清熱解毒方劑腹腔注射對急性腹膜炎大鼠血清 TNF-α、IL-6、IL-8 水平的影響

馮麗麗，張愛平，李華偉，龐明珍

(1鶴壁職業技術學院醫學院，河南鶴壁458030;2河南中醫學院第一附屬醫院)

研究發現［1］，腹腔感染過程中大量炎性細胞被激活，釋放大量炎性細胞因子，導致組織和臟器的功能障礙。中藥清熱解毒方劑具有抗炎作用，臨床上常用于感染性疾病的治療。2010年1月～2011年2月，我們對急性腹膜炎大鼠模型，在造模前腹腔內預防性注射清熱解毒方劑，觀察其血清中腫瘤壞死因子 α(TNF-α)、IL-6、IL-8 水平變化，探討清熱解毒方劑對這些細胞因子的影響以及對臟器的保護作用。

1 材料與方法

1．1 實驗動物分組及建模 成年健康 Wistar大鼠90只(河南中醫學院實驗動物中心提供)，雌雄不限，體質量200～220 g。標準顆粒飼料喂養1周后開始實驗。隨機分為正常組、模型組和實驗組，各30只。模型組和實驗組均按照文獻［2］的方法大鼠腹腔注射表皮葡萄球菌液制作腹膜炎大鼠模型。

1．2 清熱解毒方劑制備及給藥方法 清熱解毒方劑由河南中醫學院藥研室制備，為含生藥量1 g/ml的濃縮煎劑。實驗組于造模前1 h一次性給予清熱解毒方劑18 g/kg腹腔注射。

1．3 檢測指標及方法 模型組和實驗組分別于造模后6、12、24 h用10%水合氯醛麻醉，每次10只，取腹主動脈血5 ml采用ELISA法檢測血清中TNF-α、IL-6、IL-8。按ELISA試劑盒(北京晶美生物工程公司)說明書操作。

1．4 統計學方法 采用SPSS12．0統計軟件。計量資料以±s表示，采用配對t檢驗。P≤0．05為差異具有統計學意義。

2 結果

三組血清TNF-α、IL-6、IL-8水平比較見表1。

表 1 三組血清 TNF-α、IL-6、IL-8 水平比較(pg/ml，ˉx ±s)

3 討論

研究顯示，腹膜炎引發的感染目前仍是外科重癥患者的主要死因之一［3］。機體對重癥感染引起的膿毒癥是細菌、內毒素等抗原激活宿主單核巨噬細胞釋放多種細胞因子所致［4］。腹腔感染過程中大量被激活的炎性細胞釋放多種炎癥介質，包括促炎、抗炎細胞因子，TNF-α、IL-6、IL-8即是誘發膿毒血癥以及多器官功能衰竭的重要的促炎細胞因子［5］。

TNF-α是免疫炎癥反應的重要介質，由活化的單核巨噬細胞和T細胞產生具有激活中性粒細胞和刺激IL-8釋放等作用。TNF-α參與了機體的免疫損傷［6］。IL-8是一種中性粒細胞趨化因子，在其他細胞因子的作用下，單核巨噬細胞、中性粒細胞等均產生大量IL-8，并與上述細胞表面的IL-8受體結合，趨化炎癥細胞到達炎癥部位引起炎癥反應［7］。IL-6是一種主要由活化的單核巨噬細胞及B、T淋巴細胞和成纖維細胞、內皮細胞等分泌的具有多種生物功能的炎癥細胞因子，在機體炎癥反應中起著重要作用［8］。

本實驗發現，腹膜炎模型大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-8水平較正常組明顯升高(P＜0．05)。因此可以推斷，在腹膜炎時單核巨噬細胞、中性粒細胞等處于一種過激活狀態，釋放大量炎癥因子。

清熱解毒方劑由大黃、黃芩、白頭翁、敗醬草等中藥組成，清熱解毒復方制劑是中醫臨床常用藥物，目前多用于治療各種感染性疾病及因非感染疾病而出現的熱毒壅盛者，對某些腫瘤患者也有一定的療效。對單味清熱解毒中藥的研究已證明其具有抗菌、抗病毒、抗毒素、解熱、抗炎、調節免疫功能等作用。近年來清熱解毒復方制劑的實驗研究也受到關注。臨床上常用于治療急腹癥［9］。根據本實驗結果，腹膜炎模型大鼠預防性腹腔注射清熱解毒方劑(僅1次)后，其血清 TNF-α、IL-6、IL-8水平明顯低于沒有注射該方劑的模型組 (P均＜0．05)。提示清熱解毒方劑能夠顯著抑制因炎癥刺激造成的細胞因子的過度分泌。通過炎癥細胞因子網絡的免疫調節作用，阻斷了細胞因子網絡的惡性循環，減輕組織及臟器損傷。說明，清熱解毒方劑對急性腹膜炎大鼠起保護作用。

［1］陳紅風．中醫外科學［M］．北京:中國中醫藥出版社，2005:595．

［2］張秀麗，馬健飛，吳詠今，等．姜黃素預處理后大鼠急性腹膜炎腹膜腫瘤壞死因子α的檢測［J］．中國醫科大學學報，2009，38(10):749-750．

［3］吳少禎．常見疾病的診斷與療效判定標準［M］．北京:中國中醫藥出版社，1999:732．

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