復方醋酸地塞米松乳膏含量測定方法的改進

黃 波，姜武民，吉祥波

復方醋酸地塞米松乳膏為腎上腺皮質(zhì)激素藥，是臨床常用皮膚科外用制劑，臨床用于皮炎、慢性濕疹、銀屑病、脫發(fā)及白癜風等的治療［1-2］，收載于《中國藥典》2010版二部，其醋酸地塞米松含量測定方法采用的是HPLC內(nèi)標法，需要內(nèi)標物質(zhì)甲睪酮［3-4］，且供試品溶液制備操作繁瑣、費時。為簡化操作步驟、更有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，筆者對藥典規(guī)定方法進行了改進，改進后的外標方法簡便、快速、專屬性強，適合大批量樣品處理。

1 儀器與試劑

島津LC-20AT高效液相色譜儀;色譜柱:Diamonsil C18色譜柱(4.6 mm ×250 mm，5 μm)，電子分析天平，恒溫水浴鍋等。醋酸地塞米松對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號:100122-200805)，甲睪酮對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號:0172-9702)，復方醋酸地塞米松乳膏(湖北恒安藥業(yè)有限公司提供，批號:100605、100807-100816)，甲醇為色譜純，其他試劑均為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 對照品溶液的制備 精密稱定醋酸地塞米松對照品12.89 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2 供試品溶液的制備 取醋酸地塞米松乳膏約1.8 g(約相當于醋酸地塞米松1.35 mg)，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇適量，在80℃水浴中，加熱使醋酸地塞米松溶解，冷至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻2 h以上，取出后迅速濾過，取續(xù)濾液即得。

2.3 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 色譜柱為Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm，5 μm);以甲醇-水(70∶30)為流動相;檢測波長為240 nm;流速:1.0 mL/min。理論板數(shù)按醋酸地塞米松峰計算應(yīng)不低于2 000，醋酸地塞米松峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于1.5。進樣體積為20 μL。其對照品、供試品的色譜圖分別見圖1和圖2。

圖1 對照品色譜圖

圖2 供試品色譜圖

2.4 線性關(guān)系考察 精密稱定醋酸地塞米松對照品12.89 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為標準儲備液。分別精密量取0.2、0.5、0.8、1.0、1.2 和 1.5 mL 標準儲備液，置10 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。分別取上述溶液20 μL，注入液相色譜儀，記錄液相色譜圖，以質(zhì)量濃度(μg/mL)為橫坐標(X)、峰面積為縱坐標(Y)進行線性回歸，得回歸方程:Y=41 640 364.3 X+15 051.9，r=0.999 9(n=6)，表明醋酸地塞米松在5.16～38.67 μg/mL之間線性關(guān)系良好［5］。

2.5 精密度實驗 精密吸取“2.1”項下對照品溶液20 μL，連續(xù)進樣6次，測定結(jié)果醋酸地塞米松平均峰面積為1 077 794.75，其RSD為0.18%。

2.6 穩(wěn)定性實驗 精密稱定100605批號的樣品，照“2.2”項下方法制備供試品溶液，分別在0、2、4、8、12 h進樣，測定醋酸地塞米松的平均峰面積為1 121 888.51，RSD為0.23%，表明供試品溶液在12 h 內(nèi)穩(wěn)定［6］。

2.7 重復性實驗 精密稱定同一批號(100605)樣品6份，照“2.2”項下方法制備供試品溶液，按上述液相條件測定。結(jié)果醋酸地塞米松平均含量為101.55%，其RSD為0.24%(n=6)。

2.8 加樣回收率實驗［7］精密稱定100605批號的樣品6份，分別精密加入醋酸地塞米松對照品溶液5 mL(C=0.257 8 mg/mL)，照“2.2”項下供試品溶液制備方法制備及上述色譜條件測定，計算加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率實驗結(jié)果

2.9 樣品含量測定 分別取10個批號的樣品，按“2.2”項下方法制備供試品溶液，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按外標法測定;另取同批號樣品，按《中國藥典》2010版二部方法制備供試品溶液，取甲睪酮加甲醇溶解制備內(nèi)標溶液，另依法制備對照品溶液［3-4］，精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按內(nèi)標法測定。兩種方法測定結(jié)果見表2。

表2 醋酸地塞米松兩種方法測定結(jié)果(%，n=6)

3 討論

有研究者曾隨機選取藥典中8個內(nèi)標法測定樣品含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，內(nèi)標法均不能提高分析精度［8］。《中國藥典》2010版二部和2005版二部收載的復方醋酸地塞米松乳膏含量測定方法均為HPLC內(nèi)標法，需要內(nèi)標物質(zhì)甲睪酮，且供試品溶液制備操作繁瑣、費時。筆者在實踐過程中摸索了醋酸地塞米松含量測定的外標方法，無需內(nèi)標物質(zhì)，其供試品制備也較為簡便，通過對改進方法的方法學驗證，發(fā)現(xiàn)改進后的外標方法可以替代中國藥典規(guī)定的內(nèi)標法用于復方醋酸地塞米松乳膏的質(zhì)量控制。

［1］ 黃巧玲，王維，謝愛麗.高效液相色譜法測定復方醋酸地塞米松搽劑中醋酸地塞米松的含量［J］.醫(yī)藥導報，2008，27(7):848-849.

［2］ 姜輝，徐興亞.醋酸地塞米松搽劑質(zhì)量控制及療效觀察［J］.實用藥物與臨床，2010，13(1):36-38.

［3］ 中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典.二部［S］.北京:化學工業(yè)出版社，2005:593.

［4］ 中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典.二部［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:426.

［5］ 王震紅，楊永剛.碳酸利多卡因注射液含量測定方法的改進［J］.中國藥品標準，2010，11(1):42-43.

［6］ 顧偉鷹，張和平，黃偉芬，等.復方醋酸地塞米松搽劑的含量測定［J］.藥學實踐雜志，2005，23(3):167-169.

［7］ 袁建平，李文德.HPLC法測定眼藥水中的地塞米松磷酸鈉及分解產(chǎn)物［J］.現(xiàn)代應(yīng)用藥學，1995，12(3):35.

［8］ 張哲峰.色譜法在藥品研發(fā)中的應(yīng)用及常見問題分析［EB/OL］.http://www.anhuipharm.com.cn/display.asp?id=415［2007-7-28］.