腎癌根治術前后患者血清sB7-H4水平變化及意義

吳 巖，陳一鳴，程曉冬，施衛國，顧震華，董 堅，叢 軍

(1南京醫科大學附屬無錫第二醫院，江蘇無錫214002;2蘇州大學附屬第三醫院常州市第一人民醫院)

腎癌屬于免疫原性腫瘤，其生物學行為復發多變，即使是小腎癌仍有轉移的潛力。因此，尋找敏感標志物以早期發現、判斷預后及復發、指導個體化治療具有重要的臨床意義。B7-H4是B7家族成員，能通過抑制T細胞增殖、細胞因子的產生和細胞周期的進程來負性調控T細胞的免疫應答。目前已經發現B7-H4在多種腫瘤組織如腎細胞癌、卵巢癌、肺癌及子宮內膜癌等［1，2］中呈高表達，但有關血清可溶性B7-H4(sB7-H4)與腎癌關系的報道較少見。2007年3月～2010年10月，我們采用ELISA法檢測40例腎癌根治術前后患者血清sB7-H4水平，結合病理資料探討其臨床意義。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 40例腎癌患者(腎癌組)中，男26例，女14例;年齡19～79(53．23±17．02)歲。Ⅰ期23例，Ⅱ期12例，Ⅲ/Ⅳ期5例。無其他系統來源腫瘤及其他系統性疾病。均行腎癌根治術，病理診斷均為腎透明細胞癌。另選健康查體者13例為正常對照(對照組)，其中男8例、女5例，年齡22～49(31．03 ±10．56)歲。

1．2 sB7-H4檢測方法 兩組均采集清晨空腹靜脈血，腎癌組分別取術前2 h及術后2、24 h和7、30、90、180 d的靜脈血。血樣靜置1 h后分離血清，小量分裝，－70℃保存。采用ELISA雙抗體夾心法檢測兩組血清sB7-H4。所有樣本均在同一批次檢測，每個樣本設2個平行孔，取平均A值計算sB7-H4值。

1．3 統計學方法 采用SPSS13．0統計軟件。數據以±s表示，先行方差齊性檢驗，兩組間樣本均數比較用t檢驗，多組間樣本均數比較采用ANOVA檢驗，相關性分析用 Linear線性回歸分析法。α=0．05。

2 結果

2．1 兩組血清sB7-H4水平比較 對照組血清sB7-H4為(11．56 ±4．96)μg/L;腎癌組術前 2 h為(23．05 ±18．97)μg/L，術后 2、24 h 和 7、30、90、180 d時分別為(24．96 ± 19．42)、(23．63 ± 18．78)、(20．04 ± 17．03)、(15．08 ± 13．69)、(13．56 ±11．53)、(12．08 ± 9．02)μg/L。腎癌組術前血清sB7-H4水平明顯高于對照組(P＜0．05)，術后血清sB7-H4水平隨時間的推移逐漸下降(P均＜0．05)，其中術后30 d及以后下降最為明顯(P均＜0．05)。

2．2 復發腎癌患者血清sB7-H4值變化 腎癌組中有3例術后1～3個月復發，其sB7-H4水平于術后90、180 d 時分別為(37．56 ±5．46)、(36．76 ±9．36)μg/L，超過術前及術后未復發者(P均＜0．05)。

2．3 腎癌患者血清sB7-H4與腎癌臨床分期及癌灶最大徑值的相關關系 術后2 h，Ⅰ期腎癌患者血清sB7-H4水平為(13．24 ±9．08)μg/L，低于Ⅱ期的(26．99 ±10．89)μg/L 和 Ⅲ/Ⅳ期的(53．63 ±27．22)μg/L，Ⅱ期者顯著低于Ⅲ/Ⅳ者(P均 ＜0．01)，腎癌患者血清sB7-H4水平與腫瘤分期呈正相關(r=0．537，P ＜0．05)。

癌灶最大徑值為4、6、8、10 cm 者，其患者血清sB7-H4 水平分別為 9．98、20．12、33．25、40．08 μg/L，腎癌患者血清sB7-H4水平與癌灶最大徑值呈線性正相關(r=0．651，P ＜0．05)。

3 討論

腎癌早期發現、早期治療可獲得較好的效果。但目前早期診斷主要依賴于醫學影像檢查，缺乏其他有效的診斷措施。血清學腫瘤標志物作為目前許多腫瘤早期篩查方法，可使腫瘤監控及隨訪變得簡單易行。但腎癌血清標志物如血清淀粉樣蛋白(SAA)、碳酸苷酶Ⅸ(CAⅨ)及血管內皮生長因子(VEGF)等［3，4］，因缺乏特異性或在腎癌晚期才可檢測出，無法對腎癌作出早期診斷。

目前研究認為［5］，B7-H4具有抑制T細胞增殖、細胞周期進展以及細胞因子合成從而達到下調T細胞免疫功能的作用，使機體對于腫瘤細胞的免疫殺傷及免疫監視功能降低，為腫瘤的免疫逃逸創造了條件。多項實驗結果［1，2］表明，肝癌、卵巢癌、子宮內膜癌、前列腺癌等癌細胞及腫瘤相關巨噬細胞中B7-H4的表達均顯著高于正常人群。癌細胞中B7-H4的表達與其腫瘤臨床病理特征有關，B7-H4高表達的患者腫瘤復發率及病死率往往較高，預后較差［6］。我們認為，腎癌作為一種免疫原性腫瘤，能夠通過多種機制逃避機體的免疫監視，B7-H4在其中可能起到重要的作用。

有研究［7，8］表明，腎癌組織中 B7-H4 呈高表達。但對于血清sB7-H4與腎癌關系的研究則少有報道。本研究通過測定腎癌根治術患者手術前后血清sB7-H4水平，并與正常人進行比較，探討血清sB7-H4在腎癌診斷及預后評估等方面的臨床意義。本研究結果顯示，腎癌組血清sB7-H4水平顯著高于對照組，術前血清sB7-H4水平明顯高于術后，隨著術后時間的延長，患者血清sB7-H4水平逐步下降，但復發患者術后sB7-H4水平隨腫瘤的復發而增高(P均＜0．05)。血清sB7-H4水平與腎癌臨床分期及癌灶最大徑值呈正相關關系(r=0．537、0．651，P 均＜0．05)，提示腎癌患者血清sB7-H4基礎水平可能較正常人高，腎癌患者血清sB7-H4水平與其病情進展相關，檢測血清sB7-H4可用于腎癌的早期診斷及其預后和腫瘤復發等的判斷。sB7-H4主要表達在B細胞、巨噬細胞、成熟的樹突狀細胞和某些腫瘤細胞以及活化的T細胞，正常組織中B7-H4水平很低，術后隨訪其血清sB7-H4水平仍較正常人高，除去統計學誤差外，我們認為還可能與患者體內免疫系統仍相對活躍有關。

術后復發的腎癌患者sB7-H4水平明顯高于術前，提示腎癌復發導致體內腫瘤免疫逃避活躍，檢測血清sB7-H4對于預測早期腎癌轉移具有一定價值，但其特異性及敏感性比影像學確診能提前多長時間，還有待于大樣本研究。

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