鹽酸左西替利嗪搽劑的止癢抗過敏作用與局部皮膚組織分布特點研究

馮 芹，商慶節，孫敬俠，張 峰，羅漣榮，姚景春

(魯南制藥集團新藥藥理中心，山東臨沂 273400)

組胺是最常見的瘙癢介質，主要存在于肥大細胞內的異染性顆粒中，皮膚的角質形成細胞中也有組胺存在［1］。鹽酸左旋西替利嗪是西替利嗪的左旋體，是較新的第二代H1受體拮抗劑。體外實驗研究表明它可抑制嗜酸粒細胞游走［2］，可與人H1受體選擇性的高親和力結合［3］，有較好的組胺拮抗作用，還可以抑制變態反應相關的多種炎癥介質的釋放，同時具有較廣泛的抗炎作用。有研究證實西替利嗪可能通過阻斷真皮成纖維細胞上的H1受體抑制中性粒細胞和單核細胞的趨化而發揮抗皮膚過敏炎癥作用［4］。目前鹽酸左旋西替利嗪均為口服制劑，尚無外用制劑，我們將其制成外用搽劑，在動物模型上研究了止癢、抗過敏作用，研究體內吸收及分布情況，并與口服給藥進行對比。

1 材料

1.1動物Hartley豚鼠，體質量250～300 g，購自無錫市惠山江南實驗動物場，合格證號:2018933。SD大鼠，體質量150～200 g;ICR小鼠，體質量18～22 g，均由山東新時代藥業實驗動物中心提供，動物合格證號:0008036。

1.2試劑鹽酸左西替利嗪搽劑(由魯南貝特制藥有限公司制劑實驗室提供，批號:090401)，磷酸組胺(阿拉丁試劑有限公司批號:29194)，伊文思藍(國藥集團化學試劑有限公司，批號:20091209)。

1.3儀器UV-2000型紫外分光光度計(上海尤尼科儀器有限公司)，LC-10ATVP高效液相色譜儀(日本島津公司)。

2 方法

2.1對磷酸組胺所致的豚鼠瘙癢模型的影響白色Hartley豚鼠(♀♂各半)，按性別、體質量隨機分為4組:基質組、鹽酸左旋西替利嗪搽劑3個濃度組(0.625、2.5、10 g·L－1)(n=8)，各搽劑組在致癢前30 min涂抹鹽酸左西替利嗪搽劑，基質對照組抹基質，涂藥面積約1 cm2，劑量約為0.3 ml·cm－2，口服給藥組灌胃給予鹽酸左西替利嗪水溶液(10 mg·kg－1)。具體實驗方法參照文獻［5］。

2.2對大鼠同種被動皮膚過敏反應(PCA)模型的影響SD大鼠，分組同“2.1”(n=10)，致敏范圍約4 cm2，各組于攻擊前30 min在致敏部位涂抹相應搽劑，給藥量約為0.05 ml·cm－2。具體實驗方法參照文獻［6］。

2.3對組胺致小鼠皮膚血管擴張作用的影響ICR小鼠，分組同“2.1”(n=10)，各組小鼠腹部皮膚剪毛，范圍約4 cm2，涂抹相應搽劑，給藥量約為0.01 ml·cm－2，口服給藥組灌胃給予鹽酸左西替利嗪水溶液(20 mg·kg－1)，具體實驗方法參照文獻［6］。

2.4兩種給藥途徑在大鼠體內的血藥濃度SD大鼠，按性別、體質量隨機分為兩組:鹽酸左西替利嗪搽劑組和口服鹽酸左西替利嗪溶液組(n=6)。搽劑組背部皮膚剪毛，范圍約4 cm2，涂抹 10 g·L－1的搽劑，給藥量約為 0.05 ml·cm－2，口服給藥劑量為 20 mg·kg－1，于給藥后 0.2、0.4、0.6、0.9、1.2、1.5、2、3、4、6 h 分別于大鼠眼靜脈叢采血 0.4 ml，HPLC測定血漿中左西替利嗪濃度。

2.5兩種給藥途徑大鼠皮膚的組織分布SD大鼠，按性別、體質量隨機分為兩組為:鹽酸左西替利嗪搽劑和口服給藥組(n=20)，給藥方式、劑量同“2.4”，兩組大鼠給藥后0.2、0.6、2、4 h分別隨機脫頸椎處死5只大鼠，HPLC法測定皮膚組織勻漿中左西替利嗪含量。

2.6統計學分析實驗結果以±s表示。實驗數據用SPSS11.5進行統計學分析，采用one-way ANOVA檢驗。

3 結果

3.1對磷酸組胺所致的豚鼠瘙癢模型的影響鹽酸左西替利嗪搽劑低、中、高3個濃度組致癢閾為(354.38±192.03)、(690.00±207.02)、(827.50±229.52)μg與基質組(27.50±19.64)μg相比均提高(P＜0.01)，高濃度鹽酸左旋西替利嗪搽劑組致癢閾高于口服鹽酸左西替利嗪組(490.00±151.18)μg(P＜0.01)。

3.2對大鼠同種被動皮膚過敏反應(PCA)模型的影響鹽酸左西替利嗪搽劑低、中、高3個濃度組吸光度為(0.081±0.041)、(0.052±0.025)、(0.036±0.015)，低于基質組(0.120±0.101)，抑制率分別為32.5%、53.4%和70.3%，中、高濃度與基質組相比差異具有顯著性(P＜0.05，P＜0.01)。

3.3對組胺致小鼠皮膚血管擴張作用的影響鹽酸左西替利嗪搽劑低、中、高3個濃度組藍染面積為(29.04±6.22)、(12.95±3.41)、(7.85±5.57)mm2，與基質組(125.21±17.40)mm2相比減少(P＜0.01)，抑制率分別為76.80%、89.66%和93.73%，高濃度組與口服組(23.12±7.68)mm2比藍染面積減少(P＜0.01);低、中、高3個濃度組吸光度分別為(0.127±0.031)、(0.089±0.027)、(0.079±0.025)，與基質組(0.457±0.127)相比降低(P＜0.01)，抑制率為72.16%、80.54%、82.73%，高濃度組與口服組(0.131±0.018)相比，吸光度降低(P＜0.01)。

3.4兩種給藥途徑在大鼠體內的血藥濃度用DAS2.1.1藥代數據處理軟件，計算大鼠口服鹽酸左西替利嗪和大鼠皮膚涂抹鹽酸左西替利嗪搽劑后的藥代動力學參數，采用非房室模型計算獲得的各只大鼠的藥代參數。給予鹽酸左西替利嗪搽劑時其主要藥動學參數為:Tmax=(0.9±0.19)h;Cmax=(1.307±0.161)mg·L－1=(1.749±0.287)h;AUC0-t=(2.505±0.189)mg·h·L－1;AUC0-∞=(2.776 ±0.151)mg·h·L－1;MRT0-∞=(2.598 ±0.290)h?？诜o予鹽酸左西替利嗪溶液時其主要藥動學參數為:Tmax=(0.667±0.197)h;Cmax=(12.915±2.128)mg·L－1;=(1.231±0.337)h;AUC0-t=(26.172 ±5.075)mg·h·L－1;AUC0-∞=(27.474 ±6.037)mg·h·L－1;MRT0-∞=(2.126 ±0.336)h。

3.5兩種給藥途徑在大鼠皮膚的組織分布大鼠皮膚涂抹鹽酸左西替利嗪搽劑后0.2、0.6、2、4h其組織分布分別為(19.796±3.508)、(24.512±4.442)、(32.497±3.747)、(28.503±3.139)μg·g－1。大鼠口服鹽酸左西替利嗪后其0.2、0.6、2、4 h其組織分布分別為(1.107 ±0.272)、(1.797±0.303)、(0.709 ±0.036)、(0.393 ±0.078)μg·g－1。

4 討論

研究結果顯示鹽酸左西替利嗪搽劑可以明顯提高磷酸組胺致豚鼠瘙癢閾值，對磷酸組胺所致的豚鼠瘙癢模型有明顯的抑制作用，對卵白蛋白聯合百日咳所致的大鼠被動皮膚過敏反應有明顯的抑制作用，對組胺致小鼠皮膚血管擴張具有明顯的抑制作用，而且外用搽劑效果優于口服給藥。

對口服和外用搽劑大鼠血藥濃度和皮膚組織分布進行研究后發現，外用鹽酸左西替利嗪搽劑的血藥濃度遠遠低于口服給藥，而皮膚組織濃度則遠遠大于口服給藥后的皮膚組織濃度，外用搽劑較低的血藥濃度能減少不良反應，而在皮膚組織的高濃度的分布能增加左西替利嗪在皮膚中的作用強度，提高對局部過敏性皮膚病的治療效果。

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