ADVIA2120血液分析儀異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的可信性分析

潘 婉，高 飛，陳曉丹

（海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南 海口 570102）

隨著各種類型的全自動血液分析儀在臨床檢驗(yàn)中的廣泛應(yīng)用，血液常規(guī)檢驗(yàn)的工作效率和質(zhì)量都有了較大的提高。近年本院引進(jìn)的ADVIA 2120全自動血液分析儀（以下簡稱ADVIA2120）是繼BayerH*3和ADVIA120之后的目前較高檔次的聯(lián)合檢測型血液分析儀，其檢測速度快，提供參數(shù)多，重復(fù)性好，準(zhǔn)確性高[1]。為了了解其對異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的可信性，我們對有異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的標(biāo)本139例及無異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的標(biāo)本195例同時進(jìn)行手工顯微鏡檢，對檢查結(jié)果做分析與比較，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 儀器和試劑 德國拜耳公司生產(chǎn)的ADVIA 2120全自動血液分析儀，日本歐林巴斯光學(xué)株式會社生產(chǎn)的顯微鏡CX-21，所用試劑均為原裝配套，質(zhì)控物由美國伯樂公司提供，儀器用專門的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)。瑞氏-姬姆薩染液按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程自行配置。

1.2 標(biāo)本來源 收集2010年2月至2010年4月海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院各科臨床住院病人EDTA-K2抗凝靜脈血，有異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的139例及無異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的195例。

1.3 方法 ADVIA2120各項(xiàng)參數(shù)均經(jīng)校準(zhǔn)，每天用質(zhì)控物進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。患者靜脈采血1.0～2.0 ml，立即輕輕加到含有EDTA-K2的抗凝管中，迅速混勻，標(biāo)本采集后4 h內(nèi)按ADVIA 2120的儀器操作規(guī)程進(jìn)行測試。然后將ADVIA 2120異型淋巴細(xì)胞檢測結(jié)果與顯微鏡檢測結(jié)果比較。對有異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的標(biāo)本，同時用顯微鏡目測法檢測。另設(shè)置對照組，即無異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的標(biāo)本，也推片染色進(jìn)行顯微鏡目測。手工顯微鏡檢測按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[2]進(jìn)行，對儀器法提示有異型淋巴細(xì)胞報(bào)警的標(biāo)本做血涂片瑞特-姬姆薩染色，用顯微鏡目測法復(fù)檢。儀器提示有異型淋巴細(xì)胞且鏡檢證實(shí)者為“真陽性”，儀器提示有異型淋巴細(xì)胞而鏡檢未檢出者為“假陽性”，儀器無異型淋巴細(xì)胞提示而鏡檢檢出者為“假陰性”，儀器無異型淋巴細(xì)胞提示而鏡檢未檢出者為“真陰性”。其中敏感性=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%；特異性=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%；陽性預(yù)測值=真陽性/(真陽性+假陽性)×100%；陰性預(yù)測值=真陰性/(真陰性+假陰性)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

334例標(biāo)本儀器檢測與顯微鏡目測結(jié)果比較見表1。本組病例ADVIA2120異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的敏感性為86.1%,特異性為81.7%，陽性預(yù)測值為71.2%，陰性預(yù)測值為91.8%。兩法比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.28，P ＜ 0.05)。

表1 ADVIA2120檢測和顯微鏡目測結(jié)果比較（例）

3 討論

ADVIA 2120全自動血液分析儀是德國Bayer公司最新推出的全自動多參數(shù)血液分析儀，測試速度快，每小時可檢測120個標(biāo)本，它采用先進(jìn)的鞘流技術(shù)、激光散射技術(shù)和細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對全血細(xì)胞進(jìn)行分析。該儀器可用于血液樣本和生物體液的檢測，兩者具有同等的臨床應(yīng)用性能[3]。在白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)方面，該儀器通過過氧化物酶和嗜堿/核分葉兩個通道進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，并具有報(bào)警提示異常白細(xì)胞的功能。

儀器的設(shè)計(jì)原理保證了儀器檢測結(jié)果的敏感性和穩(wěn)定性[4]，用血液分析儀進(jìn)行全血細(xì)胞分析，總希望有較高的檢測靈敏度以避免漏檢，但這勢必會帶入假陽性。本實(shí)驗(yàn)對ADVIA 2120有異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的139例標(biāo)本進(jìn)行分析，結(jié)果顯示異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的敏感性為86.1%，特異性為82.0%，陽性預(yù)測值為71.2%，陰性預(yù)測值為91.8%，與人工顯微鏡檢有顯著性差異。99例為真陽性，其中17例為腫瘤放化療后患者，4例為新生兒患者，3例為白血病患者，3例為肺炎患者，1例為傳染性單核細(xì)胞增多癥患者，1例為感染患者，1例為消化道疾病患者，1例為帶狀皰疹患者。將195例未出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的標(biāo)本也進(jìn)行顯微鏡檢，16例為假陰性，其中9例為腫瘤放化療后患者，4例為感染患者，1例為消化道疾病患者，1例為腎病患者，1例為新生兒患者。

通常認(rèn)為異型淋巴細(xì)胞是EBV病毒感染所引起的單核—巨噬系統(tǒng)的異常增生，EBV與B淋巴細(xì)胞受體結(jié)合，在不斷增殖與復(fù)制過程中，被T淋巴細(xì)胞識別，激發(fā)抑制性T細(xì)胞(Ts/c)增殖并自身發(fā)生轉(zhuǎn)化，形成細(xì)胞毒性效應(yīng)，這種受刺激后異常增殖的T細(xì)胞和少量B細(xì)胞出現(xiàn)在外周血中便形成異型淋巴細(xì)胞。根據(jù)形態(tài)特征將其分為三型：Ⅰ型(空泡型)，胞體比正常淋巴細(xì)胞稍大，多為圓形或橢圓形，核常偏位，染色質(zhì)粗糙呈網(wǎng)狀或小塊狀，排列不規(guī)則，胞漿量豐富，深藍(lán)或灰藍(lán)色，有空泡；Ⅱ型(不規(guī)則型)，胞體較大，外形常不規(guī)則，可有多數(shù)偽足，核圓或橢圓，著色較淺，胞漿量豐富，淺藍(lán)色或灰藍(lán)色，有透明感，邊緣著色深藍(lán)，一般無空泡，可有少數(shù)嗜天青顆粒；Ⅲ型(幼稚型)，胞體較大，外形常不規(guī)則，核圓或橢圓，染色質(zhì)呈網(wǎng)狀排列，可見1～2個核仁，胞漿深藍(lán)色，可有少數(shù)空泡。普遍認(rèn)為EB病毒感染者血液中會出現(xiàn)大量的異型淋巴細(xì)胞，是傳染性單核細(xì)胞增多癥的特殊實(shí)驗(yàn)室檢查特點(diǎn)。臨床發(fā)現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞可在其他病原性病毒感染中出現(xiàn)，異型淋巴細(xì)胞的增多與多種病毒的感染及變態(tài)反應(yīng)有關(guān)[5]，并且異型淋巴細(xì)胞的百分率也會高于10%以上。

ADVIA 2120對全血細(xì)胞進(jìn)行分析，不是由細(xì)胞核、細(xì)胞漿、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的整體差異來鑒別細(xì)胞，因此不可避免存在干擾因素，而產(chǎn)生一定的誤差。單核細(xì)胞和大淋巴細(xì)胞在體積、顆粒及染色質(zhì)形態(tài)上均與異型淋巴細(xì)胞有一定的相似性，以及未溶解完全而腫脹的紅細(xì)胞的干擾使儀器對異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的假陽性率高。另外由于細(xì)胞的病理或藥物作用，使細(xì)胞的大小、形態(tài)及內(nèi)容物發(fā)生改變，其產(chǎn)生的散射光信號發(fā)生不規(guī)則的變化使儀器無法正確識別而報(bào)警。人工分類則可以通過顯微鏡根據(jù)細(xì)胞核、細(xì)胞漿、顆粒、核染色質(zhì)等特征對異型淋巴細(xì)胞進(jìn)行分析，鏡檢的準(zhǔn)確性與檢驗(yàn)者的經(jīng)驗(yàn)、對細(xì)胞的認(rèn)知程度、血涂片的制作質(zhì)量、計(jì)數(shù)部位、分類細(xì)胞數(shù)多少等有關(guān)。因?yàn)榇嬖谌藶榕袛嗟目赡苄院蛢x器原理的缺陷性，我們對有異常提示的標(biāo)本，仍應(yīng)按照操作規(guī)程認(rèn)真進(jìn)行顯微鏡目測復(fù)核以免漏診及誤診，確保血液分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和權(quán)威性，滿足臨床的需要，這也是循證醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的要求，使檢驗(yàn)的每一項(xiàng)參數(shù)體現(xiàn)臨床價(jià)值。

綜上所述，ADVIA2120全自動血液分析儀異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示具有一定的可信性，陽性預(yù)測值高，但其假陽性率也較高（28.8%），是一種對大批量全血標(biāo)本進(jìn)行血細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類快速而有效篩檢的血液分析儀。因此對異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示可作為一個有效的過篩工具，還不能完全替代顯微鏡檢測，只有將兩者相互結(jié)合，才能保證結(jié)果的準(zhǔn)確性、報(bào)告的可靠性，進(jìn)而將血液學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)提高到一個新的水平。

[1]吳新忠,龐 鑫,羅福東,等.Bayer ADVIA 2120全自動血細(xì)胞分析儀的性能評價(jià)[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)儀器與應(yīng)用,2007,19(6)：62-64.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社,2006：123-124.

[3]Harris N,Jou J M,Devoto G,et al.Performance evaluationof the ADVIA 2120 hematology analyzer：an international multicenter clinical trial[J].LabHematol,2005,11(1)：62-70.

[4]叢玉隆,樂家新.現(xiàn)代血細(xì)胞分析技術(shù)與臨床[M].北京：人民軍醫(yī)出版社,2005：181-200.

[5]陳偉雄.外周血異型淋巴細(xì)胞增高細(xì)胞免疫變化的探討[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,6(4)：90-91.