系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清骨橋蛋白檢測及意義

周 蕾 杜曉敏 張宗芳 王坤坤

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種以多系統(tǒng)、多器官受累為特征的自身免疫性疾病，其病因及確切的發(fā)病機(jī)制尚未完全明了，已有的研究證實(shí)細(xì)胞因子參與SLE的病理過程[1]。骨橋蛋白（osteopontin，OPN）是近年來發(fā)現(xiàn)的一種促炎癥細(xì)胞因子，廣泛分布于細(xì)胞外液、炎癥部位和礦化組織的細(xì)胞外基質(zhì)中，通過調(diào)控炎癥基因表達(dá)，調(diào)節(jié)T/B淋巴細(xì)胞的分化和功能，參與免疫炎癥反應(yīng)，在多種自身免疫性疾病的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵性作用[2]。本研究通過檢測SLE患者血清OPN水平，并分析其與SLE病情活動、重要臟器受累的相關(guān)情況，初步探討SLE患者檢測血清OPN的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2008年11月—2009年12月于我院就診的SLE患者63例（SLE組），女57例，男6例，年齡14~63歲，平均（35±12）歲，病程7 d~20年，均符合1997年美國風(fēng)濕病學(xué)會修訂的SLE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)，且近6個月未使用糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑。依據(jù)SLE疾病活動指數(shù)(SLEDAI)將患者分為緩解組（0~8分）31例和活動組（≥9分）32例；根據(jù)腎功能、尿液分析及腎活檢結(jié)果分為腎臟損害組32例和無腎臟損害組31例；參照2000年美國胸科協(xié)會/歐洲呼吸協(xié)會（ATS/ERS）的肺間質(zhì)纖維化診斷標(biāo)準(zhǔn)將入選患者分為合并肺間質(zhì)病變（interstitial lung disease，ILD）組22例和未合并ILD組41例；根據(jù)心電圖、心臟彩色多普勒超聲檢查及心肌酶檢查，分為心臟損害組25例和無心臟損害組38例；根據(jù)SLE患者的血常規(guī)檢查結(jié)果將其分為合并血液系統(tǒng)損害組45例和無血液系統(tǒng)損害組18例。同期選取本院健康體檢者（對照組）20例，女15例，男5例，平均年齡（36±10）歲，無自身免疫性疾病病史，無心、肺、腎和血液系統(tǒng)疾病史。SLE組與對照組年齡（t=0.87）、性別構(gòu)成（χ2=1.24）比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。所有研究對象均知情同意。

1.2 方法 所有入選者均空腹靜脈采血3 mL，分離血清，-80℃保存待測。血清OPN水平的測定采用酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法，試劑盒為美國R&D System公司生產(chǎn)，操作按試劑盒說明進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 15.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。正態(tài)分布的計量資料以x ±s表示，組間比較采用t檢驗；非正態(tài)分布資料采用M（P25，P75）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本的秩和檢驗；相關(guān)分析采用Pearson或Spearman秩相關(guān)，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SLE患者與對照組血清OPN水平的比較 SLE組血清OPN水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01)；SLE各亞組間（活動組與緩解組、有無腎損害、有無血液系統(tǒng)損害、有無ILD及有無心臟損害）血清OPN水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05或P<0.01)，見表1。

2.2 SLE組OPN水平與臨床實(shí)驗室指標(biāo)之間的相關(guān)性分析 SLE患者的血清OPN水平與24 h尿蛋白、抗ds-DNA定量、SLEDAI評分呈正相關(guān)（P<0.05），與血小板、補(bǔ)體C3呈負(fù)相關(guān)（P<0.05），與免疫球蛋白IgG無相關(guān)性（P>0.05），見表2。

3 討論

OPN也稱為早期T淋巴細(xì)胞激活因子，是一種強(qiáng)大的單核/巨噬細(xì)胞趨化和黏附因子，可以吸引巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）向炎癥部位聚集，參與炎癥反應(yīng)和免疫損傷[3]，并促進(jìn)Th1細(xì)胞因子的表達(dá)和巨噬細(xì)胞分泌干擾素IFN-γ、IL-12等，從而促進(jìn)B細(xì)胞增殖和抗體的產(chǎn)生[4]。同時OPN能抑制NF-κB的活化，進(jìn)而抑制包括前B細(xì)胞、T細(xì)胞在內(nèi)的多種免疫細(xì)胞的凋亡[5]。因此，OPN通過影響多種細(xì)胞的功能參與免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)，與多種自身免疫性疾病的發(fā)生和疾病活動相關(guān)。

表1 SLE組與對照組及SLE各亞分組血清OPN水平的比較 （μg/L，x ±s）

表 2 SLE組OPN水平與實(shí)驗室指標(biāo)之間的相關(guān)性分析

SLE是一種病因未明由免疫機(jī)制介導(dǎo)的自身免疫性疾病，T/B淋巴細(xì)胞的活化失調(diào)，特別是Th1占優(yōu)勢在SLE的發(fā)生及其臟器損害中起重要作用。本研究結(jié)果顯示SLE患者血清OPN水平高于正常對照組，且SLE疾病活動組OPN水平高于緩解組，提示OPN參與了SLE患者的免疫損傷和炎癥形成機(jī)制。OPN在SLE中的作用機(jī)制尚不明確。已有的研究表明，OPN可以與T細(xì)胞表面的整合素CD44和αvβ3相互作用，誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞的激活及遷移[6]，增強(qiáng)Th1細(xì)胞因子的表達(dá)；而且OPN可以促進(jìn)DCs的激活、遷移，并且誘導(dǎo)其向Th1的極化成熟，而DCs表達(dá)的細(xì)胞內(nèi)OPN同樣具有調(diào)節(jié)促炎細(xì)胞因子表達(dá)作用，并且能夠影響Th1細(xì)胞系的分化[7]，在SLE的發(fā)病過程中起著極其重要的作用。OPN在體液免疫中同樣發(fā)揮了重要的調(diào)節(jié)作用。Lizuka等[8]研究顯示OPN轉(zhuǎn)基因小鼠腹腔中的B淋巴細(xì)胞數(shù)量及血漿中的免疫球蛋白滴度均較野生小鼠有顯著升高。本研究結(jié)果顯示SLE患者的血清OPN水平與抗ds-DNA滴度成正相關(guān)，抗ds-DNA是由活化的B淋巴細(xì)胞直接產(chǎn)生的，表明血清中高水平的OPN使B淋巴細(xì)胞高度活化從而產(chǎn)生大量自身抗體，提示OPN參與了SLE的異常體液免疫反應(yīng)。

SLE可累及多個系統(tǒng)和器官，其中腎臟是最為常見的受累器官之一。本研究顯示SLE合并腎臟損害組血清OPN水平明顯高于無腎臟損害組，且血清OPN水平與24 h尿蛋白定量成正相關(guān)。已經(jīng)證實(shí)狼瘡腎炎患者的腎小管OPN mRNA和蛋白表達(dá)明顯升高[9]，用抗OPN抗體治療實(shí)驗性模型鼠新月體腎炎，可減少巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的浸潤，減少尿蛋白，部分逆轉(zhuǎn)腎功能[10]，提示OPN在SLE腎損害形成中起重要作用，并且與腎臟損傷的嚴(yán)重程度相關(guān)，血清OPN水平對SLE合并腎臟損害的診斷和腎損害程度的監(jiān)測有一定的價值。

SLE合并ILD常起病隱匿，病變早期容易被忽視，隨病情進(jìn)展，晚期進(jìn)展為肺間質(zhì)纖維化、肺動脈高壓，嚴(yán)重者可因呼吸衰竭而死亡。本研究結(jié)果顯示SLE合并ILD患者血清OPN明顯升高，與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎合并ILD的研究結(jié)果一致[11]。OPN作為一種促纖維化細(xì)胞因子在肺泡炎階段開始表達(dá)，其水平持續(xù)升高，在纖維化階段達(dá)高峰。在急性肺損傷階段，OPN直接由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的氧化亞氮誘導(dǎo)產(chǎn)生；而在肺纖維化階段，活化的肺成纖維細(xì)胞是OPN的主要來源[12]。

此外，本研究結(jié)果顯示，SLE合并有心臟損害組血清OPN水平明顯高于無心臟損害組，有血液系統(tǒng)損害組的血清OPN水平明顯高于無血液系統(tǒng)損害組，提示OPN可能參與了SLE患者RBC破壞的病理過程，其中的機(jī)制尚不清楚，有待深入研究。

綜上所述，OPN作為體內(nèi)重要的細(xì)胞因子和趨化因子，可能在SLE疾病發(fā)生和系統(tǒng)損害形成中起重要作用。對OPN的深入研究有利于對SLE發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識，并且OPN將有可能成為一個新的評價SLE疾病狀態(tài)的生物學(xué)標(biāo)志物。

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