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白術(shù)黃芪湯及有效成分對潰湯性結(jié)腸炎的療效

2011-03-09 02:31:22亓國鋒
當(dāng)代醫(yī)學(xué) 2011年17期
關(guān)鍵詞:小鼠模型

亓國鋒

白術(shù)黃芪湯用于瀉痢恢復(fù)期的治療[1]。潰瘍性結(jié)腸炎屬中醫(yī)瀉痢等范疇,病程遷延時間較長[2]。本實(shí)驗使用三硝基苯磺酸致小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型,觀察白術(shù)黃芪湯單藥提取成分組方對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠的療效,現(xiàn)將結(jié)果匯報如下。

1 材料

1.1 動物 NIH雄性小鼠,SPF級,購自上海BK公司,月齡4~5周,體重大約25~30g。各組小鼠進(jìn)行單籠飼養(yǎng)。

1.2 試劑及藥物 菊科植物白術(shù)(Atractylodes, rocephala Koidz.)的根莖、豆科植物蒙古黃芪(Astragalus mongholicus Bge.)的根。白術(shù)黃芪湯按原方比例白術(shù)(體積比):藥材與蒸餾水比例為1:8,黃芪:甘草=10:7:3,按此比例浸泡4h,煮沸后,用紗布過濾藥液;第2次和第3次分別按照1:6和1:4的比例煮沸,紗布過濾,合并3次濾液。本實(shí)驗按此比例將中藥各成分加蒸餾水混勻研磨配成所需濃度。所用原材料中三硝基苯磺酸(TNBS),十六烷基三甲基溴化胺和鄰聯(lián)二茴香胺由Sigma公司提供。戊巴比妥鈉和無水乙醇為國產(chǎn)分析純。

1.3 儀器 紫外可見光分光光度計、D型水浴鍋、電子分析天平、電熱恒溫真空干燥箱。

2 方法

2.1 動物造模、分組及給藥 40只雄性小鼠,禁食24h后,使用1%戊巴比妥鈉(45mg/kg)進(jìn)行腹腔注射麻醉。隨機(jī)分為4組,為正常對照組、模型對照組、白術(shù)黃芪湯組、有效成分組。動物肛門注入TNBS藥液(劑量為100mg/kg),倒立30秒使藥液達(dá)全結(jié)腸,將動物放回原籠待其自然蘇醒。其中,正常對照組首先注入等量的50%乙醇,造模24h后開始灌胃給藥。正常對照組和模型對照組灌蒸餾水;白術(shù)黃芪湯組灌水煎劑(10g/kg),有效成分組灌提取物(0.4g/kg),每天一次,連續(xù)7天。

2.2 MPO活性檢測:各組小鼠分別取100mg結(jié)腸組織并切碎,置入2mL十六烷基三甲基溴化胺(HTAB)緩沖液中,冰浴中勻漿3次,每次30 S,超聲振蕩10S,凍溶3次,4000 r/min離心15min,取上清液0.1mL,加入50mmol/L的PBS2.9mL中于460 nm處測吸光率A值,于3min后再次測定吸光率A值。該樣品的MPO單位即兩次A值差值除以3。

3 結(jié)果

各組MPO活性比較。模型組小鼠MPO活性較正常組明顯升高,白術(shù)黃芪湯組和有效成分組與模型組比較MPO活性明顯降低(P<0.01),有效成分組效果略優(yōu)。

注:**:與正常組相比,模型組MOP活性明顯升高,P<0.01,有統(tǒng)計學(xué)意義。##:與模型組相比,MOP活性明顯降低,P<0.01,有統(tǒng)計學(xué)意義。

4 討論

潰瘍性結(jié)腸炎以急性發(fā)作的患者為多見,病初邪實(shí),濕熱蘊(yùn)結(jié)腸腑;病程較長,反復(fù)發(fā)作,形成虛實(shí)夾雜證,虛為脾虛血虧,實(shí)為濕熱留戀,腸絡(luò)瘀阻[3]。《景岳全書·泄瀉》曰:“泄瀉之本,無不由于脾胃……脾胃受傷,則水反為濕,谷反為滯,而瀉痢作矣”。在中醫(yī)學(xué)上,脾虛濕勝在發(fā)病及病變過程中有著至關(guān)重要的地位,因此,在潰瘍性結(jié)腸炎特別是恢復(fù)期的治療中,益氣健脾利濕等治法自然是重中之重的治療方法[4]。在瀉痢治療中,下列療法充分體現(xiàn)了“泄瀉之本,無不由脾胃”的中醫(yī)理論:治療濕熱毒邪郁蒸腸道而致的下痢,瀉痢去除后服白術(shù)黃芪湯健脾利濕,益氣補(bǔ)中[5]。

本實(shí)驗中,TNBS所致的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型組小鼠MPO活性較正常組明顯升高。與模型組相比,白術(shù)黃芪湯組和有效成分組MPO活性明顯降低(P<0.01),而有效成分組效果略優(yōu)。從藥材提取有效組分是中藥現(xiàn)代研究的常用方法,但其中需要探討的問題仍然很多,這是需要我們以后進(jìn)一步學(xué)習(xí)的方向。

[1]李茹柳,遲莉,石忠峰.白術(shù)黃芪湯及其單藥提取成分組方對潰瘍性結(jié)腸炎的治療作用[J].2007,21(3):223-228.

[2]孫洪鳳,李云峰.中藥氧灌腸治療潰瘍性結(jié)腸炎[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2010,16(25):146-147.

[3]陳江.潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)病機(jī)演變特點(diǎn)探析[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2005,7(3):197.

[4]石忠峰,陳慰文,李茹柳,等.白術(shù)黃芪湯及其有效成分組方對小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的療效觀察[J].中藥新藥與臨床藥理,2007,18(2):87-89.

[5]Shi ZF, Chen WW, Li WM, Gao Y.Purification on total astragalosides by macroporous adsorptive resin[J].Chin Tradit Herb Drugs (中草藥), 2005, 36(9): 1322-1325.

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