藏藥川西千里光中黃酮類成分的分離和結構鑒定

楊愛梅， 李笑顏， 李玉蘭， 楊中鐸， 楊明俊

(蘭州理工大學生命科學與工程學院，甘肅蘭州 730050)

藏藥川西千里光系菊科千里光屬植物，多年生草本，產西藏(拉薩、朗縣、米林、波密、八宿、松宗、則當、隆子)、四川西南部(巴塘、道孚、茂縣)、云南(德欽)。生于海拔2 900-3 900 m開曠陽坡。藏藥名葉格興，具有清熱解毒治瘡、接骨，清肝膽諸熱等功效，花序或全草入藥，主治傷口發炎、腫脹、急性結膜炎、皮炎、瘡癤、跌打損傷等癥［1-2］。本實驗對川西千里光的化學成分首次進行了研究，經過反復硅膠柱色譜及聚酰胺柱色譜分離，獲得3個黃酮苷類化合物，經波譜方法鑒定，確定其結構分別為:5，7，4’-三羥基-黃酮-3-O-β-D-葡萄糖苷(山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷)(I)，5，7，3’，4’-四羥基-黃酮-3-O-β-D-葡萄糖苷(槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷)(II)，5，7，3’，4’-四羥基-黃酮-3-O-β-D-葡萄糖基-(6→1)-O-鼠李糖苷(蘆丁)(III)。

1 儀器與材料

XT-4數顯微熔點儀;Nicolet Avatar 360 FT-IR型紅外光譜儀;Varian INOVA-400MHz核磁共振儀;Bruker ZAB-HS型質譜儀;柱層析硅膠(200～300目)、薄層層析硅膠(GF254)均為青島海洋化工廠產品。大孔吸附樹脂(型號AB-8)為天津歐瑞生物科技有限公司產品;聚酰胺粉(100～200目)為臺州市路橋四甲生化塑料廠產品。藏藥川西千里光購自青海塔爾寺藏醫院，植物標本由蘭州大學生命科學院張國梁教授鑒定為Senecio solidagineusHand.-Mazz.，標本(2006-02)保存于蘭州理工大學生命科學與工程學院天然藥物研究室。

2 提取與分離

川西千里光(3.6 kg)，粉碎，用95%乙醇室溫提取3次，減壓濃縮 ，得乙醇浸膏350 g;乙醇浸膏加熱水分散，用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進行萃取，得到石油醚浸膏114 g，乙酸乙酯浸膏30 g，正丁醇浸膏60 g。正丁醇浸膏用大孔吸附樹脂(型號AB-8，800 g)除糖，分別用水和95%乙醇洗脫，得除糖后浸膏28 g，進行硅膠(200～300目，500 g)柱色譜分離，濕法上柱，氯仿-甲醇梯度洗脫，得到多個部分(Fr.1～Fr.3)。Fr.1部分 (1.36 g)，200～300目硅膠(40 g)柱層析，氯仿-甲醇 (10∶1)洗脫，重復3次，析出黃色圓球狀固體0.23 g，為化合物I的粗品，再上聚酰胺(2 g)柱層析，水-甲醇(1∶1)洗脫，得黃色球狀固體I(80 mg);Fr.2部分 (2 g)，硅膠(60 g)柱層析，氯仿-甲醇(10∶1)洗脫，得化合物II粗品0.6 g，再上聚酰胺(4 g)柱層析，水-甲醇(1∶1)洗脫，得黃色無定形粉末II(mg)(380 mg);Fr.3部分(2.7 g)，硅膠(80 g)柱層析，氯仿-甲醇(5∶1)洗脫，得化合物III粗品，經甲醇反復重結晶，析出黃色粉末狀固體III(585 mg)。3 結構鑒定

化合物I:黃色球狀固體，FABMSmle:447［M-H］+，TLC在5%H2SO4-乙醇中加熱顯黃色，初步推測該化合物為黃酮類化合物?；衔颕的氫譜(1H-NMR，400 MHz，DMSO-d6)δ:8.0(2H，d，J=8.8，H-2’6’)，6.86(2H，d，J=8.8，H-3’，5’)，6.17(1H，brs，H-6)，6.44(1H，brs，H-8)，5.45(1H，d，J=7.2，H-1”);碳譜(13C-NMR，100 MHz，DMSO-d6):156.2(C-2)，133.1(C-3)，177.4(C-4)，161.2(C-5)，98.8(C-6)，161.2(C-7)，93.6(C-8)，156.5(C-9)，103.8(C-10)，121.0(C-1’)，130.9(C-2’，6’)，115.1(C-3’，5’)，160.4(C-4’)，葡萄糖苷:101.4(C-1”)，74.2(C-2”)，76.4(C-3”)，70.0(C-4”)，77.5(C-5”)，60.8(C-6”)，以上數據與文獻［3，4，5］對照，確定化合物 I為 5，7，4’-三羥基-黃酮-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物II:黃色粉末，分子式C21H20O12，不飽和度12。FABMSmle:463［M-H］+，TLC 在5%H2SO4-乙醇中加熱顯黃色，初步推測該化合物為黃酮類化合物。化合物II的氫譜(1H-NMR，400 MHz，DMSO-d6)δ:7.63(1H，d，J=1.6，H-2’)，7.50(1H，dd，J=1.6，8.0，H-6’)，6.81(1H，d，J=8.4，H-5’)，6.17(1H，brs，H-6)，6.37(1H，brs，H-8)，5.45(1H，d，J=6.8，H-1”);碳譜信號如下:(13C-NMR，100 MHz，DMSO-d6):156.2(C-2)，133.3(C-3)，177.4(C-4)，161.3(C-5)，98.7(C-6)，164.3(C-7)，93.5(C-8)，156.4(C-9)，104.0(C-10)，121.6(C-1’)，116.0(C-2’)，144.8(C-3’)，148.5(C-4’)，115.2(C-5’)，121.2(C-6’)，葡萄糖苷:101.0(C-1”)，74.1(C-2”)，76.5(C-3”)，70.0(C-4”)，77.5(C-5”)，60.2(C-6”)，以上數據與文獻［3］839，［7］對照，確定化合物 II為 5，7，3’，4’-四羥基-黃酮-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物III:黃色粉末，mp:176℃ ～178℃;分子式C27H30O16，不飽和度13。TLC在5%H2SO4-乙醇中加熱顯黃色，初步推測該化合物為黃酮類化合物。化合物III的氫譜(1H-NMR，400 MHz，DMSO-d6)δ:7.52(1H，brs，H-2’)，7.50(1H，d，J=7.6，H-6’)，6.80(1H，d，J=8.0，H-5’)，6.16(1H，brs，H-6)，6.35(1H，brs，H-8)，5.31(1H，d，J=6.0，H-1?，Rha)，4.36(1H，d，J=7.2，H-1”，Glu)，1.01(3H，d，H-6?);碳譜(13C-NMR，100 MHz，DMSO-d6)δ:156.4(C-2)，133.3(C-3)，177.4(C-4)，161.2(C-5)，98.7(C-6)，164.0(C-7)，93.6(C-8)，156.6(C-9)，104.0(C-10)，121.2(C-1’)，115.2(C-2’)，144.7(C-3’)，148.4(C-4’)，116.2(C-5’)，121.6(C-6’)，葡萄糖:101.2(C-1”)，74.1(C-2”)，76.4(C-3”)，70.4(C-4”)，76.0(C-5”)，67.0(C-6”)，鼠李糖:100.8(C-1?)，70.4(C-2?)，70.6(C-3?)，71.9(C-4?)，68.2(C-5?)，17.7(C-6?)以上數據與文獻［7］對照，確定化合物 III為 5，7，3’，4’-四羥基-黃酮-3-O-β-D-葡萄糖基-(6→1)-O-鼠李糖苷(蘆丁)。

［1］中國植物志編委會.中國植物志［M］.七十六卷.北京:科學出版社，1979:55.

［2］中國科學院西北高原生物研究所.藏藥志［M］.西寧:青海人民出版社，1991:322.

［3］于德泉，楊俊山主編.分析化學手冊［M］.第七分冊.北京:化學工業出版社，1999:301.

［4］Ulubelen A，Kerr K M，Mabry T J，New 6-hydroxyflavonoids and their methyl ethers and glycosides from Neurolaena oaxacana［J］.Phytochemistry，1980，19(8):19:1761-1766.

［5］Markham K R，Ternai B，Stanley R，et al.Carbon-13 NMR studies of flavonoids-III:Naturally occurring flavonoid glycosides and their acylated derivatives［J］.Tetrahedron，1978，34(9):1389-1397.

［6］于德泉，楊俊山主編.分析化學手冊［M］.第七分冊.北京:化學工業出版社，1999:839.

［7］Wang K J，Yang C R，Zhang Y J，Phenolic antioxidants fromChinese toon(fresh young leaves and shoots ofToona sinensis)［J］.Food Chemistry，2007，101(1):365-371.