經肝動脈移植hUCMSCs對失代償期肝硬化患者血清PA及CHE的影響

杜永國，何 晶，周 云，周貴忠，林 洪，賀東平，何秀清，胡 祥，李偉林

(1海南省農墾總醫院，海口570311;2深圳市北科細胞工程研究所)

失代償期(Child B或C級)肝硬化患者的肝臟合成、解毒能力等顯著下降，提高其正常肝細胞數量是解決終末期肝功能衰竭的關鍵。近年來，干細胞肝移植在終末期肝硬化臨床治療中取得一定成果，但臍帶間充質干細胞(hUCMSCs)對失代償期肝硬化患者肝臟儲備功能的影響目前鮮見臨床報道。2009年1月～2010年12月，我們觀察了經肝動脈移植hUCMSCs對失代償期肝硬化患者血清前白蛋白(PA)及膽堿酯酶(CHE)的影響。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 同期于我院住院的失代償期肝硬化患者50例，男41例，女9例;年齡29～67歲，平均53歲。診斷均符合2000年病毒性肝炎防治方案診斷標準［1］，其中乙型肝炎肝硬化45例、丙型肝炎肝硬化5例。將50例患者隨機分治療組及對照組各25例，其一般資料具有可比性。

1.2 治療方法 兩組均予常規護肝及抗肝纖維化治療。治療組在此基礎上經肝動脈移植hUCMSCs:患者術前1 d做碘過敏試驗、雙側腹股溝備皮，X線透視下經股動脈插管至肝固有動脈，注射造影劑，觀察肝內血管情況及有無占位病變，經插管注入hUCMSCs懸液1 ml(深圳市北科細胞工程研究所提供，鏡下干細胞數達1.0×107～108/ml)，穿刺點加壓包扎，術后8 h插管側髖關節限制活動，臥床休息24 h，進行肝動脈導管治療后常規護理;間隔半個月后再行第2次hUCMSCs輸注。

1.3 相關指標觀察 ①血清PA及CHE:兩組均于治療前及治療后2、4、6、8周分別抽取空腹靜脈血，采用免疫透射比濁法檢測血清PA及CHE。②觀察不良反應發生情況。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件進行統計學處理。計量數據以±s表示，行t檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 血清PA及CHE 兩組不同時間點血清PA見表1，血清CHE見表2。

表1 兩組不同時間點血清PA比較(n=25，mg/L，±s)

表1 兩組不同時間點血清PA比較(n=25，mg/L，±s)

組別 治療前 治療第2周 治療第4周 治療第6周 治療第8周治療組 25.17±11.76 37.42±12.11 49.33±10.69 66.63±13.01 83.57±18.16對照組 24.21±12.31 36.63±14.57 47.94±16.53 56.07±14.77 60.02±15.34 t值 0.282 0.208 0.353 2.682 4.953 P值 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.01

表2 兩組不同時間點血清PA比較(n=25，U/L，±s)

表2 兩組不同時間點血清PA比較(n=25，U/L，±s)

組別 治療前 治療第2周 治療第4周 治療第6周 治療第8周治療組 1 764.6±670.9 2 170.5±591.8 2 506.7±633.1 2 801.1±701.4 3 176.5±721.3對照組 1 806.3±593.4 1 931.5±601.1 2 198.8±587.6 2 306.7±650.2 2 501.5±657.4 t值 0.236 0 1.416 6 1.782 3 2.584 6 3.458 2 P值 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.01

2.2 不良反應 均無過敏、消化道癥狀加重、肝區疼痛、出血等并發癥發生，僅治療組術后1例出現輕度發熱(體溫37.8℃)。

3 討論

晚期肝病的治療臨床主要以保肝、對癥及預防并發癥為主，其中終末期肝病的治療總體效果不佳。近年來，肝移植已成為終末期肝病最理想的治療選擇，但供體緊缺、移植后免疫排斥反應及高額治療費用等限制了其臨床應用。hUCMSCs是具有自我更新和分化能力的細胞，其增殖及定向分化具有巨大應用潛能。國內外動物試驗均證實hUCMSCs具有誘導分化為肝臟細胞的能力，且具備肝細胞功能和作用，已成為細胞生物學及整個生命科學的研究熱點。研究表明，間充質干細胞是一種多潛能干細胞，不僅支持造血系統，還可向中胚層和外胚層來源的組織細胞分化，在一定實驗條件控制下可分化為肌細胞、成骨細胞、脂肪細胞、神經細胞、肝細胞、心肌細胞等［2，3］。高蕾等發現，hUCMSCs 能向肝細胞分化［4］，且來源廣泛、采集方便、無倫理學問題。

白蛋白(Alb)與PA均在肝臟合成，其中Alb半衰期較長，肝臟停止合成Alb后8 d外周血Alb濃度僅降低約20%，故血清Alb檢測不能敏感地反映早期肝臟損害;PA半衰期較短(約1.9 d)，其在肝臟受損、肝臟合成能力下降或肝臟修復、合成能力提高時均可迅速于外周血中檢測出來，可作為反應肝臟合成能力及儲備能力的指標［5］。CHE亦稱假性膽堿脂酶，是由肝臟合成后釋放到血液的非特異性脂酶，存在于肝、胰、子宮、中樞神經白質等處，是血漿固有酶。CHE半衰期約為10 d，能敏感而特異性反映肝臟合成代謝功能，其水平檢測是評價肝細胞合成蛋白功能的靈敏指標［6］。本研究顯示，治療后6、8周治療組血清PA及CHE均顯著高于對照組。提示經肝動脈輸注hUCMSCs可顯著提高失代償期肝硬化患者的近期肝臟合成、儲備功能?？赡軝C制為hUCMSCs在肝內可轉化為肝細胞，并發揮肝細胞作用，同時刺激并促進原位肝細胞生長。

綜上所述，經肝動脈移植hUCMSCs可顯著改善失代償期肝硬化患者近期肝臟合成、儲備功能;遠期效果尚需進一步研究觀察。

［1］中華醫學會傳染病與寄生蟲病分會、肝病學分會.病毒性肝炎防治方案［J］.中華肝臟病雜志，2000，8(1):324-329.

［2］Erices A，Conget P，Minguell JJ，et al.Mesenchymal progen-itor cels in human umbilical cord blood［J］.Br J Haematol，2000，109(1):235-242.

［3］Lee OK，Kuo TK，Chen WM，et al.Isolation of multpotent mesenchymal stem cells from umbilical cord blood［J］.Blood，2004，103(5):1669-1675.

［4］高蕾，劉吉勇，裴慶山，等.人臍血間充質干細胞向肝細胞樣細胞的分化［J］.山東大學學報(醫學版)，2008，46(12):1141-1144.

［5］張成義，齊承義，印永紅，等.12種血漿蛋白在肝炎、肝硬化中臨床意義的比較［J］.安徽醫學，1992，13(6):6-8.

［6］張衛衛，王學清，李巖.血清前白蛋白、膽堿酯酶對判斷肝硬化患者肝儲備功能及預后的臨床價值［J］.中國實用內科雜志，2002，22(11):673-674.