水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物對實驗鼠毒理效應(yīng)研究進(jìn)展

秦文弟，楊柳燕

污染控制與資源化研究國家重點實驗室，南京大學(xué)環(huán)境學(xué)院，江蘇 南京 210093

由于環(huán)境污染的日趨加劇及環(huán)境的惡化，使水體水華頻生，并造成嚴(yán)重的生態(tài)災(zāi)難和健康危害［1］。世界衛(wèi)生組織資料顯示，淡水中許多藻類，特別是藍(lán)藻，如微囊藻屬、魚腥藻屬、顫藻屬、念珠藻屬和節(jié)球藻屬中的某些種或株系等能產(chǎn)生藍(lán)藻毒素(主要為微囊藻毒素，microcystin，MC)［2］。藍(lán)藻毒素不僅能造成生物體急性和亞急性中毒，而且流行病學(xué)調(diào)查及相關(guān)試驗研究顯示，藍(lán)藻毒素還與多種消化道腫瘤，特別是肝癌的發(fā)病率升高相關(guān)而具有潛在致癌作用［3］，因此，有毒藻類引起的水體藍(lán)藻毒素污染已成為一個全球性的環(huán)境問題，而藍(lán)藻毒素健康危害性的研究已成為學(xué)術(shù)界研究、關(guān)注的熱點和難點。有人對比研究了主要產(chǎn)生生物堿類筒胞藻毒素(cylindrospermopsin)的藍(lán)藻Cylindrospermopsisraciborskii提取物和純的cylindrospermopsin，發(fā)現(xiàn)毒性類型和毒害程度都有所不同［4］，這引起許多學(xué)者假設(shè)藍(lán)藻中還有其他一些毒素。而目前的研究主要集中在純藻毒素的生態(tài)毒理學(xué)效應(yīng)，對藍(lán)藻細(xì)胞提取物的研究相對較少。另外，對于水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物的毒理學(xué)研究也主要集中于對水生生物的研究，而對哺乳動物的研究相對較少，筆者論述了水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物對實驗鼠的毒理學(xué)效應(yīng)，以期為合理、正確評價水華藍(lán)藻造成的危害及其健康風(fēng)險評價提供依據(jù)。

1 水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物對實驗鼠臟器細(xì)胞的凋亡效應(yīng)

細(xì)胞增殖、分化、死亡是細(xì)胞經(jīng)歷的基本過程。細(xì)胞凋亡是多細(xì)胞有機體為調(diào)控機體發(fā)育和維護(hù)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定而由基因控制的細(xì)胞主動死亡過程，是細(xì)胞內(nèi)在的決定動物發(fā)育和組織平衡的重要機制，是維持生物正常生理過程和功能活動所必須的，細(xì)胞凋亡是多細(xì)胞生物生命活動過程中不可缺少的組成內(nèi)容，貫穿于其全部生命周期［5］。但如果細(xì)胞過度凋亡則會引起一系列生理生化反應(yīng)紊亂，進(jìn)而引起機體受損，甚至導(dǎo)致動物死亡。研究表明，藍(lán)藻細(xì)胞提取物可引起多種細(xì)胞發(fā)生凋亡，其特征為細(xì)胞皺縮，染色質(zhì)濃縮，磷酸酰絲氨酸外露，并形成凋亡小體［6］。由于肝臟存在能轉(zhuǎn)運水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物的膽汁酸載體轉(zhuǎn)運系統(tǒng)(有機陰離子轉(zhuǎn)運系統(tǒng))，因此水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物具有極高的肝細(xì)胞選擇性和生物活性。如將實驗鼠通過腹腔或口服給藥暴露于水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物后，迅速引起其急性中毒。解剖發(fā)現(xiàn)實驗鼠肝臟腫大、彌漫性出血甚至壞死;其中肝臟形態(tài)學(xué)顯示，藍(lán)藻細(xì)胞提取物導(dǎo)致肝臟肝索結(jié)構(gòu)破壞，肝細(xì)胞間接觸降低;超微結(jié)構(gòu)顯示為肝臟線粒體腫脹，橋粒張力絲喪失，微絲網(wǎng)重組［7］。施瑋等［8］研究了藍(lán)藻細(xì)胞提取物對大鼠肝細(xì)胞凋亡生態(tài)毒理效應(yīng)的影響，結(jié)果表明，用含有 4，8，12 μg/(kg·d)MC的水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物經(jīng)腹腔注射染毒35 d后觀察到肝細(xì)胞增生活躍，并伴有凋亡或壞死樣表現(xiàn);掃描電鏡顯示，染毒后的肝細(xì)胞變得不規(guī)則，呈空洞樣變，并有特征性的胞膜泡出現(xiàn)。陳華等［9］用750 g/kg濕藻腹腔注射顫藻粗提物染毒小鼠，結(jié)果表明，小鼠生長緩慢，肝臟腫大，肝臟系數(shù)增高。染毒 3周后，實驗組小鼠肝質(zhì)量為(1.93±0.11)g，肝臟系數(shù)為6.11±0.20;對照組肝質(zhì)量為(1.59±0.19)g，肝臟系數(shù)為 4.33±0.34，有顯著性差異(P＜0.05)。肝臟病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，肝細(xì)胞變形、凋亡，甚至壞死，小葉靜脈充血，并伴隨有炎性細(xì)胞浸潤。張志勇等［10］用含有10 μg/mL MC的藍(lán)藻提取物處理原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)藍(lán)藻細(xì)胞提取物對原代培養(yǎng)大鼠肝細(xì)胞有明顯的毒作用，其主要作用方式是引起細(xì)胞凋亡。而凋亡的特征主要表現(xiàn)在:1)光學(xué)顯微鏡下，正常細(xì)胞個大、核圓且清晰，核色均勻，但經(jīng)藍(lán)藻細(xì)胞提取物處理后，一些細(xì)胞收縮、變圓、變小，核變得模糊，且出現(xiàn)許多大大小小的胞膜泡;2)熒光顯微鏡下，正常細(xì)胞核大且圓，核質(zhì)均勻，呈淡藍(lán)色，而經(jīng)藍(lán)藻細(xì)胞提取物處理后，有的細(xì)胞染色質(zhì)雖呈藍(lán)色，但收縮成條塊狀，分布于核的周邊，有的細(xì)胞核碎裂成小塊，細(xì)胞發(fā)生早期凋亡，還有的細(xì)胞核濃縮成致密球狀，并呈桔紅色，形成晚期凋亡細(xì)胞。據(jù)統(tǒng)計，凋亡細(xì)胞(包括早期和晚期)的百分比呈明顯的劑量和時間效應(yīng)關(guān)系。研究表明，在含不可檢測水平的藻毒素的情況下，藍(lán)藻細(xì)胞提取液對實驗鼠有肝細(xì)胞凋亡毒性［11］。

細(xì)胞的凋亡受多種因子控制，同時凋亡也是基因活動引起級聯(lián)反應(yīng)的結(jié)果，有多種因子和基因參與凋亡過程的起始和執(zhí)行。水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物引起肝細(xì)胞凋亡的機理主要認(rèn)為是藍(lán)藻細(xì)胞提取物進(jìn)入肝細(xì)胞后，能強烈抑制蛋白磷酸酶1(PP1)和蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)多種蛋白質(zhì)過磷酸化，因而打破了細(xì)胞內(nèi)蛋白磷酸化/脫磷酸化平衡，造成細(xì)胞內(nèi)一系列生理生化反應(yīng)紊亂，導(dǎo)致胞質(zhì)中微絲網(wǎng)重排，細(xì)胞結(jié)構(gòu)與穩(wěn)定性破壞，進(jìn)而引起肝細(xì)胞變形，甚至導(dǎo)致其凋亡和壞死［12］。Bcl-2家族蛋白在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用，是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵元件。Bcl-2和Bax均屬于Bcl-2家族，前者抑制凋亡，后者促進(jìn)凋亡［13］。有試驗表明［6］，藍(lán)藻細(xì)胞提取物同時誘導(dǎo)了Bcl-2表達(dá)下降和Bax表達(dá)升高。Bcl-2表達(dá)下降表明細(xì)胞對水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物的抗凋亡作用下降，而Bax表達(dá)升高說明其促凋亡作用加強，這些結(jié)果表明Bcl-2和Bax在水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡中起重要作用，同時也部分解釋了藍(lán)藻細(xì)胞提取物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機理。另外，p53基因，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3級聯(lián)反應(yīng)都被認(rèn)為在水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物致細(xì)胞凋亡過程中起著重要的調(diào)控作用［14-15］。研究表明，BRL-3A細(xì)胞暴露于10 nmol/L MC-LR的藍(lán)藻細(xì)胞提取物1 h后即可誘導(dǎo)p53蛋白表達(dá)升高，這充分說明p53蛋白在藍(lán)藻細(xì)胞提取物誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過程中起著重要作用［14］。現(xiàn)在一般研究認(rèn)為，藍(lán)藻細(xì)胞提取物主要通過線粒體途徑和氧化應(yīng)激途徑引起細(xì)胞凋亡［16］。

2 水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物對實驗鼠抗氧化防御系統(tǒng)的毒性效應(yīng)

活性氧(ROS)是一組主要包括超氧陰離子(O2-)、羥基自由基(·OH)、過氧化氫(H2O2)等在內(nèi)的自由氧基團(tuán)，其主要來源于線粒體的電子傳遞鏈，在外源毒物的致毒機制中起著重要作用。正常情況下，電子傳遞鏈可以使代謝物脫下的成對氫原子通過多種酶和輔酶所催化的連鎖反應(yīng)逐步傳遞，最終與氧結(jié)合成水，而毒物則通過破壞線粒體電子傳遞鏈的功能，使游離的氫增多，從而增加細(xì)胞內(nèi)ROS水平。大量ROS的產(chǎn)生可引起脂質(zhì)過氧化(LPO)，進(jìn)而破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)與功能，最終導(dǎo)致細(xì)胞崩解甚至死亡［17］。許多體內(nèi)外試驗均證實，藍(lán)藻細(xì)胞提取物能引起大量ROS在實驗鼠肝細(xì)胞內(nèi)生成，并進(jìn)而對肝臟產(chǎn)生毒性而發(fā)揮其致毒作用［10，18］。丙二醛(MDA)常被作為衡量LPO的標(biāo)準(zhǔn)，研究發(fā)現(xiàn)，MDA水平在藍(lán)藻細(xì)胞提取物染毒的大鼠肝腎內(nèi)明顯上升，同時所有抗氧化酶活力均有所下降，也表明了氧化應(yīng)激在藍(lán)藻細(xì)胞提取物引起的細(xì)胞毒性中發(fā)揮著重要作用［19］。

2.1 對臟器抗氧化酶活性的影響

各種抗氧化酶主要包括谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽還原酶(GR)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)等。研究發(fā)現(xiàn)，大鼠肝、腎的抗氧化酶活性在大鼠急性暴露于藍(lán)藻細(xì)胞提取物后都發(fā)生了改變，如以劑量為100和150 mg/kg的MC-LR的藍(lán)藻細(xì)胞提取物作用于大鼠24 h，48 h和14 d后，大鼠肝和腎內(nèi) GSH-Px，GR，SOD，CAT的活力都顯著降低，同時，肝和腎內(nèi)LPO水平明顯上升［9］。這表明藍(lán)藻細(xì)胞提取物有可能通過影響臟器各抗氧化酶的活力，導(dǎo)致ROS積累，從而造成氧化損傷而發(fā)揮其致毒作用。

2.2 對谷胱甘肽(GSH)含量和表達(dá)的影響

GSH含量在維持正常細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡過程中起著重要作用，它可以保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷。正常情況下，GSH在一定細(xì)胞或組織中含量相對穩(wěn)定，但是某些外來污染物或其代謝物可與其結(jié)合而引起其耗竭和表達(dá)，因此在這些毒物存在的情況下，會引起GSH消耗。研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)藻細(xì)胞提取物在不會造成細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變的濃度下(2和10 ng/mL)作用于大鼠肝實質(zhì)細(xì)胞，3 h后可使肝細(xì)胞內(nèi)的GSH水平顯著升高，而致使細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激并可能導(dǎo)致細(xì)胞損傷。另外，藍(lán)藻細(xì)胞提取物介導(dǎo)的DNA損傷與GSH水平有著緊密的關(guān)聯(lián)，例如，當(dāng)肝細(xì)胞內(nèi)GSH水平下降時，發(fā)現(xiàn)藍(lán)藻細(xì)胞提取物引起的DNA損傷也隨之不斷增加;而當(dāng)GSH水平恢復(fù)正常或超過正常水平時，則并沒有新的DNA損傷產(chǎn)生，而且即使是已經(jīng)發(fā)生的損傷這時也都被修復(fù)了［20］。

2.3 對熱激蛋白(Heat Shock Proein，HSP)70表達(dá)的影響

HSP是機體在應(yīng)激狀況下合成的一組高度保守的蛋白，對應(yīng)激損傷具有一定的保護(hù)作用，也是細(xì)胞對各種早期應(yīng)激反應(yīng)的標(biāo)志蛋白。HSP的產(chǎn)生主要原因為細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)的不穩(wěn)定，通常它的產(chǎn)生也是氧化應(yīng)激早期的一個標(biāo)志。包括微囊藻毒素在內(nèi)的許多化學(xué)物質(zhì)都可以引起HSP產(chǎn)生。其中HSP70是最重要、氧化應(yīng)激后表達(dá)量最高的HSP家族，同時其也是研究最為廣泛的HSP家族蛋白之一。在多種應(yīng)激狀態(tài)下，HSP70迅速表達(dá)。研究表明［21］，93.0 μg/kg的藍(lán)藻水華粗提物處理后小鼠肝臟的HSP70表達(dá)上升。研究還發(fā)現(xiàn)，含有半致死劑量(50.0 μg/kg)的MC-LR的藍(lán)藻細(xì)胞提取物作用于小鼠后，可以使小鼠的HSP70蛋白量顯著升高。同時，在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)，在藍(lán)藻細(xì)胞提取物作用后細(xì)胞內(nèi)的HSP70表達(dá)都有不同程度的上調(diào)。這些結(jié)果表明，在受到水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物脅迫時，HSP70表達(dá)上調(diào)可能主要是由于藍(lán)藻細(xì)胞提取物對細(xì)胞造成的氧化損傷，致使細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激而使其HSP70含量增多，同時，可為細(xì)胞受到藍(lán)藻細(xì)胞提取物的脅迫而產(chǎn)生的氧化應(yīng)激起到及時的指示作用。研究還表明，升高的HSP70可以提高細(xì)胞內(nèi)抗氧化物的穩(wěn)定性，從而增強細(xì)胞抗氧化損傷的能力，所以HSP70的上升同時又是細(xì)胞的一種自身防御機制。

3 水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物對實驗鼠的遺傳毒性效應(yīng)

研究表明，水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物具有一定的遺傳毒性［22］。Ding等［23］通過小鼠骨髓嗜染紅細(xì)胞微核試驗和小鼠精子畸形試驗，對太湖水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物的遺傳毒性進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示，1.25～125 μg/mL(以凍干藻細(xì)胞計)的太湖藍(lán)藻細(xì)胞提取物作用4 h，不僅能在染色體水平上影響細(xì)胞分裂增殖，還可直接作用于DNA分子并引起DNA分子移碼型突變而產(chǎn)生遺傳毒性，且其毒性有顯著的劑量-效應(yīng)關(guān)系。Bu等［24］研究了沸水浴提取的銅綠微囊藻毒素對昆明小鼠的胚胎毒性效應(yīng)，表明3.3 μg/kg MC-LR的微囊藻毒素粗提物不僅可減緩妊娠小鼠的生長，還可能引起其死亡和妊娠終止。處理組和對照組胎鼠體重、體長和尾長均有顯著差異，并由此得出結(jié)論:藍(lán)藻細(xì)胞提取物對小鼠孕期中和胚胎都有毒性效應(yīng)。Senogles-Derham等［25］研究了含有cylindrospermopsin的粗提物對孕期大鼠的致畸性，發(fā)現(xiàn)該粗提物能使大鼠早產(chǎn)，且生產(chǎn)的幼鼠體重顯著下降，胃腸道有血腫發(fā)生。有研究表明［26］，藍(lán)藻細(xì)胞提取物對大鼠生殖系統(tǒng)有嚴(yán)重?fù)p傷，使大鼠精子質(zhì)量下降，并影響到后代。

4 水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物對實驗鼠的促癌或致癌作用

隨著水體富營養(yǎng)化加劇而導(dǎo)致藍(lán)藻水華暴發(fā)，藍(lán)藻水華暴發(fā)產(chǎn)生的主要問題之一就是藻類所引起的水污染問題，其已越來越受到人們關(guān)注，其中飲用水藻類肝毒素污染，特別是藻毒素的促癌或致癌作用問題備受各國重視［27］。有資料表明，飲用水中的藻類肝毒素污染可能是除肝炎病毒和黃曲霉毒素以外導(dǎo)致肝癌的第3個重要原因［28］。我國江蘇啟東和海門地區(qū)的流行病學(xué)調(diào)查研究顯示，藍(lán)藻細(xì)胞提取物中的微囊藻毒素與當(dāng)?shù)氐母伟└甙l(fā)率呈一定的正相關(guān)關(guān)系［29］。藍(lán)藻細(xì)胞提取物的促癌或致癌作用主要是以微囊藻毒素的研究作為重點，研究也認(rèn)為微囊藻毒素主要通過使肝細(xì)胞過度增殖以致癌變，其機理最主要的是微囊藻毒素能抑制PP1和PP2A活性。PP1和PP2A主要催化絲氨酸/蘇氨酸蛋白去磷酸化，例如通過對促分裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)的去磷酸化，對MAPK途徑起負(fù)調(diào)控作用，而MAPK通路在癌癥的發(fā)病機理中起著重要作用。微囊藻毒素能與PP1和PP2A的催化亞基結(jié)合，抑制其活性，導(dǎo)致MAPK過度激活，使調(diào)控細(xì)胞增殖與凋亡的基因平衡失調(diào)，細(xì)胞生長失控而導(dǎo)致癌變［6］。另外，細(xì)胞過度增殖也是其癌變的主要原因之一。研究發(fā)現(xiàn)微囊藻毒素能通過誘導(dǎo)細(xì)胞增殖而致使其癌變。c-fos，c-jun是一類控制細(xì)胞增殖的早期反應(yīng)基因。微囊藻毒素能誘導(dǎo)肝細(xì)胞內(nèi)MAPK磷酸化水平升高而激活c-fos，c-jun等表達(dá)，推動肝細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期，使肝細(xì)胞無限增殖而導(dǎo)致癌變［30］。其次，原癌基因和抑癌基因的平衡失調(diào)，也是導(dǎo)致細(xì)胞過度增生而發(fā)生癌變的誘因之一。研究發(fā)現(xiàn)微囊藻毒素能調(diào)節(jié)與細(xì)胞增殖相關(guān)的原癌基因和抑癌基因的表達(dá)。例如，微囊藻毒素可上調(diào)肝細(xì)胞中原癌基因細(xì)胞核增殖抗原(PCNA)表達(dá)，而抑制抑癌基因P21WAF1的表達(dá)，進(jìn)而使病變細(xì)胞的細(xì)胞周期失控，無限制的增生而導(dǎo)致癌變［31］。胡志堅等［14］研究表明，p53基因也在藍(lán)藻細(xì)胞提取物促癌過程中起著重要的作用。長期、低濃度的MC暴露最大的潛在危害是提高相關(guān)人群的癌癥發(fā)病率，例如國內(nèi)外大量的動物試驗和流行病學(xué)資料表明，長期飲用低濃度MC污染的水與原發(fā)性肝癌、大腸癌和胃腸道腫瘤等疾病的高發(fā)率有關(guān)［29-30］。

5 水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物與單純藍(lán)藻毒素的毒理學(xué)效應(yīng)比較

研究表明，水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物的毒理學(xué)效應(yīng)與單純的微囊藻毒素的毒理學(xué)效應(yīng)有很大不同，一般認(rèn)為，藍(lán)藻細(xì)胞提取物的毒理學(xué)效應(yīng)要大于純微囊藻毒素的毒理學(xué)效應(yīng)。如 Keil等［32］發(fā)現(xiàn)藍(lán)藻Planktothrix agardhii NIVA 34的細(xì)胞水提取物(LC50為0.08 mg/mL)盡管不含有任何微囊藻毒素但與含有微囊藻毒素的藍(lán)藻Planktothrix的細(xì)胞粗提取物(LC50為0.46 mg/mL)相比卻有更高的毒性，且其毒性與其所用的提取溶劑有很大關(guān)系。Majstereka等［33］研究表明，藍(lán)藻細(xì)胞提取物對線粒體有更大的毒性，如含有1 nmol/L微囊藻毒素的藍(lán)藻細(xì)胞提取物就能使細(xì)胞色素C氧化酶活性降低，而1 μmol/L的純微囊藻毒素才能使細(xì)胞色素C氧化酶活性降低。水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物促癌或致癌的作用也是學(xué)術(shù)界研究的熱點和難點，目前的研究一般認(rèn)為藍(lán)藻細(xì)胞提取物具有一定的致癌作用，而單純的微囊藻毒素則主要是促癌作用。如施瑋等［8］研究了純微囊藻毒素、藻類提取物和藻細(xì)胞裂解液致突變性，結(jié)果顯示，3種純毒素全部表現(xiàn)為陰性，即純藻毒素不能夠造成大鼠原代肝細(xì)胞DNA損傷。藻類提取物和藻細(xì)胞裂解液卻能使程序外DNA合成增加而具有一定的致突變性。趙金明等［28］研究表明，微囊藻毒素單獨作用不能誘導(dǎo)谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GSTPi，反映肝細(xì)胞癌前病變的生物標(biāo)志物)mRNA及蛋白表達(dá)，微囊藻毒素單獨作用也不能使實驗組動物肝臟產(chǎn)生結(jié)節(jié)性增生灶，但能夠促進(jìn)二乙基亞硝胺(DEN)產(chǎn)生更多結(jié)節(jié)性增生灶并誘導(dǎo)GSTPi mRNA和蛋白表達(dá)，且具有一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系，而DEN也是在藍(lán)藻水華暴發(fā)后產(chǎn)生的污染物之一。另外，常規(guī)飲用水處理技術(shù)對水體中微囊藻毒素的消除也并不是很徹底，而且水體在氯化消毒過程中還會形成大量的氯化消毒副產(chǎn)物。研究表明［34］，飲水中氯化消毒副產(chǎn)物與微囊藻毒素共存時，存在二者協(xié)同促癌的可能性。另外在用原代培養(yǎng)的鼠肝細(xì)胞評價水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物毒性時發(fā)現(xiàn)，藍(lán)藻細(xì)胞提取物可以直接進(jìn)入原代培養(yǎng)的鼠肝細(xì)胞，單純的藻毒素則不能直接進(jìn)入原代肝細(xì)胞而導(dǎo)致毒性，這可能是由于藍(lán)藻細(xì)胞提取物中存在著協(xié)助微囊藻毒素進(jìn)入原代肝細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)，而且這些物質(zhì)與純藻毒素往往也有一些協(xié)同作用，因此藍(lán)藻細(xì)胞提取物的毒性要遠(yuǎn)大于純藻毒素的毒性［35］。

6 結(jié)語

水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物對實驗鼠具有較大的毒理學(xué)效應(yīng)，而作為具有潛在促癌或致癌活性的污染物，藍(lán)藻細(xì)胞提取物對生物有機體具有較大的健康危害性和風(fēng)險性，有必要對其進(jìn)行更為深入的研究。同時，水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物還有一定的免疫毒性［36］，在生殖器官［26］和長期生活于藍(lán)藻暴發(fā)區(qū)的漁民血液中都能檢測到［37］，表明對水華藍(lán)藻細(xì)胞提取物的毒理學(xué)效應(yīng)及其健康風(fēng)險評估還需進(jìn)一步深入研究。

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