老年2型糖尿病患者中同型半胱氨酸與炎癥相關細胞因子的檢測

朱建一 呂志剛 史恒川

心腦血管、外周血管疾病以及糖尿病微血管并發癥是2型糖尿病(T2DM)患者死亡和殘疾的最常見原因［1］。目前人們認為T2DM存在著細胞因子介導的炎癥反應，炎癥在T2DM的發病機制中起媒介作用［2］。有研究發現同型半胱氨酸(Hcy)可以引起炎癥和動脈硬化反應，是各種動脈粥樣硬化性疾病的獨立危險因素［3］。本研究測定了腎功能正常的老年T2DM大血管病變患者血清總同型半胱氨酸(tHcy)與不同類型的炎癥相關細胞因子，探討炎癥對T2DM大血管病變的作用以及tHcy對該過程的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對象 所有對象均選自江蘇省省級機關醫院2008年8月至2009年3月住院及門診患者。135例T2DM患者中男79例，女56例，年齡61～75歲，平均(64.9±4.1)歲。所有患者均排除1型DM、嚴重肝臟疾病、合并胃腸道、肝、神經系統、血液系統等嚴重的全身性疾病，且最近6月內未服用過B族維生素和葉酸。大血管病變判斷標準［4］:(1)有明確的冠心病或高血壓病史或腦梗死病史;(2)有血管疾病導致的相應體征，如間歇性跛行和(或)外周血管搏動消失等;(3)外周血管多普勒檢查顯示動脈粥樣硬化斑塊或血栓形成。具體分組如下:T2DM無血管并發癥組(NDC組)71例，男42例，女29例，年齡61～74歲，平均(65±3.9)歲;T2DM合并大血管病變組(DC組)64例，男37例，女27例，年齡60～75歲，平均(65±4.3)歲;正常對照組(CTR組)32例均為正常體檢人群，年齡60～68歲，平均(64±4.8)歲。

1.2 檢測方法 所有檢測對象均在禁食8～12 h后，坐位清晨空腹取靜脈血5 ml，分離血清后－20℃保存備用;采用酶聯免疫吸附試驗(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法測定Hcy(試劑為美國BPB公司產品，已提供標準物和質控物，靈敏度0.2 μmol/L)，參考范圍5～15 μmol/L;采用ELISA法測定炎癥相關細胞因子白細胞介素 2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-18和γ-干擾素(INF-γ)。所有試劑均購自深圳晶美生物有限公司，均嚴格按試劑盒使用說明書進行操作，質控物測定結果誤差在允許范圍之內。

1.3 統計學處理 使用統計軟件SPSS 13.0對數據進行統計分析。數據以±s表示，組間差異比較采用t檢驗，多組組間均數比較用方差分析和q檢驗，組間率的比較應用卡方檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。相關資料采用相關分析法計算相關系數，并進行多元logistic回歸分析。

2 結果

2.1 各組測定各項指標 與CTR組比較，T2DM患者血清 tHcy、IL-2、IL-6 、IL-8 、IL-18、和 INF-γ 顯著升高，IL-10顯著降低(P ＜0.05)。DC 組 tHcy、IL-6、IL-8、IL-18和INF-γ顯著高于NDC組(P＜0.05)。見表1。

表1 各組標本測定結果(±s)

表1 各組標本測定結果(±s)

注:與CTR組比較，*P＜0.05;與NDC組比較，△P＜0.05

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2.2 T2DM患者中正常tHcy組與高tHcy組的細胞因子水平 以15 μmol/L為分界點，將患者分為高tHcy組和正常tHcy組。結果如表2所示，2組年齡、性別、IL-2、IL-10、INF-γ 均無顯著差異(P ＞ 0.05)，而 2 組間IL-6、IL-8、IL-18存在顯著差異(P＜0.05)。卡方檢驗顯示，2組T2DM患者合并大血管病變比例也有統計學顯著差異(P＜0.05)。見表2。

表2 DM患者中血清正常tHcy組和高tHcy組間各指標的比較±s)

表2 DM患者中血清正常tHcy組和高tHcy組間各指標的比較±s)

注:與正常tHcy組比較，*P＜0.05

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2.3 T2DM患者中細胞因子與血清tHcy相關性分析

多元線性分析結果顯示IL-6、IL-8、IL-18與tHcy呈正相關(r=0.33、0.49 、0.27，P ＜0.01、0.01、0.05)，IL-2、IL-10、INF-γ 與 tHcy之間無明顯相關性。

3 討論

目前普遍認為動脈粥樣硬化是一種特殊的慢性炎癥過程，糖尿病同樣存在炎癥反應的激活現象［5］。臨床研究和流行病學調查顯示，血漿tHcy水平與動脈粥樣硬化性心腦大血管疾病之間存在著較強的相關性，為動脈粥樣硬化的獨立危險因素［6］。我們先前的研究也表明，tHcy水平高的T2DM患者合并大血管病變比例顯著大于tHcy水平正常的T2DM患者［7］。

本研究表明合并大血管病變的T2DM患者血清IL-6、IL-8、IL-18與tHcy較正常對照組及無大血管病變的T2DM患者均增高，提示IL-6、IL-8、IL-18和tHcy與T2DM大血管并發癥相關。既往體外試驗顯示內皮細胞或平滑肌細胞的IL-8受體介導了IL-18的信息傳導并通過釋放IL-6及IL-8誘導動脈粥樣硬化的生成。

因此，血漿IL-18增高可能促進T2DM患者的動脈粥樣硬化的發生。T2DM患者血漿IL-18水平顯著增高，但增高的機制還不明確。目前還沒有實驗證實IL-18與Hcy的因果關系，推測可能是高濃度的Hcy刺激了單核巨噬細胞釋放IL-18增多。

Hcy促進IL-6釋放的同時也能明顯增加IL-6 mRNA的表達，增加DNA轉錄而導致翻譯的蛋白質增加，在轉錄水平調控IL-6的產生;高濃度的Hcy在損傷血管內皮細胞的同時也刺激其釋放IL-8，而IL-8作為一種細胞炎性因子，在動脈粥樣硬化中發揮重要作用，該結果有利于支持動脈粥樣硬化是一個炎性過程的學說［8-10］。

綜上所述，Hcy和炎癥相關細胞因子的檢測有可能對T2DM患者的血管病變起輔助診斷作用，有利于提高患者的生活質量。

［1］聶義珍，張一娜，武小微.老年糖尿病死亡病例分析［J］.實用老年醫學，2008，22(4):272-274.

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［3］Schini-Kerth VB.Homocysteine， a proinflammatory and proatherosclerotic factor:role of intracellular reactive oxygen species［J］.Circ Res，2003，93(4):271-273.

［4］谷偉軍，陸菊明，楊國慶，等.同型半胱氨酸硫內酯與2型糖尿病大血管病變的相關性研究［J］.中國實用內科雜志，2007，27(17):1356-1359.

［5］王海瀾，楊濤，賀麗，等.2型糖尿病與炎性細胞因子相關性的臨床研究［J］.中國煤炭工業醫學雜志，2008，11(5):628-629.

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［7］朱建一，呂志剛，史恒川.同型半胱氨酸對老年2型糖尿病患者大血管病變的影響［J］.實用老年醫學，2010，24(2):135-137.

［8］張銘，陳懷生，楊大春，等.同型半胱氨酸對血管內皮細胞的氧化應激損傷及對IL-8分泌的影響［J］.心臟雜志，2005，17(5):450-452.

［9］楊大春，周興文，速曉華，等.同型半胱氨酸對血管內皮細胞E-選擇素、IL-6分泌的影響［J］.心臟雜志，2006，18(1):57-59.

［10］南靜，鄧華聰.白細胞介素8在糖尿病大血管病變發生發展中的作用［J］.中國動脈硬化雜志，2008，93(8):656-658.