563例血型鑒定不符的原因分析及預(yù)防措施

武麗娟 李新建

ABO血型鑒定是無償獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前的必查項目，也是血站檢驗科必檢項目之一。ABO血型判斷的正確與否，直接影響臨床輸血工作。血站提供正確血型的血液，是臨床安全輸血的基礎(chǔ)，而錯誤血型的血液一旦輸入，則直接危及患者的生命[1]。我站目前血型鑒定程序是獻(xiàn)血者在采血點由采血人員通過紙板法進(jìn)行獻(xiàn)血前的血型正定型初篩；采血后留取兩管試管血，由檢驗科對留取的兩管試管血進(jìn)行正反定型鑒定。紙板法做正定型，有一定的局限性，受人員、環(huán)境、溫度、場地等影響，檢測結(jié)果存在一定的錯誤率[2]。而站內(nèi)進(jìn)行正反定型鑒定也會受多種因素影響而出現(xiàn)正反定型不一致的情況。筆者對2005～2010年ABO血型鑒定不符的情況進(jìn)行了回顧性統(tǒng)計和總結(jié)，現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本 2005～2010年本站無償獻(xiàn)血標(biāo)本208090份。

1.2 試劑 抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清試劑（北京金豪制藥股份有限公司）；A、B、O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）。所用試劑均經(jīng)批批檢合格且在有效期內(nèi)使用。

1.3 儀器 AT-plus2全自動加樣器（澳斯邦公司）；STAR全自動加樣器（澳斯邦公司）；Liswell血型判讀軟件（海深威公司）；HT3酶標(biāo)儀（奧地利）；340RT酶標(biāo)儀（奧地利）、96孔進(jìn)口U型板（澳斯邦公司）；T.S溫控孵育振蕩器（奧地利ANTHOS公司）、Werk Nr.平板離心機(jī)（德國）。

1.4 方法

1.4.1 采血車初篩血型正定型采用紙板法。使用抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清做正定型。

1.4.2 檢驗科正定型方法 微板法 用STAR全自動加樣器掃描標(biāo)本條碼，將預(yù)稀釋成5%的標(biāo)本紅細(xì)胞40微升平均分配到U型板的兩孔中各20微升，在兩孔內(nèi)分別加抗-A標(biāo)準(zhǔn)血清50微升，抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清50微升。孵育振蕩器轉(zhuǎn)速400、振幅1、震蕩6分鐘，平板離心機(jī)1000r/min離心1分鐘后，孵育振蕩器轉(zhuǎn)速1000、振幅3、震蕩2分鐘后輕磕微板，340RT酶標(biāo)儀判讀。

1.4.3 檢驗科反定型方法 微板法 用AT全自動加樣器掃描標(biāo)本條碼，將標(biāo)本血清60微升平均分配到U型板的兩孔中各30微升，同一標(biāo)本的兩孔內(nèi)分別加A標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞試劑30微升，B標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞試劑30微升。孵育振蕩器轉(zhuǎn)速400、振幅1、震蕩6分鐘，平板離心機(jī)1000r/min離心1分鐘后，孵育振蕩器轉(zhuǎn)速1000、振幅3、震蕩2分鐘后輕磕微板，HT3酶標(biāo)儀判讀。

1.4.4 軟件編程 非凝集（-）；凝集（+）。CUTOFF=0.60。

1.4.5 正反定型不符的標(biāo)本，待檢室再次留取辮血復(fù)查，疑難血型送質(zhì)控科確認(rèn)。

2 結(jié)果

2005～2010年各年采血人數(shù)、初篩血型錯誤人數(shù)、血型不符合率見表1；563份血型不符原因分類統(tǒng)計見表2。

表1 2005～2010年各年采血人數(shù)、初篩血型錯誤人數(shù)、血型不符合率

表2 563份血型錯誤分類統(tǒng)計表

3 討論

我們調(diào)查208090例無償獻(xiàn)血標(biāo)本，初篩血型錯誤563例，誤定率為0.3%，并且從2005年到2010年波動不大，誤定率與文獻(xiàn)報道基本相符[3]，血型誤定率雖然不是太高，但是ABO血型判斷的正確與否，不僅直接影響臨床輸血工作安全，還會降低獻(xiàn)血者對血站工作的信任感，并影響其發(fā)展成為固定獻(xiàn)血者，因此，我們還需進(jìn)一步采取措施盡可能降低血型的誤定率。

出現(xiàn)血型鑒定不相符的因素從表2可以看出，非人為因素如獻(xiàn)血者標(biāo)本含有強(qiáng)冷凝集素、亞型及抗原減弱僅107例，人為因素的例數(shù)為456例，占80.99%。人為因素中又可分為以下幾點原因：①采血車獻(xiàn)血人員較集中，工作人員因趕時間致使試驗反應(yīng)時間不足、反應(yīng)不完全；②工作環(huán)境不能保證適宜的溫度，這種情況尤以采血車明顯，經(jīng)常出現(xiàn)冬冷夏熱的情況,冬天室溫過低，強(qiáng)冷凝集素引起的假凝集等都可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果的出現(xiàn)[4]；③工作人員責(zé)任心不強(qiáng)，技術(shù)不過硬，操作失誤等都有可能造成血型的誤讀誤判、貼錯試管或血袋標(biāo)簽、留錯血樣標(biāo)本、計算機(jī)血源信息錄入錯誤等；④血型檢測試劑未被正常使用，出現(xiàn)試劑效價降低甚至失效試劑被使用的情況。

為盡量減少血型錯誤的發(fā)生，確保血型鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確率，我們應(yīng)采取以下預(yù)防措施:①在血型鑒定工作中，工作人員的培訓(xùn)至關(guān)重要[5],提高工作人員的責(zé)任意識和操作水平,工作人員要做到各負(fù)其責(zé)，忙而不亂，工作要有耐心，不能由于獻(xiàn)血者多或催促就將反應(yīng)時間縮短。在正確的溫度下保存試劑，認(rèn)真檢查試劑的批號和失效日期，保證血型檢測試劑被正常使用；②制訂嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程并在工作中嚴(yán)格遵守，掌握好試劑與紅細(xì)胞反應(yīng)比例，確保充分的反應(yīng)時間；加強(qiáng)核對，一方面要認(rèn)真核查實驗結(jié)果，另一方面要核對血樣標(biāo)本與血袋采血編號、獻(xiàn)血者姓名、血型，確保貼標(biāo)簽、填寫血型、計算機(jī)信息錄入等原始記錄準(zhǔn)確無誤，便于追蹤。③積極建設(shè)獻(xiàn)血屋，逐步減少甚至取代采血車，改善獻(xiàn)血環(huán)境，保證采血工作在適宜的溫度環(huán)境下開展；④為工作人員提供人文關(guān)懷，減少工作焦慮，使工作人員保持輕松愉快的心態(tài)。⑤出現(xiàn)錯血型后，高度重視重新留取血袋上的小辮血樣，再次進(jìn)行血型正定復(fù)核和反定符合工作[6]，杜絕錯血型血液發(fā)往臨床，保障臨床用血安全。

[1]刑文革，馬嶸，鄭懷競.國內(nèi)血站血型血清學(xué)檢驗的狀況調(diào)查[J].中國輸血雜志，2004，17（3）：188-190.

[2]徐國勝，黃可君.ABO血型初篩錯誤原因調(diào)查及預(yù)防對策[J].廣州醫(yī)藥，2010，41（1）：51-53.

[3]袁小玲，熊春梅，楊衛(wèi)紅，等.ABO血型鑒定不符的影響因素分析及預(yù)防措施[J].中國輸血雜志，2011，24（3）：350-351.

[4]張伯偉，郭如華.無償獻(xiàn)血者初篩血型定型錯誤及原因分析[J].中國輸血雜志，2002，15(3):189-189.

[5]胡繼征，陸典瑞，李啟輝.全自動微型板法檢測28397例獻(xiàn)血者ABO血型的統(tǒng)計分析[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報,2003,9(9):75.

[6]鐘傳村，沈奇榮.479例無償獻(xiàn)血者初檢血型錯誤原因分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2009，15（8）：41.