加強(qiáng)中藥制劑中與安全性相關(guān)成分的質(zhì)量控制

金 芳

(國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心，北京 100038)

隨著社會(huì)進(jìn)步和科學(xué)發(fā)展，中藥的不良反應(yīng)和毒副作用越來(lái)越引起人們的關(guān)注，中藥材法定標(biāo)準(zhǔn)中明確的大毒藥材、現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)的毒性成分及一些活性強(qiáng)的成分往往與制劑安全性有密切聯(lián)系，重視中藥制劑的安全性評(píng)價(jià)已逐步成為藥品安全性評(píng)價(jià)和研制者共同關(guān)注的問(wèn)題。因此，加強(qiáng)對(duì)中藥制劑中毒性藥材以及與安全性相關(guān)成分的質(zhì)量控制對(duì)保證制劑安全有效有十分重要的作用。下面結(jié)合審評(píng)工作中遇到的毒性藥材質(zhì)控問(wèn)題提出如下建議，希望對(duì)中藥研究者有所提示。

1 對(duì)含烏頭堿類(lèi)成分的質(zhì)量控制

川烏、草烏、附子、雪上一枝蒿等藥材具祛風(fēng)除濕、溫經(jīng)止痛等功能，在風(fēng)濕、外科和骨傷科制劑中應(yīng)用較多。這些藥材含有雙酯型生物堿及其它生物堿;雙酯型生物堿毒性較強(qiáng)，烏頭堿是其中毒性最大的一個(gè)二萜類(lèi)雙酯型生物堿，成人一次服用0.2 mg即有中毒反應(yīng)，一次口服2～3 mg可致死［1］。因此，需控制此類(lèi)制劑中雙酯型生物堿的含量以確保制劑的安全。

目前提供的申報(bào)資料中對(duì)烏頭堿的限量檢查法一般都是薄層色譜，2005年版和2010版中國(guó)藥典也一直沿用此法。該方法在一定程度上能反映制劑中烏頭堿量的分布情況，但它也有不足之處，如:1、烏頭堿與新烏頭堿、烏頭次堿等在一個(gè)展開(kāi)系統(tǒng)中難以完全分離，影響薄層結(jié)果的準(zhǔn)確性。2、處方中藥味多，申報(bào)資料中由于沒(méi)有提供薄層加樣回收率試驗(yàn)，難以評(píng)價(jià)供試液制備法是否合理。3、制劑中烏頭堿限量的規(guī)定缺乏依據(jù)等。針對(duì)上述情況，建議采用專(zhuān)屬性好的方法如高效液相法等對(duì)制劑中的烏頭堿進(jìn)行限量控制。如應(yīng)用薄層色譜限量法控制烏頭堿含量時(shí)，我們建議:1、規(guī)定烏頭堿一日最大服用量不大于2.5 mg(依據(jù)2010年版中國(guó)藥典一部附子項(xiàng)下的規(guī)定)。2、請(qǐng)?zhí)峁┓椒▽W(xué)研究資料，證明供試液制備方法的合理性。

2 對(duì)近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)的毒性成分的質(zhì)量控制

馬兜鈴酸Ⅰ曾經(jīng)作為一些藥材和制劑中的有效成分或指標(biāo)成分進(jìn)行質(zhì)量控制。隨著現(xiàn)代研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)馬兜鈴酸Ⅰ對(duì)腎臟有毒性。因此，當(dāng)制劑中的藥材可能含馬兜鈴酸Ⅰ時(shí)，都需進(jìn)行馬兜鈴酸Ⅰ的限量檢查，以保證制劑的安全。

在對(duì)馬兜鈴酸Ⅰ限量檢查時(shí)，若固定了儀器的最低檢出限后，制劑和藥材中能否檢出馬兜鈴酸Ⅰ與供試品的取樣量有關(guān)。因此，在進(jìn)行馬兜鈴酸Ⅰ檢測(cè)時(shí)，應(yīng)注意樣品取樣量不宜太小，建議供試液含生藥量(處方中全部藥味)不低于1 g/mL。同時(shí)還應(yīng)提供方法學(xué)研究資料。馬兜鈴酸Ⅰ限量規(guī)定可參照2010版中國(guó)藥典一部藥典細(xì)辛項(xiàng)下馬兜鈴酸Ⅰ小于10 mg/kg的規(guī)定。由于馬兜鈴酸Ⅰ在乙醚中的溶解度為“較小”或“能溶解”，從馬兜鈴藥材的乙醚部位中提取到了馬兜鈴酸Ⅰ，因此，制備供試液時(shí)慎用乙醚脫脂［2］。

銀杏酸是銀杏葉制劑引起人類(lèi)過(guò)敏反應(yīng)等中毒性反應(yīng)的主要成分，嚴(yán)重者引起患者死亡［3］。國(guó)際上對(duì)銀杏酸水平有嚴(yán)格的控制，如德國(guó)衛(wèi)生部規(guī)定限嚴(yán)格限制在5 mg/kg以下。我國(guó)2005年版和2010版中國(guó)藥典一部均規(guī)定在10 mg/kg以下。在通常的提取技術(shù)條件下，降低銀杏酸水平的同時(shí)伴隨著有效成分的大量損耗，研究者往往不重視對(duì)銀杏酸的控制。因此，為保證含銀杏葉制劑的安全性，在工藝研究和制劑中應(yīng)建立總銀杏酸限量檢查法，確保制劑中的總銀杏酸被除去，含量限度可參照2010版中國(guó)藥典一部銀杏葉提取物項(xiàng)下的相關(guān)要求。

千里光藥材在五官科中的應(yīng)用較廣泛。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)千里光藥材含有阿多尼弗林堿(C18H23NO7，吡咯里西啶生物堿，又稱(chēng)PAs)，這種生物堿對(duì)肝臟具有較強(qiáng)毒性［4］。WHO于1988年頒布了《IPCS環(huán)境衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)80:吡咯里西啶類(lèi)生物堿》，1989年頒布了《IPCS健康與安全指南第26號(hào):吡咯里西啶類(lèi)生物堿的健康和安全指南》，對(duì)含PA植物的分布、PA的結(jié)構(gòu)與毒性的關(guān)系、毒性特點(diǎn)及代謝特征、對(duì)人類(lèi)健康和環(huán)境的危害、人類(lèi)致毒劑量以及PA中毒的預(yù)防和急救措施等均提出了建議。2010版中國(guó)藥典一部千里光藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中控制了阿多尼弗林堿含量，規(guī)定不大于0.004%(4 mg/kg)。因此，當(dāng)制劑中含有千里光藥材或其它可能含有阿多尼弗林堿的藥材時(shí)，應(yīng)建立相應(yīng)的限量檢查法，規(guī)定不大于0.004%(4 mg/kg)，提供方法學(xué)研究資料，同時(shí)請(qǐng)控制投料藥材的質(zhì)量。

3 對(duì)既是毒性成分又是有效成分的質(zhì)量控制

風(fēng)濕、外科、骨傷科適應(yīng)癥制劑中含毒性藥材的情況較多，有些毒性成分還是有效成分，且活性成分較強(qiáng)，如馬錢(qián)子中的大毒成分士的寧、秋水仙和光慈菇中的秋水仙堿等、八角楓中的毒黎堿等生物堿、青風(fēng)藤中的青藤堿等生物堿、桃兒七中的鬼臼毒素等、雷公藤中的雷公藤內(nèi)脂甲等萜類(lèi)內(nèi)脂成分，稍服用過(guò)量，即會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)，甚至死亡。當(dāng)制劑中含有這些藥材時(shí)，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)投料藥材中毒性成分的含量控制，并加強(qiáng)工藝過(guò)程的考察，最終對(duì)制劑中的毒性成分建立有效的含量測(cè)定法，并規(guī)定含量范圍。它們的含量范圍確定可參照現(xiàn)代研究中較成熟的數(shù)據(jù)，如制劑中含有馬錢(qián)子粉或馬錢(qián)子時(shí)，可參照中國(guó)藥典一部馬錢(qián)子粉項(xiàng)下士的寧量的控制要求控制士的寧量不大于4.92 mg/d［5］，秋水仙堿可參照有關(guān)秋水仙堿制劑的劑量規(guī)定，一般不大于3 mg/d［6］，毒性成分含量范圍的確定還應(yīng)結(jié)合臨床研究或其它安全性研究樣品中含量的檢測(cè)數(shù)據(jù)，這樣才能保證制劑的有效性和安全性。

4 對(duì)活性較強(qiáng)的香豆素類(lèi)成分的質(zhì)量控制

香豆素是具有苯并α吡喃酮母核的天然物質(zhì)總稱(chēng)。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)香豆素是一類(lèi)活性較強(qiáng)，藥理作用較廣泛的成分［7］。補(bǔ)骨脂、白芷常用于治療白癜風(fēng)，主要有效成分為香豆素類(lèi)成分，具有光敏作用，但長(zhǎng)時(shí)間服用補(bǔ)骨脂后也具有肝細(xì)胞損傷和小鼠子宮重量減少、卵巢功能降低等副作用［8］。秦皮含有大量的秦皮乙素、秦皮甲素等香豆素類(lèi)成分，常用于治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎。對(duì)含有大量秦皮香豆素成分的新藥的審評(píng)中發(fā)現(xiàn)，秦皮香豆素可能具有一定的肝、腎毒性。蛇床子溫腎壯陽(yáng)、散寒祛風(fēng)、燥濕殺蟲(chóng)，含有較多的香豆素，較多臨床不良反應(yīng)有心跳加快、舌麻、惡心嘔吐等［9］。因此，制劑若中含有香豆素類(lèi)成分時(shí)，應(yīng)盡可能地建立單一成分或大類(lèi)成分的含量控制法，并規(guī)定含量范圍，這對(duì)保證制劑的安全性和有效性都有很重要的意義。

5 含礦物類(lèi)藥材中藥制劑中有毒性元素的質(zhì)量控制

含礦物藥的中藥制劑中砷鹽、重金屬的含量往往較高，有些是因?yàn)榈V物藥組成成分是砷、重金屬，有些是因?yàn)榈V物藥所處的礦產(chǎn)地污染了砷和重金屬等。從生物利用的角度看，砷鹽、重金屬只有被人體吸收以后才能夠產(chǎn)生作用。經(jīng)口服途徑給藥時(shí)，礦物藥中所含砷鹽、重金屬等一般只有溶解于胃液中的那部分可能被人體吸收［10，11］，外用途徑給藥的礦物藥，透過(guò)皮膚的成分才可能被吸收。模擬人體胃內(nèi)正常生理狀態(tài)，控制人工胃液可溶解的砷鹽或重金屬量，對(duì)于口服制劑而言，比控制總砷量、總重金屬量可能更為合理。因此，對(duì)于制劑中含有朱砂等礦物藥時(shí)，除了進(jìn)行總砷和總重金屬研究外，建議進(jìn)行酸可溶性砷鹽、重金屬研究，并在制劑中建立相應(yīng)的檢查項(xiàng)，其含量限度可參考WHO(JECFA)推薦的有害元素限量標(biāo)準(zhǔn)(見(jiàn)表1)。對(duì)于外用制劑中作為殘留物存在的砷鹽、重金屬的質(zhì)量控制，也可參照我國(guó)化妝品的要求。

酸可溶性砷鹽或重金屬:是指在模擬人體胃的正常生理狀態(tài)下可溶解于人工胃液(藥典2005版附錄ⅫA)中的砷鹽或重金屬。

表1 WHO(JECFA)推薦的有害元素限量標(biāo)準(zhǔn)

綜上，為保障人民用藥安全有效，應(yīng)重視并加強(qiáng)中藥制劑中與安全性相關(guān)成分的質(zhì)量控制。凡制劑中含有屬?lài)?guó)務(wù)院頒布的28種大毒藥材及各級(jí)地方標(biāo)準(zhǔn)收載并標(biāo)注為大毒的藥材、或近代研究發(fā)現(xiàn)的毒性成分及一些活性強(qiáng)且具有安全性隱患的成分、或含有朱砂、雄黃等礦物藥時(shí)，均應(yīng)對(duì)毒性成分或活性強(qiáng)且具有安全性隱患的成分進(jìn)行質(zhì)控研究，盡可能建立專(zhuān)屬性的質(zhì)控方法，同時(shí)加強(qiáng)對(duì)質(zhì)控方法學(xué)的研究。對(duì)毒性成分規(guī)定含量限度，對(duì)既是有效成分又是毒性成分的規(guī)定科學(xué)合理的含量范圍，以確保中藥制劑的安全和有效。

［1］江 燾，張世忠.法醫(yī)毒物分析［M］.北京人民衛(wèi)生出版社，1988.

［2］蘇 健，王寶琹，馬 騰，等.含馬兜鈴酸中藥材與制劑的含量測(cè)定方法研究概述［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2005，12(11):53-55.

［3］吳向陽(yáng)，仰榴青，陳 鈞.高效液相法測(cè)定銀杏葉提取物及制劑中銀杏酸的含量［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2003，38(11):846-849.

［4］梁愛(ài)華，葉祖光.千里光屬植物的毒性研究進(jìn)展［J］.中國(guó)中藥雜志，2006，31(2):93-97.

［5］中國(guó)藥典［S］.一部.2010:48.

［6］四川美康醫(yī)藥軟件研究開(kāi)發(fā)有限公司編著，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心監(jiān)制.《MCDEX，藥物臨床信息參考2008》［M］.重慶:重慶出版社，2008.

［7］佐建鋒，郭增軍，李教社.香豆素類(lèi)化合物的藥理研究進(jìn)展［J］.中藥材，2003，26(9):686-688.

［8］辛 丹，顏冬梅，王躍飛，等.補(bǔ)骨脂及相關(guān)化學(xué)成分的藥理與毒理研究進(jìn)展［J］.遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，11(7):70-72.

［9］劉沈林，熊寧寧，劉 芳，等.復(fù)方蛇床子制劑臨床試驗(yàn)不良反應(yīng)的倫理調(diào)查［J］.中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2004，9(2)238-240.

［10］王筱寅，羅江燕，張 蓓，等.4種含重金屬礦物中成藥中酸可溶性重金屬和總重金屬的含量測(cè)定［J］.中藥材，2009，32(4)631-632.

［11］關(guān)于含礦物中成藥中總重金屬和酸可溶性重金屬的比較研究［J］.藥物分析雜志，2006，26(11)1578-1580.