復方地氯咽炎噴霧劑的制備與質量評價

咽炎是臨床上常見疾病之一，易反復發(fā)作，傳統(tǒng)療法主要為抗生素治療，近年來國外報道[1]，加用激素治療可取得良好療效。空軍總醫(yī)院以地塞米松磷酸鈉和醋酸氯己定為主藥，甘草酸二銨和薄荷腦為輔料制備了復方地氯咽炎噴霧劑。其中地塞米松磷酸鈉具有抗炎抗過敏的功效，對急性咽炎引起的發(fā)熱作用有顯著的療效[2]。醋酸氯己定具有較強的抗炎殺菌作用，甘草酸二銨具有較強的抗炎以及鎮(zhèn)咳作用，可保護咽部及支氣管黏膜免受刺激，作用于喉部末梢神經(jīng)以減弱咳嗽，從而達到止咳效果，而且其中含甘草甜素可以達到矯味的目的。薄荷腦為純中藥提取物，具有清熱止痛、消腫消炎、防腐生肌、清咽潤喉之功效。另外，噴霧裝置可使藥物借助一定的裝置從容器中噴出，直接達到黏膜或病變部位避免首過效應，減少藥物不良反應，有很好的應用前景?，F(xiàn)將其制備及質量控制方法報道如下。

1 儀器與試藥

PB－10型精密pH計（北京賽多利斯科學儀器有限公司）；85－2A型雙數(shù)顯磁力加熱攪拌器（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）；BS1101型電子天平sop（北京賽多利斯天平有限公司）；噴霧裝置（萬通定量法系統(tǒng)有限公司）；島津DGU－20A3型全自動高效液相色譜儀（CBM－20A檢測器、SIL－20A自動進樣器和LC－Solution化學工作站）。地塞米松磷酸鈉對照品（天津天藥藥業(yè)股份有限公司，批號為DNa091002）；醋酸氯己定對照品（錦州九泰藥業(yè)有限公司，批號為090709）；吐溫－80（北京益利精細化學品有限公司）；聚乙二醇－12－羥基硬脂酸酯（北京鳳儀精求商貿有限責任公司）；復方地氯咽炎噴霧劑（空軍總醫(yī)院制劑研究室自制，批號為100701）；乙腈、三乙胺為色譜純，水為雙蒸水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 處方與制備

處方：醋酸氯己定，地塞米松磷酸鈉，甘草酸二銨，薄荷腦，吐溫－80，聚乙二醇－12－羥基硬脂酸酯。

制備：將處方量的薄荷腦用吐溫－80和聚乙二醇－12－羥基硬脂酸酯溶解，并加蒸餾水至300mL，加入處方量的醋酸氯己定、地塞米松磷酸鈉以及甘草酸二銨攪拌至溶解，用1 000mL的量筒定容至刻度，混合均勻，超聲，得無色透明溶液，過濾灌裝，即可。

2.2 檢查

本制劑性狀為澄清、透明無色、流動性極好的液體，具有薄荷清涼味，味微苦。相對密度為0.96。3批樣品pH平均值為5.5。微生物限度檢查[3]未檢出活螨，未檢出大腸桿菌；每毫升細菌總數(shù)未超過100個，霉菌未超過100個。噴射速率、噴射總量均符合2010年版《中國藥典（一部）》附錄噴霧劑項下有關的各項規(guī)定。依據(jù)本品的總劑量（25mL）和每次用藥量（兩主藥質量濃度均為1 g/L），總噴數(shù)應大于200次。取本品4瓶，除去帽蓋，分別擠壓閥門連續(xù)噴射于1 000mL錐形瓶中，直至噴盡為止，分別計算噴射次數(shù)。經(jīng)檢查，3批樣品（批號為20100705，20100706，20100707）每瓶總噴數(shù)的均值分別為205，209，203。其他條件檢查均符合2010年版《中國藥典（二部）》附錄噴霧劑項下有關的各項規(guī)定。

2.3 鑒別

物理性狀：取本品5mL，置試管中，用力振搖1min，產(chǎn)生持久性泡沫，放置5min，泡沫消失。

最大吸收波長鑒別：分別稱取醋酸氯己定和地塞米松磷酸鈉各5 mg，置100 mL量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度，制成每1mL約含50μg的醋酸氯已定和地塞米松磷酸鈉溶液，照2010年版《中國藥典（二部）》附錄Ⅵ分光光度法測定，地塞米松磷酸鈉在240 nm波長處有最大吸收，醋酸氯己定在260 nm處有最大吸收。

色譜鑒別：樣品含量測定項下記錄的色譜圖，供試品溶液的主峰的保留時間與對照品溶液的主峰的保留時間一致。

2.4 每噴噴量測定

取樣品3瓶，分別試噴數(shù)次后，擦凈，精密稱定，再連續(xù)噴射3次，每次噴射后均擦凈，精密稱定，計算每次噴量，連續(xù)噴射10次，擦凈，精密稱定，再按上述方法測定3次噴量，繼續(xù)連續(xù)噴射10次后，按上述方法再測定4次噴量，計算每瓶10次噴量的平均值。結果樣品的每噴噴量為100μL，根據(jù)每噴主藥含量均為標示含量的80％～120％，每噴兩主藥含量均約為0.1mg。

2.5 含量測定

2.5.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱：Diamonsil C18柱（150 mm×4.6 mm，5μm）；流動相：0.01 mol/L磷酸溶液（用三乙胺調pH至2.8）－乙腈（32∶68），柱溫：30℃；檢測波長：250 nm；進樣量：20μL。保留時間醋酸氯己定為3.3min，地塞米松磷酸鈉為4.7min，兩者分離度大于1.5。色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.5.2 溶液制備

分別精確稱取地塞米松鈉磷酸鈉、醋酸氯己定的原料藥各5.00mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇－水溶解并稀釋至刻度，配置成質量濃度為50μg/mL的地塞米松磷酸鈉、醋酸氯己定的對照品貯備液。精密量取兩對照品貯備液1 mL，置10mL容量瓶中，用甲醇稀釋并定容至刻度，配制成含地塞米松磷酸鈉和醋酸氯己定均為50μg/mL對照品溶液。精密量取同一批號的樣品1 mL，置10 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，配制成質量濃度為100μg/mL的供試品溶液。

2.5.3 方法學考察

線性關系考察：分別精密量取兩對照品貯備液0.2，0.4，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0mL，置10 mL的容量瓶中，用甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，配制成含地塞米松磷酸鈉和醋酸氯己定均為10.0，20.0，50.0，75.0，100，150，200μg/mL系列標準的溶液，依法進樣，記錄相應峰面積值。以樣品質量濃度（C）對峰面積（A）回歸，得地塞米松磷酸鈉、醋酸氯己定的回歸方程分別為 A=4.38× 104C+1.80×104（r=0.999 5）和 A=2.40×104C+1.08×104（r=0.999 6）。結果表明，地塞米松磷酸鈉和醋酸氯己定進樣質量濃度線性范圍均是10～200μg/mL。

精密度試驗：分別精密吸取同一對照品溶液，連續(xù)進樣6次，依法測定。結果地塞米松磷酸鈉和醋酸氯己定峰面積的 RSD分別為0.89％和1.22％（n=6），表明儀器精密度良好。

重現(xiàn)性試驗：取同一批號的樣品適量，依法制備供試品溶液并測定。結果地塞米松磷酸鈉和醋酸氯己定含量的 RSD分別為1.10％和0.90％（n=6），表明方法重現(xiàn)性良好。

穩(wěn)定性試驗：取同一供試品溶液，在室溫下避光放置，分別于0，1，2，4，8，12h時依法測定。結果兩主藥峰面積的 RSD分別為0.80％和0.90％（n=6），表明供試品溶液在12h內穩(wěn)定。

加樣回收試驗：精密量取同一批樣品0.5 mL共9份，分別置10 mL的容量瓶中，均分為3組，各組分別精密加入質量濃度為50μg/mL的地塞米松磷酸鈉、醋酸氯己定的對照品貯備液0.8，1.0，1.2mL，用流動相稀釋至刻度，依法測定并計算回收率。結果見表1。

表1 加樣回收試驗結果（n=9）

2.5.4 樣品含量測定

取3批樣品，依法制備供試品溶液，并與對照品溶液分別進樣20μL，記錄峰面積，用外標法計算含量。結果見表2。

表2 樣品含量測定結果（％，n=3）

3 討論

與傳統(tǒng)含漱片和潤喉片比較，本制劑克服了藥物不宜達到咽喉壁與扁桃體的不足之處，且具有吸收快、生物利用度高、生產(chǎn)成本相對低廉可精確定量等優(yōu)點，故本研究選噴霧劑作為給藥劑型。處方中的地塞米松磷酸鈉和醋酸氯己定是抗炎抑菌成分，故把兩者作為咽喉消炎噴霧劑的含量指標，以保證主藥的投料量及產(chǎn)品質量與療效。

因口腔噴霧劑給藥體積不能太大，需要提高濃度來減小噴量、次數(shù)。本制劑以一定量的吐溫－80作增溶劑，以增加制劑的溶解度。吐溫－80最常用，口服安全。根據(jù)輔料用量以滿足制劑要求的最低使用量原則以及口感和乳光現(xiàn)象的問題，最終確立用吐溫－80和聚乙二醇－12－羥基硬脂酸酯兩種增溶劑共同增溶，能得到澄清透明的溶液。

根據(jù)文獻[4]，將甲醇與水的比例調為62∶38，但地塞米松磷酸鈉和氯己定的出峰時間接近，分離效果不理想。最后結合文獻[5]，調節(jié)流動相為0.01mol/L磷酸溶液－乙腈（32∶68），并加三乙胺調pH至2.8（為提高柱子的耐受性），兩主藥能完全分開，且輔料對其測定無干擾。此條件可用于測定復方咽炎噴霧劑中兩主藥的含量。

[1]Mary－Lynn，Bonsu B，Kathryn EN，et al.A pilot study of lversus 3 Days of dexamethasoneas add－ontherapy in children with streptococcal pharyngitis[J].Pediatr Infect Dis，2006，25（6）：477－481.

[2]余潔紅.布地奈德霧化吸入治療小兒急性喉炎[J].中國婦幼保健，2005，20（3）：341－342.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄79.

[4]Ali T，Sedat Y，Hakan T，et al.Clinical efficacy of dexamethasone for acute exudative pharyngitis[J].Emerg Med，2008，35（4）：363－367.

[5]沈國榮.HPLC法測定復方麻黃堿滴鼻劑中成分的含量[J].中國藥學雜志，2006，26（11）：1 637.