遠(yuǎn)志炮制品的穩(wěn)定性影響因素考察

王啟林， 房敏峰， 吳 洋， 楊曉東， 王亞洲

(西部資源生物與現(xiàn)代生物教育部重點實驗室西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，陜西西安 710069)

影響因素試驗是在劇烈條件下探討藥物的穩(wěn)定性，了解影響其穩(wěn)定性的因素及所含成分的變化情況。為制劑處方設(shè)計、工藝篩選、包裝材料和容器的選擇、貯存條件的確定、有關(guān)物質(zhì)的控制提供依據(jù)。遠(yuǎn)志為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志Polygala tenuifoliaWilld.或卵葉遠(yuǎn)志P.sibiricaL.的干燥根。性溫，味苦、辛，具有安神益智、祛痰消腫的功能，用于心腎不交引起的失眠多夢、健忘驚悸，神志恍惚，咳痰不爽，瘡瘍腫毒，乳房腫痛［1］。有效成分包括皂苷、黃酮及寡糖酯等［2］，其中皂苷具有多種藥理活性［3－6］。遠(yuǎn)志臨床常用炮制品，但“制過不可陳久”［7］，說明使用遠(yuǎn)志炮制品應(yīng)在一定期限內(nèi)，而有關(guān)研究尚未見報道。因此，本文參考2010年版《中國藥典》的有關(guān)指標(biāo)，對遠(yuǎn)志的3個臨床常用炮制品進行了影響因素考察，為確定飲片包裝和貯藏提供依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 儀器

島津LC－10AT vp高效液相色譜儀，SPD－10A vp紫外檢測器，SHIMADZU CBM－102色譜工作站，日本島津公司;101－1A型電熱鼓風(fēng)干燥箱，上海市實驗儀器總廠;SPX－250B－G型光照培養(yǎng)箱，上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;KQ－500DE型超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司;HC－3018高速離心機，科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司;FA2004萬分之一電子天平，上海良平儀器儀表有限公司。

1.2 試藥

遠(yuǎn)志酸對照品(批號:091001，經(jīng)歸一化法測得純度為98.5%)，購自上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司;遠(yuǎn)志、甘草和蜂蜜均購自西安市藥材市場，經(jīng)西北大學(xué)王瑪麗教授鑒定，遠(yuǎn)志為遠(yuǎn)志科植物遠(yuǎn)志Polygala tenuifoliaWilld.的干燥根，甘草為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.的干燥根及根莖，蜂蜜為槐花蜜，散裝，用前煉制成中蜜。乙腈為色譜純，水為重蒸水。

1.3 飲片制備

參考《中國藥典》(2010版一部)方法制備遠(yuǎn)志3個規(guī)格的炮制品。

遠(yuǎn)志:取原藥材，除去雜質(zhì)，略洗，潤透，切段，干燥。

制遠(yuǎn)志:取甘草，加適量水煎煮兩次，合并煎液濃縮至甘草量的10倍，再加入凈遠(yuǎn)志，用文火煮至湯被吸盡，取出，干燥。每100 kg遠(yuǎn)志段，用甘草6 kg。

蜜遠(yuǎn)志:取煉蜜，加入適量開水稀釋后，淋于遠(yuǎn)志段中，拌勻，稍悶，置鍋內(nèi)，用文火炒至蜜被吸盡，藥色深黃，疏散不粘手為度，取出，放涼。每100 kg遠(yuǎn)志段，用煉蜜25 kg。

2 方法與結(jié)果

2.1 影響因素試驗［8－9］

2.1.1 高濕試驗 取不同規(guī)格的遠(yuǎn)志飲片各3批，分別平攤在培養(yǎng)皿里，厚度≤5 mm(一層)，開口置于恒濕密閉干燥器中，于25℃、相對濕度(75±5)%條件下敞口放置10 d。分別于第5、10天取樣，考察性狀、水分、總灰分、醇浸出物和遠(yuǎn)志酸含量的變化。

2.1.2 高溫試驗 取不同規(guī)格的遠(yuǎn)志飲片各3批，分別平攤在培養(yǎng)皿里，厚度≤5 mm，開口置于有蓋方盤內(nèi)，于干燥箱中40℃放置10 d。分別于第5、10天取樣，考察性狀、水分、總灰分、醇浸出物和遠(yuǎn)志酸含量的變化。

2.1.3 強光照射試驗 取不同規(guī)格的遠(yuǎn)志飲片各3批，分別平攤在培養(yǎng)皿里，厚度≤5 mm，開口置于光照培養(yǎng)箱中，在25℃、光照強度4500Lx下放置10 d。分別于第5、10天取樣，考察性狀、水分、總灰分、醇浸出物和遠(yuǎn)志酸含量的變化。

2.2 一般考察指標(biāo)

2.2.1 性狀 按3批樣品實際觀察結(jié)果描述。結(jié)果見表1。

表1 3種遠(yuǎn)志飲片在不同試驗條件下的性狀變化

從表1可見，濕度對飲片性狀影響較為明顯，特別是蜜遠(yuǎn)志，飲片表面在高濕環(huán)境下變得粘連，色澤暗淡。

2.2.2 水分 取樣品粉末2 g，平鋪于干燥至恒重的稱量瓶，厚度不超過5 mm，精密稱定，打開瓶蓋于100℃干燥5 h，移至干燥器中冷卻30 min，精密稱定，再在上述溫度干燥1 h，冷卻稱重，至連續(xù)兩次稱重差異不超過5 mg，根據(jù)減失的重量，計算樣品中含水量(%)。取3批平均值，結(jié)果見表2。

表2 3種遠(yuǎn)志飲片在不同試驗條件下的水分、總灰及醇浸出物變化

2.2.3 總灰分 取樣品粉末3 g，置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量，緩慢熾熱至600℃，使完全灰化并恒重，根據(jù)殘渣重量計算樣品中總灰分的含量(%)。結(jié)果見表2。

2.2.4 浸出物 取樣品粉末2 g，精密稱定，置100 mL錐形瓶中，精密加入70%乙醇50 mL，密塞，稱定重量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h，放冷，稱定重量，用70%乙醇補足重量，搖勻濾過，精密量取濾液25 mL，置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量，以干燥品計算樣品中醇浸出物的含量(%)。結(jié)果見表2。

表2說明，遠(yuǎn)志飲片易吸潮，5天時含水量增大2倍以上，10天時含水量增加到約3倍，而高溫時則含水量不斷下降(P＜0.05)。光照影響不明顯(P＞0.05)。總灰分不受高溫、高濕及光照影響(P＞0.05)。各因素對遠(yuǎn)志醇浸出物影響不明顯(P＞0.05)。

2.3 遠(yuǎn)志酸含量測定

2.3.1 對照品溶液的制備 精密稱取遠(yuǎn)志酸對照品1.6 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻即得濃度為0.16 mg/mL的對照品溶液。

2.3.2 供試品溶液的制備 取樣品，粉碎過20目篩。精密稱取干燥至恒重的粉末約1 g，置索氏提取器中，加甲醇適量，浸漬30 min，加熱回流5 h，提取液蒸干，殘渣加10%鹽酸溶液20 mL，微熱使溶解，水浴中水解2 h，取出，放冷，濾過，沉淀用水洗滌至中性，殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3.3 色譜條件 色譜柱 SHIMADZU VP－ODS(150 mm ×4.6 mm，5 μm)，流動相:甲醇－0.2% 磷酸溶液(30∶70);流速:0.8 mL/min;檢測波長:210 nm;柱溫:30 ℃;進樣量:20 μL。

2.3.4 測定結(jié)果 每個規(guī)格各3批，每批平行制備2份供試品溶液，測定結(jié)果RSD≤3%，取平均值。結(jié)果見表3。

表3 3種遠(yuǎn)志飲片在不同試驗條件下遠(yuǎn)志酸的含量變化

表3顯示，高溫高濕對遠(yuǎn)志3個飲片規(guī)格中遠(yuǎn)志酸的含量影響明顯，而光照影響較小。

3 討論

3.1 實驗結(jié)果顯示，溫度和濕度是影響遠(yuǎn)志飲片質(zhì)量的主要因素，其影響主要表現(xiàn)在性狀、含水量及指標(biāo)成分含量的變化。該研究結(jié)果說明，遠(yuǎn)志飲片應(yīng)密封包裝，放置在陰涼干燥處，才能保證飲片質(zhì)量。該結(jié)果與2010年版《中國藥典》(一部)和《全國中藥炮制規(guī)范》(1988年版)要求相一致。由于遠(yuǎn)志皂苷不穩(wěn)定，幾種苷元之間易發(fā)生轉(zhuǎn)化［10－11］，而高濕或高溫誘導(dǎo)產(chǎn)生了較多的遠(yuǎn)志酸，使樣品中遠(yuǎn)志酸含量升高，且以高濕增幅最大(10天時達2倍以上)。該結(jié)果與《本草利害》總結(jié)的“遠(yuǎn)志制過應(yīng)快速曝干，概因制過不可陳久，久則油氣戟人咽喉”的經(jīng)驗相一致［7］。

3.2 《中藥成方制劑》收載遠(yuǎn)志成方制劑76個，其中炮制品53方，占總方量的70%。炮制方中甘草制47方，占89%，蜜炙3方，占6%。2005年版《中國藥典》收載遠(yuǎn)志成方制劑9個，其中甘草制6方，蜜炙1方。說明遠(yuǎn)志、制遠(yuǎn)志和蜜遠(yuǎn)志是遠(yuǎn)志制劑的主要原料，其質(zhì)量直接影響著成藥的質(zhì)量。因此，研究遠(yuǎn)志主要飲片穩(wěn)定性的影響因素，為確定飲片包裝和貯藏條件提供依據(jù)。在此基礎(chǔ)上，進一步通過加速或長期穩(wěn)定性考察，確定3種飲片的有效期，保證臨床用藥安全有效。

［1］中國藥典［S］.一部.2010.

［2］張耀春，王立為.遠(yuǎn)志藥理研究進展［J］.國外醫(yī)藥·植物藥分冊，2004，19(2):59－63.

［3］鄭 璐，邱 蕾，張 瑤，等.遠(yuǎn)志皂苷對快速腦老化鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改善及對神經(jīng)遞質(zhì)的影響［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2010，33(3):183－186.

［4］彭汶鐸.遠(yuǎn)志皂苷H對離體平滑肌與心臟的作用［J］.中國藥學(xué)雜志，1999，34(4):241－243.

［5］彭汶鐸.遠(yuǎn)志皂苷的降壓作用及其機制(英文版)［J］.中國藥理學(xué)報1999，20(7):639－642.

［6］彭汶鐸，許實波.四種遠(yuǎn)志皂苷的鎮(zhèn)咳和祛痰作用［J］.中國藥學(xué)雜志，1998，33(8):491.

［7］孫俊杰.中藥飲片炮制工藝與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及GMP實施使用手冊(二)［M］.北京:中國中醫(yī)藥出版社，2006:824.

［8］國家藥品監(jiān)督局.中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則(國食藥監(jiān)注［2006］678號附件)［S］.2006:6－7.

［9］饒淑華.中藥制劑穩(wěn)定性研究方法探討［J］.江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1996，8(1):28－36.

［10］楊國紅，孫曉飛.反相高效液相色譜法測定遠(yuǎn)志中遠(yuǎn)志皂苷元的含量［J］. 藥物分析雜志，2001，21(4):260－263.

［11］姚新生.天然藥物化學(xué)［M］.4版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2004:287.