華蟾素髂內動脈注入治療4-氨基雙聯苯誘發大鼠膀胱腫瘤的效果觀察

李雪梅

(荊楚理工學院醫學院，湖北 荊門 448000)

研究表明［1］，華蟾素具有低毒、高效和抗癌譜廣等優點，對環磷酰胺(CTX)所致的白細胞減少有防治作用，可提高機體免疫力和放化療療效，減輕化療藥物的毒性反應。膀胱腫瘤是泌尿外科最常見的腫瘤，化療是治療和預防腫瘤復發的重要手段之一，由于目前所用的化療藥物都有一定的毒性，故尋找一種有效、安全治療膀胱腫瘤的藥物具有重要意義。體外實驗證明［2，3］，華蟾素具有抗膀胱癌細胞增殖的作用。2010年3月～2011年3月，我們對用4-氨基雙聯苯成功誘發膀胱腫瘤的大鼠模型，經髂內動脈注入華蟾素，觀察其對大鼠膀胱腫瘤的治療效果。

1 材料與方法

1.1 主要實驗材料及動物分組 致癌劑4-氨基雙聯苯(武漢福德醫藥化工有限公司)，華蟾素注射液(安徽金蟾生化股份有限公司)。80只SD雌性大鼠(河北醫科大學實驗動物中心提供)，6～7周齡，重350～400 g。80只大鼠隨機分為正常組(正常對照，30只)和誘癌組(50只)。后者分為A、B組，各25只。

1.2 膀胱腫瘤模型建立及用藥方法 誘癌組采用4-氨基雙聯苯膀胱灌注法［4，5］建立膀胱腫瘤大鼠模型，其中A組不注入任何藥物，為病理對照;B組經皮穿刺髂內動脈注入華蟾素0.8 ml/次、每2周1次，總量 3.2 ml/只。

1.3 標本采集及觀察指標 于末次灌注后第6周處死各組動物，使其膀胱處于擴張狀態，完整切除，觀察其大體變化，在病變明顯處5點取材，光鏡觀察。另隨機選取各組5只大鼠的由髂內動脈供血的其他臟器如直腸和腎組織，進行組織學檢查。

2 結果

2.1 各組膀胱大體觀察 正常組大鼠膀胱黏膜呈光滑、有光澤的正常狀態。誘癌組中的A組膀胱壁可見結節狀腫物者5只，米粒樣乳頭狀者7只，菜花狀腫物者13只;B組中膀胱黏膜光滑如正常者5只，黏膜局部可見散在白色斑塊并有點狀出血者8只，黏膜增厚伴有局部隆起者14只。

2.2 各組膀胱鏡下檢查結果 正常組膀胱黏膜上皮由2～3層移行上皮細胞組成，細胞大小一致，扁平，核圓形、淺染，壁層排列正常。誘癌組中，A組膀胱黏膜表面瘤變、不光滑，壞死或有鈣鹽沉著，多乳頭粗短融合，癌細胞黏膜下浸潤，基質變性、出血、壞死;B組黏膜上皮細胞脫落、壞死，肌層和漿膜充血、水腫、壞死，并有急、慢性炎性細胞浸潤，癌細胞壞死。

2.3 兩組直腸、腎臟組織學檢查結果 兩組直腸和腎組織均無壞死，呈正常組織狀態。

3 討論

雖然手術是目前治療膀胱腫瘤最有效的辦法，但需與化療配合才能預防腫瘤的復發。目前應用的化療藥物均有較嚴重的毒性作用，尤其是對機體免疫功能的損害，限制了這些藥物的臨床應用。

祖國醫學認為華蟾蜍干蟾及華蟾蜍精具有超強抗癌活性、超強抑制癌細胞生長的作用，可增強放化療效果，減輕放化療不良反應。華蟾素主要抗癌成分為蟾素內酯素［6］。實驗證明［7］華蟾素對癌細胞DNA和RNA合成有顯著抑制作用，從而抑制癌細胞生長和增殖，且有提高機體免疫功能的作用［8］。華蟾素的抗膀胱腫瘤的作用機制可能有以下幾點［9，10］:①能抑制腫瘤細胞增殖，誘導腫瘤細胞分化凋亡，抑制血管內皮細胞生長;②顯著增強大鼠單核吞噬細胞的吞噬功能以及體液免疫功能，有效增強繼發性免疫功能低下小鼠的細胞免疫功能;③具有免疫調節作用。

因采用4-氨基雙聯苯誘導法建立膀胱腫瘤動物模型的方法簡單、致癌劑用量少、造模時間短［5］，故本實驗采用該方法建立大鼠模型。本實驗結果顯示，正常組膀胱黏膜正常，誘癌組中A組可見膀胱腫瘤，B組膀胱未見腫瘤生長，膀胱黏膜上皮細胞脫落、壞死，肌層和漿膜充血、水腫、壞死，并有炎性細胞浸潤，癌細胞壞死。可見華蟾素可導致膀胱腫瘤細胞缺血、缺氧及壞死。因此我們認為，華蟾素髂內動脈灌注對4-氨基雙聯苯誘發的大鼠膀胱腫瘤有明顯的治療作用。另外本實驗發現，髂內動脈供血的其他臟器如直腸和腎組織學檢查均無壞死現象，呈正常狀態，說明華蟾素髂內動脈灌注對膀胱以外的正常組織影響極小［11］。

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