河北張家口地區豬瘟免疫狀況血清學調查

徐明舉,鄭志新,溫 哲,徐 彤

(1.河北北方學院動物醫學系,河北宣化075000;2.河北省張家口市動物衛生監督所,河北張家口075000)

豬瘟(CSF)是由瘟病毒屬的豬瘟病毒(CSFV)引起的豬的一種熱性高度接觸性傳染病,各年齡階段的豬和不同品種的豬對其均易感。豬瘟呈世界性分布,由于其危害程度高,對養豬業造成經濟損失巨大,所以世界動物衛生組織(OIE)將其列為A類傳染病,并規定為國際重點檢疫對象。1999年2月12日我國農業部也將豬瘟列為一類動物疫病。2007年我國將豬瘟納入國家強制性免疫范疇,應用我國研制的兔化豬瘟弱毒苗有效控制了豬瘟的大面積流行,但是目前該病在我國仍時有發生,依然是危害我國養豬業的主要傳染病之一。近年來養豬業在河北省張家口市一直處于穩步快速發展之中,飼養規模逐年擴大。但由于引種過于頻繁及中小型豬場收購豬飼養比例較大等原因,使得豬瘟的流行形式、發病特點和病理變化都發生了明顯的變化,主要表現為隱性感染、亞臨床型感染或非典型性感染,單憑經驗和臨床診斷十分困難,必須依賴實驗室檢測技術。ELISA方法檢測豬瘟抗原、抗體,操作簡單、快速[6],適用于群體監測,為國際貿易檢測豬瘟指定試驗之一。為了掌握本市不同規模豬場豬瘟疫苗免疫后抗體水平變化規律,對張家口地區38個規模化及中小型豬場不同階段豬群進行取樣,監測免疫后豬瘟抗體,以了解豬瘟疫苗免疫效果,為開展豬瘟的免疫預防提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 被檢樣品的采集 被檢樣品采自張家口地區的12個規模化豬場和26個中小型豬場。血清樣品的采集:耳靜脈采血,每頭10 mL,自然凝固析出血清,共采集1 256份血清樣品(其中12個規模化豬場498份、26個中小型豬場758份)。扁桃體樣品的采集:用采樣槍采集豬的扁桃體樣品565份(其中12個規模化豬場230份、26個中小型豬場335份)。樣品在河北北方學院動物醫學系傳染病實驗室檢測。

1.2 檢測試劑 豬瘟間接ELISA診斷試劑盒購自武漢科前動物生物制品有限責任公司,批號為201006213。豬瘟熒光標記抗體購自中國獸醫藥品監察所。

1.3 豬瘟間接ELISA試驗檢測抗體方法和判定標準 按診斷試劑盒操作說明書進行。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD630值大于或等于1.0,陰性對照孔平均OD630值必須小于0.3。樣品OD630值大于0.35,判為陽性;樣品OD630值小于 0.35,判為陰性。ELISA和HIA結果見表1。

表1 ELISA和HIA結果

1.4 直接熒光抗體試驗檢測方法和判定標準 新鮮的扁桃體制作組織切片,然后滴加豬瘟熒光標記抗體,充分反應后,封片,熒光顯微鏡下鏡檢,在視野里細胞輪廓清晰,扁桃體隱窩上皮細胞的胞漿呈現明亮的翠綠色或黃綠色熒光,則可判為豬瘟抗原陽性反應;熒光微弱,細胞形態不清或無熒光判為豬瘟抗原陰性反應。

2 結果

2.1 規模化及中小型豬場豬瘟抗體效價 見表2和表3。從表2和表3可以看出,規模化豬場中母豬、育肥豬、斷奶仔豬和哺乳仔豬的免疫合格率分別為89.83%、85.00%、87.12%和 95.31%。從表 3可以看出,中小型豬場中母豬、育肥豬、斷奶仔豬和哺乳仔豬的免疫合格率分別為39.80%、42.30%、23.14%和51.78%。

表2 規模化豬場不同日齡豬血清豬瘟抗體效價ELISA檢測結果

表3 中小型豬場不同日齡豬血清豬瘟抗體效價ELISA檢測結果

2.2 規模化及中小型豬場免疫狀況 見表4。從表4可以看出,12個規模化豬場有豬瘟免疫合格率均高于60%,8個豬場(66.67%)豬瘟免疫合格率高于90%;而在 26個中小型豬場卻有12個豬場(46.15%)豬瘟免疫合格率低于60%,僅有1個豬場(3.85%)豬瘟免疫合格率高于90%。

2.3 直接熒光抗體試驗結果 即豬瘟病毒抗原陽性狀況,見表5。

表4 規模化及中小型豬場免疫狀況

表5 規模化及中小型豬場豬瘟抗原陽性狀況

從表5可知,中小型養豬場豬瘟病毒感染率達16.4%,遠高于規模化豬場豬瘟病毒感染率(3.91%)。

3 討論與分析

3.1 本次調查結果顯示,規模化豬場母豬、育肥豬、斷奶仔豬和哺乳仔豬的免疫合格率分別為89.83%、85.00%、87.12%和 95.31%,均高于 80%(豬群豬瘟免疫保護臨界線),免疫狀況理想,豬群較為穩定,豬瘟病毒感染率很低,只有3.91%;而中小型豬場免疫合格率則明顯低于規模化豬場,分別為39.80%%、42.30%、23.14%和 51.78%,這主要是中小型豬場防疫意識淡薄,免疫程序制定不合理或免疫操作不當所致,或者中小型豬場的豬多購自外地或外場,無法準確掌握其抗體水平,這樣的豬豬瘟病毒感染率較高,往往在購入不久后或育肥時發生豬瘟。所以必須將疫苗接種和免疫監測有機結合起來,以免疫監測決定合理的免疫程序,達到最佳免疫效果。

3.2 一般認為,豬瘟抗體 HI效價大于 1∶16(ELISA OD630大于0.35)以上才具有保護力,而對豬群來說,免疫合格率在90%以上才能有效預防豬瘟的流行。本次調查結果表明,張家口市規模化豬場豬瘟免疫狀況較好,12個規模化豬場中有8個豬場免疫合格率達90%以上,這主要與規模化豬場比較重視豬瘟疫苗接種,堅持做好母豬配種前疫苗接種,種母豬長期接受免疫有關。

3.3 中小豬場豬瘟抗體水平較低的原因分析

3.3.1 疫苗質量問題 根據我市實際情況分析,疫苗質量問題可能是造成各個縣區豬瘟抗體滴度及抗體合格率普遍偏低的主要原因。中小豬場貪圖便宜,自購疫苗自行注射,使用了過期或失效疫苗。其次是保存和運輸問題,有的地方不按規定運輸,造成疫苗失效。

3.3.2 免疫操作中的問題 (1)免疫密度偏低,相當數量的豬只未得到有效免疫。(2)免疫接種,不按規定免疫劑量足量注射。(3)免疫注射技術水平參差不齊。(4)重復注射,注射了一次豬瘟疫苗,時過不久,又重新注射。(5)不做母源抗體監測,過早注射,干擾破壞母源抗體,影響疫苗免疫效果。(6)為了節省人力物力,注射不換針頭,造成相互感染。

3.3.3 免疫程序的問題 目前張家口市中小豬場基本沒有進行豬瘟抗體水平監測的意識和能力,無法根據抗體的消長規律制定科學合理的免疫程序,結果造成盲目免疫注射。加上實際生產中很難實行“全進全出”的管理模式,豬只大范圍頻繁調運,造成豬的批次不同,混合飼養,容易引起應激和發病。

3.3.4 先天性感染或持續性感染 是導致豬瘟疫苗免疫后抗體水平不能有效升高的重要原因。因此,通過直接熒光抗體試驗檢出并淘汰豬瘟抗原陽性豬,是凈化豬瘟的有效途徑之一。