系統性硬化患者中抗原纖維蛋白抗體的臨床意義探討

姚中強,王國峰,馬 軍,劉 堅,劉湘源,于孟學

(1.北京大學第三醫院風濕免疫科,北京100191;2.河北廊坊管道局醫院風濕免疫科;3.長治醫學院和平醫院醫學部;4.北京軍區總醫院風濕免疫科;5.中國醫學科學院北京協和醫院風濕免疫科)

系統性硬化(systemic sclerosis,SSc)是一種以皮膚先后發生水腫、硬化、萎縮為特點,累及血管、關節、肌肉及內臟的系統性自身免疫病。系統性硬化患者隨其血清中自身抗體的不同,其臨床表現、預后不盡相同,因此,識別患者外周血中的自身抗體有重要的臨床價值。

目前為止,已經發現的SSc患者中的自身抗體包括:抗著絲點抗體(ACA)、抗DNA拓撲異構酶Ⅰ抗體(又名抗Scl-70抗體)、抗RNA多聚酶Ⅲ抗體、抗U1RNP抗體、抗 PM-Scl抗體、抗 Ku抗體、抗U3RNP抗體等。其中原纖維蛋白是抗U3RNP抗體的主要抗原表位[1],國內關于抗原纖維蛋白抗體(anti-fibrillarin antibody,AFA)在系統性硬化中的臨床意義尚缺乏系統的研究,其在中國SSc患者中的陽性率及臨床意義尚不明了,本試驗擬對此展開研究。

1 資料與方法

1.1臨床資料來自北京大學第三醫院、廊坊市管道局醫院、北京軍區總醫院、長治和平醫院門診和病房的系統性硬化患者216例,男性28例,女性188例,平均年齡(45.06±9.88)歲,平均病程(5.59±2.93)年,所有患者均符合美國風濕病學會關于系統性硬化的分類標準。

1.2診斷標準器官系統受累的標準及定義:肌肉受累定義為體格檢查發現近端肌無力、或CK升高、或核磁共振/超聲/肌電圖發現肌肉炎癥表現。患者超聲心動圖估測肺動脈收縮壓峰值≥40 mmHg則認為患者存在肺動脈高壓,肺動脈高壓的嚴重程度分級如下:40-50 mmHg為輕度肺動脈高壓,51-69 mmHg為中度肺動脈高壓,≥70 mmHg重度肺動脈高壓。嚴重胃腸道受累定義為吸收不良綜合征、復發性假性腸梗阻或嚴重的需要胃腸外高營養的胃腸道病變。硬皮病腎危象定義為突發惡性高血壓伴有血清肌酐升高和(或)微血管病性溶血性貧血。心臟受累定義為充血性心衰癥狀或者EF＜45%、或者心肌特異性肌酶升高、核素心肌顯像異常或者心包積液或需要治療的心律失常。

1.3方法

1.3.1血清學檢測 抗核抗體(ANA)和抗著絲點抗體(ACA)用間接免疫熒光法檢測,抗Scl-70抗體和抗U1-RNP抗體采用免疫印跡方法進行檢測。

1.3.2酶聯免疫吸附法檢測抗原纖維蛋白抗體采用試劑盒(allelebiotech公司)進行檢測。使用倍比稀釋的陽性血清制作標準曲線,用標準曲線法獲得抗體的相對單位(relative unit,RU)滴度。按照文獻和試劑盒推薦,采用15 RU/ml作為 cut-off值。

1.3.3統計分析 抗原纖維蛋白抗體陽性組和陰性組年齡、病程及性別構成比的比較分別采用t檢驗和非參數檢驗。使用logistic回歸分析抗原纖維蛋白抗體與臨床特點及自身抗體的相關性。統計分析采用SPSS18軟件進行,P＜0.05為有統計學差異。

2 結果

2.1 抗原纖維蛋白抗體陽性組和陰性組之間人口學特點比較

216名系統性硬化患者中23例患者抗原纖維蛋白抗體陽性,陽性率為10.846%。從表1可見,抗原纖維蛋白抗體陽性組和陰性組之間患者年齡、病程及性別構成比之間無顯著差異。

2.2 抗原纖維蛋白抗體與患者臨床表現之間相關性分析

Logistic回歸分析表明,抗原纖維蛋白抗體與雷諾氏現象、肌炎、心臟受累、間質性肺炎、腎危象、嚴重胃腸道受累無關,而與彌漫型皮膚受累和肺動脈高壓顯著相關(見表2)。

2.3 抗原纖維蛋白抗體與系統性硬化患者自身抗體的相關性

多因素logistic回歸分析表明,抗原纖維蛋白抗體與抗拓撲異構酶抗體、抗U1RNP抗體相關,而與抗著絲點抗體無關(見表3)。

表1 抗原纖維蛋白抗體陰性組和陰性組之間人口學特征比較

表2 抗原纖維蛋白抗體與系統性硬化患者臨床表現的相關性分析

表3 抗原纖維蛋白抗體與其他的系統性硬化相關抗體的相關性分析

2.4 抗原纖維蛋白抗體與不同程度肺動脈高壓的相關性

從表4可見,抗原纖維蛋白抗體陽性患者發生輕度肺動脈高壓、中度肺動脈高壓和重度肺動脈高壓的風險均明顯增加,尤其是輕度肺動脈高壓的風險明顯增加。

表4 抗原纖維蛋白抗體與不同程度肺動脈高壓的相關性分析

3 討論

自身抗體在自身免疫病,尤其是系統性硬化中有重要價值,不僅僅提示疾病診斷,而且常與疾病臨床特點、預后等相關。原纖維蛋白是抗U3RNP抗體的主要抗原表位[1]。國外的研究表明,抗U3RNP抗體在系統性硬化中的陽性率為5%-8%[2]。我們的研究表明,抗原纖維蛋白抗體陽性率為10.65%,造成抗體陽性率不同的原因可能與種族、人群不同有關。有研究表明,非洲裔系統性硬化患者中AFA陽性率為 16%-22%,而高加索人種中只有4%[1,3,4]。我們納入的患者均為漢族,漢族系統性硬化患者此抗體陽性率介于高加索人群和非洲人之間。

我們的研究表明,AFA與彌漫型皮膚硬化相關,這與國外的研究類似,非洲裔美國系統性硬化患者中幾乎AFA陽性患者均為彌漫型皮膚受累者;而高加索人群中AFA在彌漫型皮膚受累患者中陽性率也顯著高于局限型受累者中,但是陽性率沒有非洲裔那么高[3,5,6]。我們的研究發現,抗拓撲異構酶抗體與AFA相關,可能原因是兩者均與彌漫型皮膚硬化相關。

國外的研究表明,AFA抗體陽性與患者發生腎危象有關[6],而我們的研究則與之結論相反,可能的原因是種族不同,也可能與我們國家的風濕病學界對腎危象的警惕性較高有關,治療系統性硬化患者較少使用大劑量激素。國外的研究還發現[2,6],AFA與患者發生肌炎有關,而我們的研究沒有發現這種聯系,其原因可能與種族有關,是否還有其他原因尚待進一步研究。

我們的研究發現,AFA抗體與肺動脈高壓相關,這與國外的研究類似[6]。說明在系統性硬化患者中,對于AFA陽性的患者,需要嚴密監測其肺動脈壓力。我們的研究發現,AFA與抗U1RNP抗體相關,兩者均與肺動脈高壓有關,其分子機制尚待進一步研究。國外報道,AFA陽性患者死亡風險沒有顯著增加[6],雖然我們的試驗沒有研究其與死亡的相關性,但是,我們研究了AFA與肺動脈高壓的相關性,發現其主要與輕度肺動脈高壓顯著相關,而肺動脈高壓與系統性硬化死亡相關性最強的是中高度肺動脈高壓,可能這是其中的一部分原因。

本研究表明,抗原纖維蛋白抗體陽性的患者更容易出現彌漫型皮膚受累和肺動脈高壓,可能需要更嚴密的臨床監測和干預。

[1]Baserga SJ,Yang XD,Steitz JA.An intact Box C sequence in the U3 snRNA is required for binding of fibrillarin,the protein common to the major family of nucleolar snRNPs[J].EMBO J,1991,10:2645.

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[6]Tormey VJ,Bunn CC,Denton CP,et al.Anti-fibrillarin antibodies in systemic sclerosis[J].Rheumatology,2001,40:1157.