凝血及纖溶實驗室檢驗的進展及臨床應用

李 欣 呂麗琴

(江蘇省 金壇市中醫醫院檢驗科 213200)

血液凝固是一個復雜的生理生化代謝過程，其實質是通過一系列酶促反應，使血漿中呈液態的纖維蛋白原轉變成固態的纖維蛋白絲，因而凝血是屬于生理生物化學范疇的課題，涉及血液學、分子生物學和免疫學等諸多領域。由于這些相關學科研究的日益深入，不斷地給凝血的理論和實踐注入新的內容，因此，在測定方法學上也由過去精密度低的方法過渡到精密度高的方法。

1 實驗室檢驗的進展

凝血及纖溶檢測項目越來越多，實驗方法大體分為篩選試驗和確證試驗兩部分。從方法學上又可分為功能測定、免疫學測定和化學測定3大類。

1.1 功能測定 即傳統的最終以出現纖維蛋白作為判斷依據的方法，如凝血酶原時間、活化的部分凝血活酶時間、凝血酶時間，以及用各種缺乏因子血漿測某一凝血因子含量的方法等。方法古老、但仍是目前主要采用的方法。當前用于常規工作的各種型號的自動化凝血儀的主要功能也屬此類。PT測定是檢測凝血因子 II、V、Ⅶ、X的過篩試驗，要用統一標有國際敏感指數ISI的凝血活酶試劑。在抗凝治療監控和決定用藥劑量時，一定要用國際標準化比率報告。

1.2 免疫學測定 是近年來發展最快的檢測方法，其原理是以純化的被檢物質為抗原，制備相應的抗體，然后用抗原抗體反應原理對被檢物質進行定性或定量測定。其方法采用ELISA、膠乳微粒凝集、火箭電泳等方法。對許多新發現的抗凝因子，纖溶和纖溶抑制因子，纖維蛋白原裂解，纖維蛋白原和纖維蛋白降解，凝血酶原活化等過程中被切下的小肽，基本上都用免疫學方法檢測。從理論上講，免疫學測定不可能全部取代功能測定。因為免疫學測定的僅是該因子的抗原性，只能表明體內存在該因子，但卻不能說明其是否有生物活性，而功能測定則是測該因子在凝血或纖溶中的生理生化功能。

1.3 化學測定的理論根據 許多凝血、抗凝及纖溶因子本身是水解酶，可以用人工合成含有該酶酶切位點并帶有色原(指示劑)的寡肽作為底物，用常規的生化比色法加以測定。國內外已有一些合成的底物用于測定，諸如ATIll、凝血酶、FlX、FXA，以及纖溶酶等等。

1.4 凝血與纖溶檢驗 關鍵在于診斷試劑，以往大量凝血檢測試劑由于各實驗室自行制備，手工操作難以達到規定的質量標準和全國、全球標準化，也難以達到室內、室間質控的要求。為此WHO和ICSH的血栓和止血委員會制定了一些標準或提供少數統一的標準品供各國校準各種試劑和辦法。目前國外凝血檢測大部分已用自動化儀器測定，絕大部分試劑都有質量較高的商品供應。溶栓治療是指用藥物來活化纖維蛋白溶解系統，一般為投入一種纖溶酶原活化物，如尿液酶、鏈激酶或組織型纖溶酶原活化物(tpA)，使大量纖溶酶生成，從而加速已形成血栓的溶解，FDP或D一二聚體生成，則表明達到溶栓效果。

2 臨床應用

2.1 凝血與纖溶系統在生理狀態下處于動念平衡許多研究表明，急性腦梗死時血漿處于高凝狀念，黏稠度增高，Fbg為系統中最重要的因子之一。是血栓形成的重要基質。高凝狀念存在于腦梗死的各個時期，但纖溶系統的顯著激活并非在急性期而是在亞急性期和慢性期。

2.2 高血壓是急性腦卒中主要危險因素之一 原發性高血壓及急性腦血管病患者血漿中均存在纖維蛋白原水平升高。抗凝纖溶活性下降。因此，原發性高血壓患者降低纖維蛋白原，提高纖溶活性，有利于減少腦卒中發生。高血壓患者和糖尿病患者血漿D一二聚體濃度明顯高于正常人，說明高血壓和糖尿病患者血液處于高凝狀態，增加了發生腦血管病的危險因素，與此同時，由于機體對凝血過程或對已存在微血栓的應答反應，使纖溶系統啟動，患者凝血功能強，纖溶功能弱的改變使血栓形成的傾向增加。

2.3 D二聚體是交聯纖維蛋白特異性的降解產物D二聚體升高反映了機體凝血活性升高和血栓形成。D二聚體在彌漫性血管內凝血。和血栓性疾病的應用近幾年來受到關注。實驗表明，妊娠高血壓綜合征患者D二聚體含量明顯升高，有微血栓形成和纖溶功能亢進。凝血與纖溶功能變化可能是內皮細胞損傷的繼發性改變，但在妊娠高血壓綜合征發展過程中起重要作用，故參與凝血和纖溶的因素可能成為妊娠高血壓綜合征的有用監測指標。