椎間盤丸的薄層色譜鑒別

楊育林 辛愛玲

（河南省洛陽市食品藥品檢驗所，河南洛陽 471023）

椎間盤丸是由黃芪、當歸、延胡索、白芍、威靈仙等1 1味中藥經提取濃縮后制成的丸劑，為洛陽正骨醫院的醫院制劑，具有溫通經脈、養血散寒止痛之功效。適用于椎間盤突出、椎管狹窄、骨質增生等所致的腰腿痛、頸肩臂痛、冷感、麻木等神經癥狀。為控制藥品質量、保證臨床用藥的安全性和有效性，本研究參考有關文獻[1-3]，采用薄層色譜法對方中主藥當歸、延胡索、黃芪進行鑒別，結果表明該方法簡便、準確、專屬性強。

1 儀器與材料

CAMAG薄層成像系統（瑞士CAMAG公司），CAMAG紫外分析儀（瑞士CAMAG公司），AX200型電子分析天平，SY2200型超聲清洗器，硅膠G（青島海洋化工廠生產）。樣品由洛陽正骨醫院提供，批號為：20100702、20100802、20100910；陰性樣品由洛陽正骨醫院制劑室提供，按處方比例，除去被檢藥材配制而成。當歸對照藥材（批號：120927-200613）、延胡索乙素對照品（批號：110726-200409）、黃芪甲苷對照品（批號：0781-200311）購自中國藥品生物制品檢定所。

2 方法與結果

2.1 當歸的薄層色譜鑒別

2.1.1 供試品溶液的制備 取供試品粉末5g，加乙醚30m L，冷浸2h，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇1m L使之溶解，作為供試品溶液的樣品1、樣品2、樣品3[1-2]。

2.1.2 對照藥材溶液的制備 取當歸對照藥材0.5g，同法制得對照藥材溶液。

2.1.3 陰性樣品溶液的制備 取按處方除去當歸的陰性樣品，同法制成陰性樣品溶液。

2.1.4 當歸的鑒別 吸取上述溶液各2μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材相應的位置上顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照液無干擾。見圖1。

圖1 當歸的TLC圖

2.2 延胡索的薄層色譜鑒別

2.2.1 供試品溶液的制備 取供試品粉末10g，加甲醇50m L，超聲處理30m in，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10m L使之溶解，加濃氨試液使呈堿性，用乙醚振搖提取3次，每次10m L，合并乙醚液，蒸干，殘渣加甲醇1m L使之溶解，作為供試品溶液的樣品1、樣品2、樣品3[1-2]。

2.2.2 對照品溶液的制備 取延胡索乙素對照品，加甲醇制成每1m L含0.5m g的溶液，作為對照品溶液。

2.2.3 陰性樣品溶液的制備 取按處方除去延胡索的陰性樣品，同2.2.1法制成陰性樣品溶液。

2.2.4 延胡索乙素的鑒別 吸取上述溶液各2μL，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮（9∶2）為展開劑，在用展開劑預飽和的展開缸內展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏至斑點顯色清晰。置紫外光燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照品相應的位置上顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照液無干擾。見圖2。

圖2 延胡索的TLC圖

2.3 黃芪的薄層色譜鑒別

2.3.1 供試品溶液的制備 取本品6g，研細，加水5m L浸潤，加水飽和的正丁醇30m L，搖勻，超聲處理10m in，濾過，濾液用氨試液洗滌2次，每次30m L，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1m L使之溶解，作為供試品溶液的樣品1、樣品2、樣品3[1，3]。

2.3.2 對照品溶液的制備 取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1m L含0.5m g的溶液，作為對照品溶液。

2.3.3 陰性樣品溶液的制備 取按處方除去黃芪的陰性樣品，同2.3.1法制成陰性樣品溶液。

2.3.4 黃芪甲苷的鑒別 吸取上述溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加熱約10m in，置日光及紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。陰性對照液無干擾。日光圖見圖3，熒光圖見圖4。

圖3 黃芪的TLC圖（日光）

圖4 黃芪的TLC圖（紫外光）

3 討論

椎間盤丸為中藥復方制劑，成分復雜，各成分間干擾較嚴重，故其原質量標準較簡單。通過多次試驗篩選出合理的供試品溶液制備方法和色譜分離系統，對其中主藥當歸、延胡索、黃芪進行鑒別，經過3批樣品檢測表明，該方法簡便易行，薄層色譜斑點分離清晰，重現性好，陰性對照無干擾，可作為該制劑的定性鑒別方法。

[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[S]. 2010：124-125，130-131，283-284.

[2] 河南省食品藥品監督管理局. 河南省中藥飲片炮制規范[S]. 2005：58，117.

[3] 張金紅，周晶，宋慧琴，等. 堿水解法提高黃芪藥材中黃芪甲苷的工藝研究[J]. 時珍國醫國藥，2010，21（11）：2935-2937.