番紅花紅O修飾鉛筆芯電極測定水果酸度

羅濟文，陳憲明，韋慶敏，龐 起，姚燕春

(玉林師范學院化學與生物系，廣西 玉林 537000)

番紅花紅O修飾鉛筆芯電極測定水果酸度

羅濟文，陳憲明，韋慶敏，龐 起，姚燕春

(玉林師范學院化學與生物系，廣西 玉林 537000)

在含番紅花紅O的磷酸鹽緩沖溶液(phosphate buffered salines，PBS)中，采用循環伏安法在預處理過的鉛筆芯電極表面生成聚番紅花紅O薄膜，考察溶液的pH值、掃描電位范圍對修飾過程的影響。在-1.0～0.0V (vs SCE)的掃描電位范圍和酸性介質中形成的薄膜，在空白PBS中具有較高電活性和穩定性，并且在pH1.5～7.5之間，陽極伏安峰電位與pH值有良好的線性關系。利用這種關系測定橙子和西紅柿活體及果汁的酸度取得滿意結果。

番紅花紅O；鉛筆芯；水果；酸度測定

溶液酸度的測定在生活、生產和科研上都非常重要，對酸度測定方法的研究較多[1]。目前，已經發展了各種pH傳感器，其中主要有光學傳感器[2-5]和電傳感器[6-8]。水果酸度的測定方法通常用滴定法[9-11]、電位法及比色法等。滴定法是經典方法，準確度高，但操作繁瑣，而且受諸多條件限制[11]。電位法通常以玻璃電極為指示電極用pH計測定，由于玻璃電極的尺寸大且易破碎，特別是當溶液成分較復雜時往往誤差大，以對樣品進行直接活體分析。比色法最簡單的是用pH試紙直接測定，但測量不夠精確、誤差大。導電聚合物具有良好的導電性能，可作為分子導線在生物活性物質與電極間直接傳遞電子，是構建生物傳感器的一種新材料。其中染料導電聚合膜修飾電極穩定性好、催化性能高、選擇性強等優點而顯示出良好的應用前景[12]。本實驗利用普通鉛筆芯為基體電極(pencil grap hite electrode，PGE)，選用電活性很強的聚番紅花紅O[13-14]為修飾材料，制得聚合物薄膜修飾電極(polysukfone/ pencil graphite electrode，PSO/PGE)。該修飾電極有很好的穩定性和電化學活性，伏安掃描時，在pH1.5～7.5的磷酸鹽和氯化鉀混合溶液中，峰電位與pH值間有很好的線性關系。用于測定水果活體和果汁的酸度取得滿意結果。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

橙子和西紅柿試樣為玉林本地產品；番紅花紅O上海化學試劑公司；其他試劑均為分析純；所有溶液都用二次蒸餾水配制。

LK98C電化學分析系統 天津市蘭力科化學電子高技術有限公司；三電極系統：工作電極為HB鉛筆芯電極(ASL 36101、φ＝0.5mm) 上海中韓晨光文具制造有限公司，對電極為鉑絲電極，飽和甘汞電極(saturated calomel electrode，SCE)為參比電極，所有電位數據均以SCE為基準；pHS-3C精密pH計 上海精密科學儀器有限公司。

1.2 聚番紅花紅O修飾鉛筆芯電極(PSO/PGE)電極的制備

將鉛筆芯電極用蒸餾水沖洗并依次用8mol/L HNO3、丙酮、二次蒸餾水，各超聲清洗5min后置于pH2.20、0.10mol/L磷酸鹽緩沖溶液中于-1.5～＋2.0V(vs. SCE)范圍內以100mV/s掃描20圈，使電極活化。然后將電極置于含1.33×10-3mol/L番紅花紅O的PBS(0.1mol/L，pH6.01)，于-1.0～0.0V(vs. SCE)的電位范圍內，以100mV/s的掃描速度進行循環伏安掃描30圈后，將電極取出用蒸餾水經反復沖洗并浸泡即得聚番紅花紅O修飾鉛筆芯電極。

2 結果與分析

2.1 番紅花紅O在電極表面聚合的過程

已經活化處理的鉛筆芯電極在含番紅花紅O的PBS (pH6.01)中掃描結果如圖1。循環伏安圖有一對氧化還原峰ⅠA和ⅠB，氧化峰電位為：Epa＝-0.376V，還原峰電位Epc＝-0.512V。另外在稍高電位處，還有一對較小的峰ⅡA和ⅡB。隨掃描次數增加，峰不斷長高，說明在電極表面具有電活性的物質的量隨掃描次數增加而增多，即番紅花紅O聚集在電極表面的量不斷增加。

圖1 在含番紅花紅O的PBS溶液中電聚合的循環伏安圖Fig.1 Cyclic voltammograms of PGE in PBS (0.1 mol/L, pH 6.01) containing 0.13×10-3mol/L SO

圖2 SO/PGE在pH7.01的PBS空白溶液中的循環伏安圖Fig.2 Cyclic voltammograms of SO/ PGE in PBS (pH 7.01)

將此電極用蒸餾水經反復沖洗并浸泡30min后于pH7.01的PBS中作循環伏安掃描時，氧化還原峰型基本不變, 只峰電位負移，Epc約為-0.84V，如圖2所示。由圖2還可以看出掃描時峰稍有減小，但經30圈后曲線基本不變，說明此電聚合物膜修飾電極有很好的穩定性。與本實驗制作的聚亞甲藍修飾鉛筆芯電極[15]相比，在同樣條件下，番紅花紅O修飾電極的峰電位更負，峰更加尖銳，顯示了更高的電化學活性。

2.2 聚番紅花紅O膜修飾鉛筆芯電極對溶液pH值的響應

配制pH1.53～8.49的12種含有0.1mol/L 氯化鉀的磷酸鹽緩沖溶液，對新制備的PSO/PLE電極進行循環伏安測定，結果如圖3A，隨溶液的pH值升高氧化還原峰電位負移。將伏安曲線中氧化峰電位Epa與相應溶液pH值作圖，所得曲線如圖5B，線性回歸方程Y＝-0.03078-0.06703X ，線性相關系數R＝0.99792。直線的斜率為-67mV/pH。

圖3 SO/PGE電極在不同pH值的PBS(0.1mol/L)+KCl(0.1mol/L)混合溶液中的循環伏安曲線Fig.3 Cyclic voltammograms of SO/ PGE in PBS (0.1 mol/L) and KCl (0.1 mol/L) with different acidity

2.3 氧化峰電位與pH值的關系曲線

圖4 Epa-pH曲線Fig.4 Linear dependence of Epaon pH

由圖4可知，氧化峰電位Epa-pH曲線在pH1.5～7.5之間呈良好的線性關系，線性方程為：Y＝-0.03078-0.06703X，R＝0.99792。直線斜率為67mV/pH，接近于Nearnstain響應理論值59mV/pH。測定試樣酸度時以此曲線為標準曲線。

2.4 試樣酸度測定

2.4.1 水果酸度的直接測定

分別在橙子和西紅柿上適當的相鄰位置用小玻璃棒刺開3個小口，使3個小孔的汁液可以相通，然后將3個電極直接置于孔中，固定后進行掃描測定。掃描的前3圈結果如圖5所示。

圖5 PSO/PGE在橙子活體(A)和西紅柿活體(B)中的循環伏安曲線的前3圈(vs. SCE)Fig.5 First 3 cycles of cyclic voltammetry of PSO/PGE in orange (A) and tomato (B)

圖5 顯示，從第2圈起，峰的形狀基本穩定，第2圈和第3圈幾乎重合。橙子和西紅柿的Epa分別為-0.282V和-0.243V，由圖4查出對應的pH值分別為3.35和2.92。

2.4.2 果汁酸度測定和重現性

橙子用小刀在果上部開口，盡量把果汁擠到50mL燒杯中。西紅柿去皮后在50mL燒杯中用玻棒充分攪拌成糊狀。分別將新制備的PSO/PGE和其他兩個電極插入以上溶液進行循環伏安掃描，并重新制備電極測定，再測定兩次，3次測定的第3圈的循環伏安曲線如圖6所示。

圖6 PSO/PGE在橙子汁(A)和西紅柿汁(B)中平行測定3次的循環伏安曲線的第3圈Fig.6 The 3rdcyclic voltammograms of SO/PGE in orange (A) and tomato (B) in 3 replicate determinations

結果表明，雖然平行3次測定峰電流大小有較大差別，但其氧化峰電位變化很小。這也說明橙汁H+對修飾電極有良好的響應和重現性。盡管在果汁中存在很多具有氧化還原性的物質如某些金屬離子和VC等有機物，但它們的量在電極表面與番紅花紅的量相比是很小的，不足以對其氧化還原電位產生明顯的影響。

圖6A中3次掃描的氧化峰電位Epa分別為-0.298、-0.302V和-0.303V；平均值為-0.301V，對應的pH值為3.91。圖6B中3次掃描的氧化峰電位Epa分別為-0.247、-0.248V和-0.240V；平均值為-0.0245V、在圖3B曲線查得相應的pH值為3.02。

隨后用pH計測定同一橙汁，測得值為4.03；用精密pH試紙測定，測得pH值為3.7～4.0。用pH計測定同一西紅柿汁，測定值為3.15，用精密pH試紙測得2.8～3.1。所得結果相當接近。

2.4.3 電極的再生

由于果蔬中成分復雜，每次掃描測定后電極會受到反應物和產物的污染，對修飾電極的pH值響應有所影響。試驗中發現，將測定后的電極置于pH5左右的磷酸鹽中經掃描5圈后峰電位穩定，再用于測定所得數值與首次測定的電位很接近，試驗采用此方法對電極進行再生處理。

3 結 論

以普通HB鉛筆芯為基體電極，經清洗處理和活化后，用循環伏安法制得聚番紅花紅O聚合物薄膜修飾電極。該修飾電極有很好的穩定性和電化學活性。循環伏安曲線有一對可逆性較好的氧化還原峰，在pH1.5～7.5的磷酸鹽和氯化鉀混合溶液中，陽極峰電位與pH值間有很好的線性關系，線性相關系數R為0.99792，直線的斜率為67mV/pH。利用峰電位法與pH值間的線性關系，測定了橙子和西紅柿果實及果汁的酸度，結果和pH酸度計法及精密pH試紙法比較，結果很接近。番紅花紅O修飾鉛筆芯電極材料便宜，制作簡便，且電極尺寸小，方便進行活體分析，是一種很有應用價值的pH電化學傳感器。

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Safranine O Modified Pencil Graphite Electrode and Its Application for Determination of Fruit Acidity

LUO Ji-wen，CHEN Xian-ming，WEI Qing-min，PANG Qi，YAO Yan-chun
(Department of Chemistry and Biology, Yulin Normal University, Yulin 537000, China)

A safranine O (SO) polymer film was formed by cyclic voltammetry on the surface of a pretreated pencil electrode (PGE) in SO-containing phosphate buffered saline (PBS). The effects of buffer pH and potential scan range on the modification process were investigated. The polymer film formed in an acidic solution (pH 6.01) and a potential scan range between-1.0 V and 0.0 V (vs SCE) showed high electrochemical activity and good stability in blank PBS solutions, and a good linearity between the voltammetric peak potential and the buffer pH was obtained in the pH range of 1.5-7.5. This modified electrode could be used for determining the acidity of oranges, tomatoes and juice with satisfying results.

safranine O；pencil graphite；fruit；acidity determination

O657.1；TS207.3

A

1002-6630(2011)16-0209-04

2010-11-16

國家自然科學基金地區項目(20863008)；廣西教育廳科研基金資助項目(200708LX164)

羅濟文(1949—)，男，教授，學士，研究方向為生物電分析。E-mail：jwluo37@sohu.com