我國(guó)葡萄主栽區(qū)卷葉病相關(guān)病毒種類的檢測(cè)分析

摘要：田間調(diào)查200個(gè)葡萄品種，結(jié)果82個(gè)品種表現(xiàn)葡萄卷葉病癥狀，其中歐亞種群表現(xiàn)葡萄卷葉病癥狀的品種最多，發(fā)病率最高，發(fā)病癥狀最重；歐美雜種發(fā)病率和嚴(yán)重度均比歐亞種群低；未發(fā)現(xiàn)美洲種群的品種表現(xiàn)葡萄卷葉病癥狀。從58株表現(xiàn)卷葉病的葡萄上采集休眠枝條進(jìn)行卷葉病毒ELISA和RT—PcR檢測(cè)，葡萄卷葉病毒-1，2，3，4，5和7(GLRaV-1，2，3，4，5和7)等6種葡萄卷葉病毒的檢出率分別為20.7％，17.2％，621％，3.4％，5.2％和15.5％。回收PCR產(chǎn)物進(jìn)行克隆和序列分析，并將測(cè)序結(jié)果提交至GeneBank。以葡萄卷葉病毒且HSP70基因序列構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹分析其進(jìn)化關(guān)系，GLRaV-1、3和7，GLRav-2、4和5分別聚為2大類，其中GLRaV-1和3，GLRaV-4和5在各自的聚類中關(guān)系更近。

關(guān)鍵詞：葡萄卷葉病毒；田間調(diào)查；ELISA；RT—PCR；進(jìn)化樹

中圖分類號(hào)：S663.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009—9980(2011)03—463—06

葡萄卷葉病(Grapevine leafroll di’sease，GLD)是分布最廣泛。危害最為嚴(yán)重的葡萄病毒病之一。葡萄一旦感病，便終生帶毒，持久危害，難以用化學(xué)藥劑防治。染病葡萄樹勢(shì)衰退，嫁接成活率和扦插生根率降低，果實(shí)成熟期推遲，果穗著色不良，含糖量降低，發(fā)病嚴(yán)重的葡萄園，產(chǎn)量損失超過45％。迄今為止，全世界已報(bào)道了11種血清學(xué)不相關(guān)的葡萄卷葉病毒，分別命名為GLRaV-1，2，3，4，5，6，7，8，9，Pr和De，分類上屬于長(zhǎng)線病毒科(Closteroviridoe)，上述病毒單獨(dú)或復(fù)合侵染都能引起葡萄卷葉病的發(fā)生。目前國(guó)內(nèi)對(duì)GLRaVs的研究主要集中在對(duì)GLRaV-3的檢測(cè)技術(shù)，基因克隆和表達(dá)的研究，而對(duì)于我國(guó)葡萄卷葉病原的分析研究比較少。

在生產(chǎn)中，葡萄葉片的癥狀表現(xiàn)是田間識(shí)別葡萄卷葉病的重要依據(jù)，具有較高的診斷價(jià)值，我們通過田間調(diào)查和采樣，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室ELISA和RT-PCR檢測(cè)，對(duì)我國(guó)葡萄卷葉病毒的種類以及葡萄品種的耐病性做了調(diào)查分析。……