草莓上一種新病害——草莓角斑病

劉天鴻 楊萬風

草莓角斑病（Angular leaf spot of strawberry）是草莓生產上的主要病害，其病原菌為黃單孢桿菌屬草莓黃單孢菌，屬細菌草莓角斑病菌。1962年首次報道于北美洲，草莓角斑病會引起產量下降，但一般不是毀滅性的。已有該病害發生的國家包括：歐洲的法國、希臘、意大利、葡萄牙、羅馬尼亞、西班牙；非洲的留尼汪；美洲的美國、阿根廷、巴西、委內瑞拉；大洋洲的澳大利亞和新西蘭。我國將該病菌列入檢疫性有害生物名單，在歐洲及地中海植物保護組織（EPPO）為A2類檢疫性有害生物。該病可隨著草莓繁殖材料的引進而迅速傳播，因此，必須采取嚴格的檢疫措施，防止該病菌通過貿易傳入我國。

1 分類地位

草莓角斑病菌屬于原核生物界（Procaryote），薄壁細菌門（Gracilicutes），暗細菌綱（Scotobacteria），假單胞桿菌科（Pseudomonadaceae），黃單胞桿菌屬（Xanthomonas）。

2 寄主

廣泛種植的草莓（Fragaria ananassa）是該病原菌的主要寄主。Fragaria ananassa是智利草莓（F.chiloensis）和深紅莓（F.virginiana）的雜交種，病原菌對草莓屬的其他品種的致病性變化較大。人工接種情況下，弗州草莓（F.virginiana）、野草莓（F.vesca）、金露梅（Potentilla fruticosa）和委陵菜（P.glandulosa）均可被草莓角斑病菌侵染。草莓屬（Fragaria）植物中僅麝香草莓（F.moschata）對草莓角斑病菌免疫。

3 主要發病癥狀

草莓角斑病菌初侵染時在葉片下表面出現1～4 mm大小的水浸狀紅褐色不規則形病斑，病斑擴大時受細小葉脈所限呈角形葉斑。病斑在可見光下照光呈透明狀，但以反射光看時呈暗綠色。病斑逐漸擴大后融合成一體，逐漸變成淡紅褐色而干枯；濕度大時葉背可見溢的出菌膿，干燥條件下成一薄膜，病斑常出現在葉尖或葉緣處，嚴重時使植株生長點變黑枯死，葉片發病后常干縮破碎形成孔洞。在適宜的條件下，花萼也會受到侵染。另外，該細菌還可導致維管束病變。

4 形態特征

無莢膜桿菌，單個、成雙或成短鏈，具單根極鞭，革蘭氏染色陰性，大小約為0.4μm×1.3μm。病菌生長較慢，在培養基上4～5 d（天）才能形成菌落。營養瓊脂上，菌落圓屋頂形，邊緣整齊規則，有光澤，黃色奶油狀。好氧菌，氯化鈉最大耐受力為0.5%～1.0%，生長最適溫度25℃，超過33℃不能生長。明膠液化、淀粉水解，不水解七葉苷，不從阿拉伯糖、半乳糖、海藻糖、纖維二糖溶液產酸，不能利用天冬酰胺作唯一碳源和氮源。

5 生物學特性

病葉殘渣和帶菌植株是發病的初侵染源。在病殘葉和土壤中，病菌能夠存活到下茬作物；在實驗室保存的干燥病葉片中，病原菌至少可存活兩年半。在草莓開始生長時，病原菌由病殘葉傳播到幼葉上，細菌可從侵染區沿著幼葉基部葉脈擴散。病原菌可通過氣孔侵入，也可通過局部傷口或下方的病葉侵染，在整個生長期發生多個侵染循環，病菌可侵染花，但不侵染果實。中等偏低的日溫（大約20℃）、夜間低溫及較高的濕度更有利于該病菌的侵染。

6 傳播途徑

草莓角斑病菌可以通過雨水和田間灌溉飛濺進行局部傳播、擴散，攜帶病菌的草莓苗以及夾雜在草莓苗中的病殘體都可能隨貿易進行短距離和長距離的運輸傳播。

7 檢測技術

首先，檢查病害癥狀，看草莓托葉上有無角斑癥狀；其次，檢查有角斑癥狀的病葉，是否有該病原菌存在，可以通過直接分離法和間接分離法。即將具水浸狀病斑的葉片放在研缽中，加少量蒸餾水研磨浸漬，制成細菌懸浮液，然后，用間接熒光免疫抗體染色法（IFAS）檢查。必要時可以采用劃線分離該病原菌。通常是在YPGA等平板上劃線，并在25℃下培養，5～7 d（天）后就可以看到第1批菌落。菌落圓形，大小為0.5～1.0mm，黃色，圓頂狀，邊緣規則。該病原菌的純培養和其他黃單胞菌不同，超過33℃不生長，七葉苷不水解，對氯化鈉的耐受度為0.5%～1.0%。由于病原菌在培養基上生長速度很慢，直接分離時常被其他快速生長的微生物所覆蓋，因此較難成功。IFAS技術能成功地檢測濃縮的細菌懸浮液及10倍稀釋液。當檢測結果為陽性時，在顯微鏡下可以看到幾百個小而圓的熒光細菌，在使用抗血清的不同稀釋度時，沒有其他細菌發生干擾。

對無癥狀的枝頭進行檢測難度較大。任何受感染的枝頭葉窩只要通過組織檢測就能檢測到細菌，一般只用1個枝頭檢查。最近，有人在研究檢測無癥狀枝頭的方法，即將枝頭洗凈、搗碎、拌勻，用離心的方法將菌液濃縮，再用IFAS檢測。雖然該方法不是很靈敏，但作為初步檢測是很有用的。

PCR分子檢測方法可以克服以上弊端，取待測樣品或分離培養菌株，利用DNA提取試劑盒提取DNA，也可直接用培養的菌株稀釋懸濁液作為模板進行PCR反應。測試菌株經PCR反應后，如果PCR產物與陽性對照條帶一致（537 bp），且陰性對照和空白對照均沒有相應條帶，則能證明所測菌株為草莓角斑病菌。否則，則判斷為不是。該方法具有靈敏度高、特異性強、重復性好、快速等優點，適合口岸快速、準確的工作特點。

8 檢疫的重要性

草霉角斑病于1962年發生在北美，感病植株葉片出現病斑、干縮、穿孔，造成草莓大量減產。20世紀80年代以來，由于農村經濟政策的落實，在一業為主、多種經營方針的指導下，草莓生產得到了迅速的發展。草莓科研工作也有了明顯進展，建立了品種資源圃，每年從國外引進了上百個優良品種，但良種的引入必然帶來草莓角斑病等有害生物傳播的巨大風險。為保護我國草莓產業的健康發展，在風險分析的基礎上，我國及時將草莓角斑病列入新的檢疫性有害生物名錄，深入、細致地研究該病的發生特點和檢測技術，確保引進種苗的健康安全。同時要密切關注草莓角斑病的侵入和發生情況，一旦發現，必須進行有效的除害處理，避免該病傳入、傳播，以保護我國草莓產業。