鹽酸雙苯氟嗪單層芯滲透泵控釋片的研制

李 立，白 靖，曹德英（河北醫科大學藥學院，石家莊市 050017）

鹽酸雙苯氟嗪（Dipfluzine hydrochloride，DH）是由第Ⅲ類鈣拮抗劑桂利嗪和中樞多巴胺受體阻斷劑氟哌啶合成而來，是河北醫科大學自主研發合成的新一代哌嗪類鈣離子拮抗劑。化學名稱為 4[4-（二苯甲基）-1-哌嗪基]-1-（4-氟苯基）-1-丁酮。DH為淺黃色或白色細小針狀結晶或粉末，幾乎無臭，溶于水，溶于沸乙醇、丙酮，熔點：135.5～136.0℃。

以往的研究[1]表明，雙苯氟嗪能選擇性地擴張椎基底動脈、基底動脈和冠狀動脈，不但對腦水腫有保護作用，對局灶性腦缺血和全腦缺血再灌注損傷也均具有保護作用，其擴張腦血管能力強于以往的腦血管用藥，是治療缺血性腦血管疾病獨具開發潛力和應用前景的新型藥物。但其毒代動力學研究[2]表明，大劑量可產生肺充血等急性毒性。為了降低藥物不良反應發生率，避免藥物峰-谷現象，提高患者用藥的順應性，設計將DH制成日服2次的滲透泵控釋制劑。由于目前DH尚無上市制劑，故參照其同系物氟桂利嗪規格每片5 mg，成人1次口服量為5～10 mg，每日15～30 mg，分3次服用的臨床用藥特點，將其制成每片15 mg的滲透泵控釋片。滲透泵制劑能夠不受外界滲透壓、pH值的影響在一定時間內以恒定的速率釋放藥物。因此將DH制成滲透泵控釋制劑，具有一定的實際意義，更加符合臨床用藥安全的需求。本研究將DH制成12 h控釋的單層芯滲透泵片，并考察了其中藥物的釋放機制及各因素對藥物體外釋放度的影響，結果表明DH單層芯滲透泵控釋片工藝穩定，符合控釋片要求。

1 儀器與試藥

DU640型紫外分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；TDP型單沖式壓片機（北京國藥龍立科技有限公司）；BY300A型小型包衣機（上海黃海藥檢儀器廠）；ZRS-8G智能溶出儀（天津大學無線電廠）。

DH（原料藥及對照品，批號：20090113，純度：99.6%）、DH單層芯滲透泵控釋片（規格：每片15 mg）均系自制；乳糖（德國美劑樂集團）；甘露醇（石家莊市興華醫藥化工廠）；水為蒸餾水。

2 方法與結果

2.1 DH單層芯滲透泵控釋片的制備

2.1.1 片芯的處方及制備。①處方組成：DH、乳糖、甘露醇、酒石酸、丁二酸。②制備：稱取處方量的DH、滲透活性物質（乳糖、甘露醇）、助溶劑（酒石酸、丁二酸）過80目篩，以等量遞加法混合均勻，用3%羥丙基甲基纖維素（HPMC）的20%乙醇溶液制軟材，過18目篩制粒，50℃干燥12 h，干顆粒以18目篩整粒，加入硬脂酸鎂混合均勻后用8 mm深凹沖壓得片芯。

2.1.2 包衣液處方及操作。①處方組成：醋酸纖維素（CA）、聚乙二醇（PEG）6000、丙酮。②操作。取致孔劑PEG6000與CA按處方比例溶于丙酮中，50 mL恒溫過夜，將“2.1.1”項下制得的片芯置于包衣鍋中，包衣增重為3%，包衣后50℃干燥12 h，即得。③包衣工藝：采用小型包衣鍋（直徑20 cm），包衣鍋內溫度為35～40℃，包衣鍋轉速為35 r·min－1，霧化壓力為0.2 kg·cm－2，包衣鍋傾斜角為45°，噴霧速度為2 mL·min－1。

2.2 體外釋放度的測定

2.2.1 輔料干擾試驗。稱取處方量各輔料置于100 mL容量瓶中，加入一定量水，超聲溶解后定容，用0.45 μm微孔濾膜過濾，取續濾液進行適當稀釋即得；同法制備DH溶液（與輔料稀釋相同倍數）。于200～400 nm波長范圍內對2種溶液進行掃描。結果，DH最大吸收波長為227、248 nm，由于輔料在227 nm波長處有吸收，而在248 nm波長處幾乎無吸收，故將248 nm定為DH的紫外測定波長。掃描光譜見圖1。

圖1 紫外掃描光譜A.DH；B.輔料Fig 1 UV scanning spectrum A.dipfluzine hydrochloride；B.excipients

2.2.2 標準曲線的制備及方法回收率和精密度考察[3]。精密稱取干燥至恒重的DH 20 mg置于100 mL容量瓶中，加入適量水，超聲使溶解，稀釋至刻度，搖勻。分別吸取1、2、3、4、5、6、7 mL置于50 mL容量瓶中以水稀釋至刻度，搖勻，作為系列標準溶液。以水為空白對照，在248 nm波長處分別測定吸光度（A），以A對濃度（c）進行線性回歸，得回歸方程為A＝26.74c－0.002 3（r＝0.999 6，n＝3），表明DH檢測濃度線性范圍為4～28 μg·mL－1。制備高、中、低3個濃度的DH溶液，同比例加入相應的輔料。按回收率和精密度試驗相關方法進行操作，計算得平均回收率為98.93%（RSD＝0.37%，n＝6）；日內RSD＝0.36%，日間RSD＝0.48%（n＝5）。

2.2.3 釋放度測定方法。依照《中國藥典》2010版二部附錄ⅩC釋放度測定法第二法裝置[4]，以500 mL水為釋放介質，轉速50 r·min－1，釋放介質溫度為（37.5±0.5）℃，分別于1、2、4、6、8、10、12 h取液5 mL（同時補充等體積同溫釋放介質），0.45 μm微孔濾膜過濾，取續濾液作為供試溶液，在248 nm波長處測定吸光度，計算不同時間點累積釋藥百分率。

2.2.4 藥物釋放曲線擬合-相似因子法[5]。緩控釋制劑釋放曲線的比較，可以反映同一制劑處方設計、制備、包衣工藝以及釋放條件等因素對制劑釋藥行為的影響差異。本研究采用美國食品與藥物管理局推薦使用的相似因子（f2）法，計算公式如下：

式中，Rt和Tt分別是2種處方制劑在相同釋放條件下或同一處方制劑在不同釋放條件下于t時間的釋放度；n是取樣點的總數；wt是根據實際需要選擇的權重系數（本試驗wt＝1）。f2的計算結果不大于100。當2條曲線完全吻合時f2值為100；當2條曲線差異增大時，f2值減小。本試驗規定其值在60～100之間時可以認為2種處方制劑在同一釋藥條件下或同一制劑在不同釋藥條件中釋藥行為無差別。

2.3 影響釋藥因素的考察及處方確定

在進行影響因素考察前首先進行了大量的單因素試驗，其中包括片芯中助溶劑種類和用量的選擇、包衣膜中致孔劑的種類和用量、包衣增重。考察的助溶劑種類包括：檸檬酸、富馬酸、酒石酸、丁二酸，其中檸檬酸在壓片過程中易導致黏沖，富馬酸在藥物吸收波長處有干擾吸收，故選擇酒石酸和丁二酸作為助溶劑并考察其對釋藥的影響；致孔劑的種類包括PEG400、PEG1000、PEG6000，由于PEG6000分子量較大，與CA混合有一定的增塑劑的作用，降低了CA膜的脆性，故選擇PEG6000作為致孔劑并考察其用量對釋藥的影響；單因素試驗中考察了不同包衣增重對藥物釋放的影響，發現其對藥物釋放有顯著影響，故將其作為影響因素進行考察。

綜上，影響藥物釋放的主要因素包括：片芯中助溶劑的種類、致孔劑用量、包衣增重，以下分別考察各因素對藥物釋放的影響。

2.3.1 片芯中助溶劑的種類。由于DH在酸性條件下溶解度較大，并且處方前研究發現其受氯離子的同離子效應影響，在氯離子存在的條件下溶解度降低，故本試驗采用酒石酸和丁二酸（酒石酸-丁二酸＝65∶130）作為藥物的助溶劑填加于藥物的片芯中，固定助溶劑的用量（185 mg）為片芯重量（300 mg）的61.7%，考察2種小分子有機酸對藥物釋放的影響，結果見圖2。

圖2 助溶劑種類對藥物釋放的影響Fig 2 The influence of different adjuvants on drug release profile

由圖2可以看出，單獨使用丁二酸時藥物釋放速度平穩，將釋放曲線進行零級擬合發現其零級特征明顯，但釋藥不完全，12 h的累積釋藥百分率僅為60%；另發現藥物釋放情況與丁二酸在片芯中的用量比例無關。單獨使用酒石酸時藥物在12 h的累積釋藥百分率可達90%以上，將釋藥曲線進行零級釋藥模型擬合發現其零級釋藥特征不如酒石酸和丁二酸的混合物明顯。二者聯用后藥物釋放曲線較為理想，故選用二者混合物作為DH的助溶劑添加于片芯中。

采用相似因子法，對3條釋藥曲線進行兩兩擬合，f2值均小于60，說明助溶劑的種類對藥物釋放有顯著影響。

2.3.2 致孔劑用量。本試驗采用PEG6000為致孔劑，水溶性的PEG6000遇體內消化液即溶解，使得包衣膜上出現微孔以達到釋放藥物的目的。固定片芯處方以及包衣液處方，使PEG6000的量分別占CA質量的5%、10%、15%，考察PEG6000的用量對藥物釋放的影響，結果見圖3。

圖3 PEG 6000用量對藥物釋放的影響Fig 3 The influence of PEG 6000 amount on drug release

圖3結果表明，隨著致孔劑用量的增加，藥物釋放速度加快，當包衣膜中致孔劑用量為5%時，藥物釋放緩慢，且不完全；當致孔劑用量為15%時，藥物釋放過快，10 h已釋放100%；當包衣膜中致孔劑的用量為10%時，將釋藥曲線進行釋藥模型擬合，發現藥物釋放接近零級釋放。

3條釋藥曲線進行兩兩擬合后f2均小于60，說明PEG6000的含量對藥物釋放有顯著影響。

2.3.3 包衣增重對藥物釋放的影響。包衣膜的厚度以片芯增重的百分比來衡量，固定片芯處方以及包衣液處方保持不變，使包衣增重分別為2%、3%、4%，考察包衣增重對藥物釋放的影響，結果見圖4。

圖4 包衣增重對藥物釋放的影響Fig 4 The influence of membrane weight on drug release

圖4結果表明，當包衣增重增大時，藥物釋放速度減慢，說明可以通過調節包衣膜厚度調節藥物釋放速率，最終確定包衣增重為3%。

通過3條釋藥曲線兩兩比較可知，3條釋藥曲線差異較大，f2值均小于60，表明包衣增重對藥物釋放有顯著影響。

2.3.4 處方的確定及驗證。綜合上述試驗及前期試驗結果確定片芯的處方：DH 15 mg，乳糖50 mg，甘露醇50 mg，酒石酸65 mg，丁二酸130 mg。包衣液處方：CA 3 g，PEG6000 0.3 g，丙酮100 mL。

對上述處方進行最佳處方驗證，按優化后的處方所制片劑在1～12 h內釋藥速率基本恒定，對釋藥曲線進行零級釋藥模型擬合，其r＝0.996 3，呈現良好的零級釋放特征。

2.3.5 不同釋放介質對藥物釋放的影響。滲透泵片主要是依賴包衣膜內外的滲透壓差實現藥物釋放的，不受外界環境的影響，本試驗考察了滲透泵片在3種不同釋放介質（pH1.2鹽酸溶液、pH6.8磷酸鹽緩沖液及水）中的釋放行為。結果表明藥物在3種介質中的釋放行為基本一致，3條曲線f2值均大于60，表明藥物的釋放不受外界環境的影響，詳見圖5。

2.4 藥物釋放機制的考察

圖5 不同釋放介質對藥物釋放的影響Fig 5 The influence of different medium on drug release

制備單層芯滲透泵控釋片時在其包衣液中加入水溶性致孔劑的目的是使制劑在胃腸道內遇水溶解形成微孔，使藥物通過微孔得以釋放。通過下面的試驗驗證藥物是否通過此途徑釋放。

分別制備2種滲透泵片，一種為包衣膜中含處方量致孔劑PEG6000，測定藥物的累積釋藥百分率及片芯內部的滲透壓值；另一種不含致孔劑，測定其累積釋藥百分率。分別考察2種片劑的釋藥情況。結果，含致孔劑的片劑在2、4、6、8、10、12 h時的滲透壓值分別為 1.496、1.411、1.297、1.277、1.207、0.925 Osm，釋藥曲線見圖6。

圖6 致孔劑的加入對藥物釋放的影響Fig 6 The influence of porosity-making agent on drug release

由圖6可知，包衣膜中不含致孔劑的控釋片在4 h內沒有釋放，在4 h后由于片芯內部滲透壓過大使得包衣膜破裂，藥物很快釋放出來；而包衣膜中含有致孔劑的滲透泵片藥物釋放速度恒定，且在藥物釋放過程中，片芯內部的滲透壓值變化不大，能保持滲透壓差，從而實現藥物的釋放呈現零級釋藥特征。通過以上對比說明本滲透泵片中藥物的釋放是通過致孔劑遇水后溶解在包衣膜上形成小孔，使藥物通過微孔得以釋放。

依照最佳處方制備DH單層芯滲透泵控釋片3批，進行釋放度測定，對所得釋放曲線進行零級、一級和Higuchi方程模型擬合，結果藥物釋放行為最符合零級方程（r＝0.995 2），詳見表1（表中Y為累積釋藥百分率，t為時間）。

表1 體外釋放模型擬合結果Tab 1 Fitting of drug release model in vitro

3 討論

（1）制備微孔滲透泵片時首先要考慮的是藥物的溶解度問題，所以在藥物的處方前研究階段，首先測定了DH在不同介質中的溶解度，發現其雖在酸性條件下溶解度增加，但在鹽酸溶液中的溶解度比在水中相對低，說明同離子效應使得其溶解度降低了。故考慮在片芯中加入小分子有機酸，以提高其溶解度并避免氯離子抑制效應。本試驗采用了酒石酸-丁二，、酸共同作為助溶劑。由于滲透泵片中藥物的釋放是依賴滲透壓差實現的，所以片芯中還應加入一定量的滲透活性物質，本試驗采用乳糖-甘露醇作為滲透活性物質。

（2）CA常用作滲透泵片的包衣材料，因其具有半透膜性質，只能允許水通過，而藥物分子不能通過，包衣材料中加入水溶性致孔劑，遇水溶解形成微孔，可使藥物分子通過這些微孔得以釋放。

（3）滲透泵控釋片中藥物的釋放是依賴包衣膜內外的滲透壓差決定的，所以能夠在一定時間內以恒速釋放藥物，本試驗制備的滲透泵控釋片釋藥速度恒定，在pH6.8磷酸鹽緩沖液、pH1.2鹽酸溶液、水3種不同溶出介質中藥物釋放行為無明顯差別。

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