曉巍，張永和.鹿皮膠對失血性血虛動物模型的影響[J].吉林中醫藥，2008，28(11)：841~842.

[2]秦林，劉更生，宋月芹.試論四物湯血虛癥與貧血癥的關系[J].中國中醫基礎雜志，2004，10（2）；48～52.

[3]王建青.血虛證與貧血的關系研究[J].中國中醫藥信息雜志，1997，4（12）：24～25.

[4]何曉燕，李真貞.白芍對血虛小鼠補血作用的研究[J].時珍國醫國藥，2009，20(4)：999~1000.